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Bernabé Pérez Ximena
Cavia Pérez Brisa Carol
Cortés Avila Lezid Dahize
Crescencio Medina Diana Laura
Piña Dávalos Nayelli Elizabeth
Rangel Sánchez Alison Michell
El ADN de E. coli:
Expermiento de CAIRNS
Experimento de Meselson y Stahl demostraron que el DNA de E.
coli se replica de forma semiconservativa ,está basado en la
variación de la densidad de flotación del DNA derivada de la
utilización del isótopo pesado del nitrógeno (N15) y el análisis
de dicha variación mediante la técnica de ultracentrifugación en
gradiente de Cloruro de Cesio.
INTRODUCCIÓN
Los experimentos realizados por Cairns (1963) con bacterias
Escherichia coli permitieron determinar la existencia de un
punto fijo u origen de replicación a partir del cual el genoma
empezaba a replicarse. Los experimentos consistían en
mantener un cultivo de E. coli creciendo en un medio que
contenía timidina tritiada (timina marcada con tritio), de forma
que el ADN quedara marcado radiactivamente pudiendo
efectuarse una autor-radiografía. A continuación se observaba
al microscopio. Los resultados indicaban que la replicación en E.
coli se iniciaba en un punto concreto.
La auto-radiografía mostró que el ADN muestra una burbuja de
replicación, que crece hasta replicar totalmente el cromosoma
bacteriano circular. La replicación partiría en un sitio de inicio y
se expandiría en ambas direcciones a una velocidad de 45.000
nucleótidos en cada minuto a 37°C.
EXPERIMENTO DE
CAIRNS
Venus has a beautiful name and is the second planet from
the Sun. It’s terribly hot—even hotter than Mercury—and its
atmosphere is extremely poisonous. It’s the second-
brightest natural object in the night sky after the Moon
GENOMA BACTERIANO Toda la información genética esencial para la vida de la bacteria
está contenida en una única molécula de ácido
desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena y circular, cerrado
por enlace covalente. Dicha molécula se denomina cromosoma
bacteriano. Muchas bacterias poseen además ADN
extracromosómico, también circular y cerrado, denominado
ADN plasmídico por estar contenido en los plásmidos. Éstos,
portan información génica para muchas funciones que no son
esenciales para la célula en condiciones normales de
crecimiento..
Todas las células deben enfrentarse al problema de como lograr contener en su estructura
moléculas tan grandes como el ADN. La E. coli, los 4.200 Kb de su genoma implican una
longitud de 1,3 mm es decir unas mil veces la longitud de la célula. Las bacterias no poseen
histonas asociadas a su genoma y en consecuencia no tienen la posibilidad de compactar su
ADN en estructuras tipo nucleosomas como las células eucariotas. Por lo tanto, deben
compactar su ADN de otra manera. Esto se logra porque el ADN circular cerrado es capaz de
adoptar una estructura terciaria denominada superenrollamiento, que implica el enrollamiento
del eje de la doble hélice sobre si mismo
ADN SUPERENROLLADO
Superenrollamiento del ADN. Una molécula de ADN circular relajado puede ser
“retorcida” para formar una molécula superenrrollada negativamente. Esta reacción es
catalizada por una enzima “girasa”, mientras que la reacción inversa lo es por una
“topoisomerasa”.
Este superenrollamiento se dice que tiene sentido negativo porque tiene el sentido
contrario al enrollamiento de una hebra de ADN sobre la otra. Esto supone para la
bacteria una fuente de almacenamiento de energía para ser usada en muchos
procesos fisiológicos que la requieren, por ejemplo la separación de las dos hebras
de ADN necesaria para la replicación y la transcripción
Las bacterias poseen enzimas (topoisomerasas) capaces de alterar la estructura del
ADN, modificando su superenrrollamiento. Estas topoisomerasas actúan agregando
o eliminando vueltas superhelicoidales y cumplen un rol importante en los procesos
de replicación y transcripción del ADN. Además, es interesante mencionar que
algunas de las topoisomerasas como la ADNgirasa, son blanco de acción de los
antibióticos del grupo de las quinolonas, como el ácido nalidíxico.
Porta genes que le confieren nuevas propiedades fenotípicas y que en algunos
casos le son útiles para su adaptación al crecimiento en determinados ambientes..
Los plásmidos contienen genes que codifican enzimas capaces de degradar
algunos antibióticos, permitiendo que la bacteria sobreviva a la acción de los
mismos.
Los plásmidos pueden clasificarse según distintos criterios, por ejemplo por su
tamaño, su número de copia o el tipo de genes que contiene (plásmidos de
virulencia, plásmidos de resistencia a antibióticos, etc.). También pueden clasificarse
en grupos de incompatibilidad; se dice que dos plásmidos pertenecen al mismo
grupo de incompatibilidad si son incapaces de coexistir en la misma bacteria.
PLÁSMIDOS
GENES “SALTARINES”
DE LAS BACTERIAS ● Los elementos transponibles son segmentos de ADN capaces de
moverse desde una posición a otra en el genoma. Es decir que pueden
transponerse o “saltar” desde un sitio determinado del genoma,
separándose del resto del ADN, hasta otro sitio distinto al cual se
integran. También pueden transponerse desde el cromosoma a un
plásmido o viceversa o a distintos
● Existen dos tipos de elementos transponibles: las secuencias de
inserción (elementos IS) y los transposones (Tn).
● La inserción de un elemento transponible puede producir diferentes
efectos sobre la expresión de la información génica como impedir la
funcionalidad de un gen o activar la expresión de otro.
. Los elementos IS son segmentos pequeños de ADN, de aproximadamente 1 a 2 Kb
que contienen la información genética mínimamente necesaria para la
transposición. Poseen secuencias específicas en ambos extremos del fragmento
que consisten en repeticiones invertidas una respecto de la otra. Estas secuencias,
son reconocidas específicamente por enzimas codificadas en el mismo elemento
IS, denominadas transposasas, responsables de la integración del elemento al
sitio blanco del genoma
Los Tn son segmentos de ADN que además de portar la información necesaria
para la transposición, contienen genes que pueden codificar diferentes
propiedades fenotípicas. Dentro de éstas se destaca la resistencia a ciertos
antibióticos, como es el caso de la resistencia de alto nivel a la gentamicina que
tienen algunas cepas de Enterococcus sp. Algunos plásmidos poseen uno o mas Tn
que portan determinantes de resistencia a antibióticos; la capacidad de estos
elementos para transponerse de un plásmido a otro, proporciona a la bacteria
gran flexibilidad para desarrollar resistencia, dado que dichos plásmidos son
generalmente conjugativos, por lo que pueden transferirse entre distintas bacterias
● file:///C:/Users/ADMIN/Documents/Genetica%20Bacteriana.pdf.
BIBLIOGRAFÍA
GRACIAS
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  • 1. Bernabé Pérez Ximena Cavia Pérez Brisa Carol Cortés Avila Lezid Dahize Crescencio Medina Diana Laura Piña Dávalos Nayelli Elizabeth Rangel Sánchez Alison Michell El ADN de E. coli: Expermiento de CAIRNS
  • 2. Experimento de Meselson y Stahl demostraron que el DNA de E. coli se replica de forma semiconservativa ,está basado en la variación de la densidad de flotación del DNA derivada de la utilización del isótopo pesado del nitrógeno (N15) y el análisis de dicha variación mediante la técnica de ultracentrifugación en gradiente de Cloruro de Cesio. INTRODUCCIÓN
  • 3. Los experimentos realizados por Cairns (1963) con bacterias Escherichia coli permitieron determinar la existencia de un punto fijo u origen de replicación a partir del cual el genoma empezaba a replicarse. Los experimentos consistían en mantener un cultivo de E. coli creciendo en un medio que contenía timidina tritiada (timina marcada con tritio), de forma que el ADN quedara marcado radiactivamente pudiendo efectuarse una autor-radiografía. A continuación se observaba al microscopio. Los resultados indicaban que la replicación en E. coli se iniciaba en un punto concreto. La auto-radiografía mostró que el ADN muestra una burbuja de replicación, que crece hasta replicar totalmente el cromosoma bacteriano circular. La replicación partiría en un sitio de inicio y se expandiría en ambas direcciones a una velocidad de 45.000 nucleótidos en cada minuto a 37°C. EXPERIMENTO DE CAIRNS
  • 4.
  • 5. Venus has a beautiful name and is the second planet from the Sun. It’s terribly hot—even hotter than Mercury—and its atmosphere is extremely poisonous. It’s the second- brightest natural object in the night sky after the Moon GENOMA BACTERIANO Toda la información genética esencial para la vida de la bacteria está contenida en una única molécula de ácido desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena y circular, cerrado por enlace covalente. Dicha molécula se denomina cromosoma bacteriano. Muchas bacterias poseen además ADN extracromosómico, también circular y cerrado, denominado ADN plasmídico por estar contenido en los plásmidos. Éstos, portan información génica para muchas funciones que no son esenciales para la célula en condiciones normales de crecimiento..
  • 6. Todas las células deben enfrentarse al problema de como lograr contener en su estructura moléculas tan grandes como el ADN. La E. coli, los 4.200 Kb de su genoma implican una longitud de 1,3 mm es decir unas mil veces la longitud de la célula. Las bacterias no poseen histonas asociadas a su genoma y en consecuencia no tienen la posibilidad de compactar su ADN en estructuras tipo nucleosomas como las células eucariotas. Por lo tanto, deben compactar su ADN de otra manera. Esto se logra porque el ADN circular cerrado es capaz de adoptar una estructura terciaria denominada superenrollamiento, que implica el enrollamiento del eje de la doble hélice sobre si mismo ADN SUPERENROLLADO Superenrollamiento del ADN. Una molécula de ADN circular relajado puede ser “retorcida” para formar una molécula superenrrollada negativamente. Esta reacción es catalizada por una enzima “girasa”, mientras que la reacción inversa lo es por una “topoisomerasa”.
  • 7. Este superenrollamiento se dice que tiene sentido negativo porque tiene el sentido contrario al enrollamiento de una hebra de ADN sobre la otra. Esto supone para la bacteria una fuente de almacenamiento de energía para ser usada en muchos procesos fisiológicos que la requieren, por ejemplo la separación de las dos hebras de ADN necesaria para la replicación y la transcripción Las bacterias poseen enzimas (topoisomerasas) capaces de alterar la estructura del ADN, modificando su superenrrollamiento. Estas topoisomerasas actúan agregando o eliminando vueltas superhelicoidales y cumplen un rol importante en los procesos de replicación y transcripción del ADN. Además, es interesante mencionar que algunas de las topoisomerasas como la ADNgirasa, son blanco de acción de los antibióticos del grupo de las quinolonas, como el ácido nalidíxico.
  • 8. Porta genes que le confieren nuevas propiedades fenotípicas y que en algunos casos le son útiles para su adaptación al crecimiento en determinados ambientes.. Los plásmidos contienen genes que codifican enzimas capaces de degradar algunos antibióticos, permitiendo que la bacteria sobreviva a la acción de los mismos. Los plásmidos pueden clasificarse según distintos criterios, por ejemplo por su tamaño, su número de copia o el tipo de genes que contiene (plásmidos de virulencia, plásmidos de resistencia a antibióticos, etc.). También pueden clasificarse en grupos de incompatibilidad; se dice que dos plásmidos pertenecen al mismo grupo de incompatibilidad si son incapaces de coexistir en la misma bacteria. PLÁSMIDOS
  • 9.
  • 10. GENES “SALTARINES” DE LAS BACTERIAS ● Los elementos transponibles son segmentos de ADN capaces de moverse desde una posición a otra en el genoma. Es decir que pueden transponerse o “saltar” desde un sitio determinado del genoma, separándose del resto del ADN, hasta otro sitio distinto al cual se integran. También pueden transponerse desde el cromosoma a un plásmido o viceversa o a distintos ● Existen dos tipos de elementos transponibles: las secuencias de inserción (elementos IS) y los transposones (Tn). ● La inserción de un elemento transponible puede producir diferentes efectos sobre la expresión de la información génica como impedir la funcionalidad de un gen o activar la expresión de otro.
  • 11. . Los elementos IS son segmentos pequeños de ADN, de aproximadamente 1 a 2 Kb que contienen la información genética mínimamente necesaria para la transposición. Poseen secuencias específicas en ambos extremos del fragmento que consisten en repeticiones invertidas una respecto de la otra. Estas secuencias, son reconocidas específicamente por enzimas codificadas en el mismo elemento IS, denominadas transposasas, responsables de la integración del elemento al sitio blanco del genoma Los Tn son segmentos de ADN que además de portar la información necesaria para la transposición, contienen genes que pueden codificar diferentes propiedades fenotípicas. Dentro de éstas se destaca la resistencia a ciertos antibióticos, como es el caso de la resistencia de alto nivel a la gentamicina que tienen algunas cepas de Enterococcus sp. Algunos plásmidos poseen uno o mas Tn que portan determinantes de resistencia a antibióticos; la capacidad de estos elementos para transponerse de un plásmido a otro, proporciona a la bacteria gran flexibilidad para desarrollar resistencia, dado que dichos plásmidos son generalmente conjugativos, por lo que pueden transferirse entre distintas bacterias