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GRUPO 1
TALLER:
VIRUS
CONTENIDO
1. ¿Qué es un virus?
2. ¿Qué características generales tienen los virus?
3. ¿Cuál es la composición química y las funciones
del genoma viral?
4. ¿Cuál es la composición química y las funciones
de la cápside?
5. ¿Cuál es la composición química y las funciones
de la envoltura?
6. ¿Cuál es la sensibilidad de los virus desnudos y
envueltos con respecto
a los agentes físico-químicos?
7. ¿Qué es la simetría viral?
8. ¿Qué tipos de simetría viral conoce? De
ejemplos de cada una de las
simetrías.
9. ¿Cuáles son las etapas de la replicación viral?
10.¿En qué sitio de la célula hospedadora se
produce la replicación de los
virus con genoma DNA?
11. ¿En qué sitio de la célula hospedadora se
produce la replicación de los
virus con genoma RNA?
12.¿Qué funciones tienen las proteínas tempranas
y las proteínas tardías?
13.¿Cómo es la replicación de los retrovirus?
14.¿Qué es un provirus?
15. ¿Cuáles son los métodos de estudio de los
virus?
16.¿Qué es el efecto citopático viral?
17.¿Puede dar por lo menos 3 ejemplos de efecto
citopático viral?
18. ¿Qué es un bacteriófago?
19.¿Qué es el ciclo lítico y el ciclo lisogénico?
20. ¿Qué importancia tiene la lisogenia en su
relación con la virulencia
bacteriana?
21. ¿Qué son los priones?
22. ¿Con qué patologías están relacionados los
priones?
¿Que es un virus?
01
Son partículas pequeñas que llegan a medir entre
20 y 300 nm.
Están constituidos por un ácido nucleico que
pueden ser:
● ADN
● RNA
Los virus tienen una envoltura llamada
“cápside”que son un conjunto de proteínas que
envuelve su material genético del virus , en
algunos casos cuentan con una envoltura externa
de lipoproteína, los cuales son capaces de infectar
las células.
Estos no pueden reproducirse por sí mismo por lo
que requerirán de los componentes estructurales
y metabólicos de una célula viva para su
reproducción.
➔ Los virus que infectan a los
humanos son virus humanos, el
cual se considera junto con la
clase general del virus animal.
➔ Las que infectan a las bacterias
se llaman bacteriofafos
(fagos).
➔ Y las que infectan a las plantas
se denominan virus vegetales.
Los virus no tienen:
● Nucleo
● Citoplasma
● Mitocondrias
● Otros organelos.
¿Qué características generales tienen los virus?
TAMAÑO DEL VIRUS
El tamaño del virus puede variar, la cual se encuentra entre los 20 a 300 nm de diámetro.
02
Menor tamaño Mayor tamaño
Llegan a medir 20 nm.
(La milésima parte de un micrón)
Se realiza la visualización
a través del microscopio
electrónico.
Erythrovirus B19 (18 nm.)
Poliomeliti (27 nm.)
Alcanzan los 300 nm.
Los poxvirus (300 nm.)
Virus de la viruela
Virus del molusco
contagioso
COMPOSICIÓN QUÍMICA
Acido desoxirribonucleico (DNA)
El Ácido nucleico es usado para el
desarrollo y funcionamiento por
parte de algunos virus, donde
invaden a una célula huésped
para replicarse y propagarse.
Acido ribonucleico (RNA)
También son usados como
material genético en la que su
proceso de replicación
necesita del ARN.
Proteinas
Estos se agrupan de acuerdo
con su función y en grupos de
proteínas virales incluyendo las
estructurales, no estructurales,
reguladoras y accesorias.
COMPUESTO PRINCIPALMENTE POR: Algunos contienen lipidos y
glucidos:
➔ La envoltura vírica es una
membrana lipídica que es muy
común en los virus animal.
➔ Los glúcidos son uno de los
lugares de reconocimiento del
patógeno para unirse e infectar
la célula y forma parte de las
glicoproteínas presentes en la
envoltura.
ESTRUCTURA
SE
CLASIFICAN:
A) Virus de
Nucleocapside
Desnuda
Estos virus no poseen
envoltura.
B) Virus de
Nucleocapside
Envuelta
Estos poseen su
estructura externa de
la envoltura.
ESTOS POSEEN:
Envoltura
Capside
Genoma viral o
Nucleoide
Influenza
Virus (HPV)
SENSIBILIDAD DE LOS VIRUS A
FACTORES DEL MEDIO AMBIENTE Y A
OTROS AGENTES
OTRAS CARACTERÍSTICAS:
Virus sin envoltura:
La disposición de
proteínas con que
cuentan les confiere
una mayor
resistencia a
condiciones y
factores
medioambientales.
Virus con envoltura:
Estos en cambio se
muestran más
sensibles, ya que su
envoltura lipídica se
ve comprometida
por la mayoría de
los desinfectantes y
detergentes.
Simetria:
De acuerdo a esto se
pueden observar los
distintos tipos de simetría
que tiene el virus, como:
● Simetría helicoidal
desnuda
● Helicoidal envuelta
● Icosaédrica desnuda
● Icosaédrica envuelta
● Compleja
Replicacion Viral:
Tiene la característica de
poder replicarse a través
de otra célula viva,
dependiendo de ellas para
sufabricacion de copias.
¿Cuál es la composición química y las funciones del genoma viral?
03
El genoma viral contiene instrucciones para la
fabricación de nuevos virus, y dependiendo de su
composición química que está basado
principalmente en 2 tipos de moléculas, ácidos
nucleicos del ADN o ARN y unas series de
proteínas como cubierta protectora del material
genético
Nucleótidos
ADN-ácido
desoxirribonucleico
Nucleótidos
ARN-ácido
ribonucleico
Citosina
Guanina
Adenina
Uracilo
Citosina
Guanina
Adenina
Timina
¿Cuál es la composición química y las funciones de la cápside?
04
Es una capa protectora externa de un virus, que protege el ácido nucleico viral, los conjuntos de su
unidad (capsómeros) forman una estructura helicoidal siendo una cubierta exterior de proteína o
poliproteína de la cápside vírica que contiene el material genético de un virus.
➔ Protección del ácido nucleico de la desecación y de las enzimas
tisulares.
➔ Presenta estructuras que permiten la unión del virus a los receptores de
membrana de la célula que infectan.
➔ Actúan como complejo antígeno, estimulando la respuesta inmune del
huésped.
FUNCIONES
¿Cuál es la composición química y las funciones de la
envoltura?
Los virus varían en tamaños ,formas y ciclos de vida.
Sin embargo los virus tienen alguna característica en
común.
Incluyen:
➔ Una cubierta protectora de proteína o cápside
➔ Un genoma de ácido nucleico, ADN o ARN, dentro de
la cápside
➔ Una capa de membrana llamada envoltura (algunos
pero no todos los virus).
5
Capsides de virus
Se compone de muchas moléculas de
proteínas . Las proteínas se unen para
formar unidades llamadas capsómeros. Las
proteínas de la cápside siempre están
codificadas por el genoma del virus, lo que
significa que es el virus (no la célula
hospedera) el que proporciona las
instrucciones para hacerlas.
Las cápsides pueden tener diversas formas,
pero las más comunes son las siguientes :
1.-Icosaedrica
2.-Filamentosa
3.-Compleja
Envolturas viricas
Los virus también tienen una membrana lipídica
externa conocida como envoltura , que rodea
toda la cápside.Los virus con envoltura no
proporcionan instrucciones para los lípidos de
la misma.
No son una característica universal de los virus.
Los virus tienen material genético (un
genoma) hecho de ácido nucleico, por otra
parte, pueden utilizar el ARN o el ADN, que son
tipos de ácido nucleico.
Los virus pueden tener todas las
combinaciones posibles de cadenas y de tipo
de ácido nucleico (ADN de doble cadena, ARN
de doble cadena, ADN monocatenario o ARN
monocatenario).
¿Cuál es la sensibilidad de los virus desnudos y
envueltos con respeto a los agentes físicos-
químicos?
Son estables ante factores ambientales
como desecación, temperatura, Son
resistentes a los detergentes,ácidos ,
sales biliares , proteasas.
Pueden propagarse fácilmente a través
de fómites, secar y conservar su
infectividad. También sobreviven en el
estómago, en el intestino y en aguas
residuales.
Virus desnudos Virus envueltos
Son lábiles ante detergentes,
ácidos, desecación,
temperatura. Deben
permanecer en un ambiente
húmedo. Se propagan
mediante gotitas respiratorias,
secreciones y transfusiones de
sangre. No pueden sobrevivir
en el tubo digestivo.
06
¿QUÉ ES LA SIMETRÍA VIRAL?
Disposición de la nucleocápside en el
espacio; es decir, la simetría es la forma que
adopta un virus en el espacio y está dada por
la estructura de su nucleocápside
7
Manera en que las unidades morfológicas
proteicas se ordenan en la cubierta vírica.
Pueden ser de diferentes tipos.
HELICOIDAL
¿QUÉ TIPOS DE SIMETRÍA CONOCE? (EJEMPLOS)
8
ICOSAÉDRICA COMPLEJA
ENVUELTA DESNUDA ENVUELTA
Virus del
papiloma
humano
(VPH)
Virus del
Herpes
POXVIRUS (Virus de la viruela)
Virus de
la gripe
Virus del
mosaico
de
tabaco
DESNUDA
BINARIA
Un mismo virus pueden
presentarse las dos
simetrías anteriores
(BACTERIOFÁGOS)
Material genético envuelto por los
capsómeros que forman un poliedro
de 20 caras
Los capsómeros están dispuestos en
una hélice (caracol). Puede ser rígida
extendida como un tubo cilíndrico.
No contienen cápsides claramente
identificables, no son ni icosaédricos
ni helicoidales
¿Cuáles son las etapas de la replicación viral?
E
T
A
P
A
S
La replicación viral es un proceso mediante el cual un virus penetra en una célula, a partir de ese
momento, la célula penetrada pone todos sus mecanismos a disposición de ese virus.
09
ADSORCION PENETRACIÓN
Es la unión específica a
través de las proteínas
de fijación a un receptor
situado en la superficie
de la célula que va a ser
infectada.
Es el pasaje de la partícula viral hacia el interior de la célula.
Directa: pasa directamente a través de la
membrana introduciendo solamente el genoma.
Endocitosis: el virus estimula la invaginación
citoplasmática, se produce un endosoma y
engloba al virus, este ingresa, en el interior se
fusiona con un lisosoma y se libera el virus.
Fusión: mecanismo en el cual la envoltura viral se
fusiona con la membrana citoplasmática,
liberando solamente la cápside al interior de la
célula.
V.
desnudos
V.
envueltos
V.
envueltos
V.
desnudos
¿Cuáles son las etapas de la replicación viral?
E
T
A
P
A
S
09
SINTESIS DE PROTEINA Y REPLICACIÓN
DESCAPSIDACIÓN
En el interior de la célula, la
cápside se elimina mediante
enzimas proteicas celulares
por degradación.
Virus DNA: el genoma
ingresa en el núcleo celular
Virus RNA : el ácido nucleico
viral permanece en el
citoplasma.
Consiste en copiar el genoma viral para producir más proteínas virales,
los materiales como ribosomas y nucleótidos para hacer ADN o ARN
nuevo vienen de la célula anfitriona.
Virus DNA
1.Núcleo; transcripción porción del DNA (genes
tempranos). Insumo; RNA polimerasa celular para
sintetizar el mRNA.
2.Replicación del genoma viral
3.Transcripción y traducción de genes tardíos
(síntesis de proteínas tardías ocurre en el
citoplasma, migran al interior del núcleo celular y
son estructurales formando parte de la cápside de
los nuevos virus.
Virus RNA
1.Citoplasma; los V. RNA de cadena positiva
actúan como mRNA.
2. Se unen a los ribosomas y dirigen la síntesis de
proteínas.
3.Citoplasma; los V. RNA de cadena negativa
constituyen las plantillas para la producción de
mRNA.
4.El genoma de RNA (-) sintetiza mRNA. Tienen
una RNA polimerasa propia asociada al genoma
viral.
¿Cuáles son las etapas de la replicación viral?
E
T
A
P
A
S
09
MADURACION LIBERACIÓN
Virus DNA Virus RNA
La adquisición de la envoltura se produce
después de la asociación de la nucleocápside
a regiones que contienen proteínas virales en
las membranas de la célula hospedadora.
Núcleo; mediante el proceso de
gemación adquieren la envoltura en
la membrana nuclear, son
transportados mediante vesículas
del aparato de Golgi, atraviesan el
sistema de endomembranas y se
fusionan con la MP
lo hacen a partir de la membrana
citoplasmática, esta membrana
rodea a la nucleocápside y se
produce una brotación.
Virus desnudos: liberados por ruptura de la
membrana plasmática
Virus envueltos: salen por un proceso de
brotación, en algún punto de la membrana
citoplasmática de la cual adquieren su estructura y
a la que previamente han modificado.
¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la
replicación de los virus con genoma DNA?
La replicación del virus con genoma DNA es producida en el núcleo de la célula hospedadora.
Las células hospedadoras contienen las enzimas y proteínas accesorias que se requieren para
la replicación del DNA, el grado al que los virus utilizan la maquinaria de replicación celular
depende de su potencial de codificación proteica y, por ende, del tamaño de su genoma.
10
V.
pequeños
V.
grandes
Dependen de manera exclusiva de la maquinaria de
replicación del DNA del hospedador.
Son relativamente independientes de las funciones
celulares, estos degradan el cromosoma de la célula
hospedadora (bacteriana) a inicios de la infección y
reemplazan toda la maquinaria de replicación de la célula
hospedadora con proteínas especificadas por el virus.
A
D
N
A
D
N
Ciclo de genoma DNA
¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la
replicación de los virus con genoma RNA?
11
El virus con genoma RNA realiza su ciclo de replicación en el citoplasma de la célula
Los virus RNA deben codificar sus propias polimerasas o transcriptasas
Existen dos mecanismos que separan el proceso de la
transcripción del de la replicación:
➔ Primero, la transcripción se restringe a partículas
subvirales e implica una transcriptasa que se
transporta al interior de la célula dentro del virión.
➔ Segundo, en otros casos, el proceso de replicación
implica ya sea una RNA polimerasa funcionalmente
diferente o depende de la presencia de alguna otra
proteína accesoria específica del virus que dirige la
síntesis de las copias completas de la plantilla más
que de los mRN monocistrónicos más cortos.
¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la
replicación de los virus con genoma RNA?
11
La transcripción y la replicación deben ser separadas para la mayoría de los virus RNA
Las RNA polimerasas virales, al igual que las DNA
polimerasas, sintetizan las cadenas sólo en una
dirección; sin embargo, las RNA polimerasas
pueden iniciar la síntesis de cadenas nuevas sin
necesidad de cebadores.
Los picornavirus contienen una proteína que está
unida en forma covalente al extremo 5′ del
genoma, que se denomina VPg. Esta proteína se
encuentra presente en el RNA viral porque está
involucrada en el cebado de los nuevos genomas
RNA durante la infección, de manera similar al
proceso que se describió antes para los
adenovirus
¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la
replicación de los virus con genoma RNA?
11
Los virus con genoma RNA de cadena
positiva actúan como mRNA, se unen a los
ribosomas y dirigen la síntesis de proteínas.
El RNA (+) es suficiente para
iniciar la infección.
Hay un grupo especial de virus, los retrovirus, que a pesar de ser RNA (+) poseen una enzima
llamada transcriptasa inversa o reversa que sintetiza DNA, el que luego servirá de molde al
mRNA y posteriormente se formará el RNA viral
Los de cadena negativa constituyen las plantillas
para la producción de mRNA. El genoma de RNA (-
) no es infeccioso por sí mismo, deben primero
sintetizar mRNA. Tienen una RNA polimerasa
propia asociada al genoma viral.
Cadena Positiva Cadena Negativa
¿Qué funciones tienen las proteínas tempranas y las
proteínas tardías?
Proteinas Tempranas
12
● En el citoplasma se origina la traducción de
las proteínas tempranas que no son
estructurales, es decir que no forman parte
de los nuevos virus.
Son enzimas requeridas
para la replicación del
DNA viral y otras
proteínas que pueden
inducir diferentes
fenómenos en la célula
hospedadora.
● Se produce una segunda etapa de
replicación, mediada por las proteínas
virales, dando a lugar al ARNm tardío.
Proteinas Tardias
El ARNm tardío dirige la
síntesis de las
proteínas tardías,
producido en el
citoplasma, estas
migran al interior de la
célula donde formarán
parte de la cápside de
los nuevos virus.
¿CÓMO ES LA REPLICACIÓN DE LOS RETROVIRUS?
13
LOS
RETROVIRUS
Tipo de virus que contiene ARN en lugar de
ADN como material genético. Usa una enzima
llamada transcriptasa inversa para convertirse
en parte del ADN
Luego podrá realizar el ciclo lisogénico
para replicarse.
¿QUÉ ES UN PROVIRUS?
14
Un provirus es una cadena doble de ADN originada por la
transcripción inversa de una molécula de ARN viral procedente
de un retrovirus. Los provirus deben integrarse en los
cromosomas de la célula huésped para que se exprecen sus
genes y se sinteticen nuevas moléculas de ARN virales.
Una de las características de los provirus es que la molécula
de ADN creada a partir del ARN viral es más larga que el
propio ARN original. Esto se debe a que durante la
transcripción inversa se duplican algunas partes del ARN viral
para crear la primera molécula de ADN.
Todo el proceso de formación de un provirus se realiza en el
citoplasma de la célula.
CARACTERISTICAS
¿Cuáles son los métodos de estudio de los virus?
Como los virus son parásitos intracelulares obligados necesitan células
vivas para replicarse
15
MÉTODOS DIRECTOS MÉTODOS
INDIRECTOS
1) Aislamiento viral (el virus como agente
infeccioso)
2) Técnicas inmunológicas: -
Inmunofluorescencia (IF)
-Enzimoinmunoanálisis (EIA)
-Test de Aglutinación.
3) Técnicas de amplificación de ácidos
nucleicos:
-PCR
4) Microscopia viral
Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
Enzimoinmunoanalisis (EIA)
-Test de aglutinación
- Western Blot (WB)
Producción de anticuerpos In Vitro
CULTIVOS CELULARES
➔ Consisten en células
desarrolladas en medios
especiales en el laboratorio y se
pueden propagar y manejar de
manera similar a los cultivos
bacterianos.
➔ Los medios para el crecimiento
celular tienen aminoácidos,
vitaminas, sal, glucosa, suero de
ternera o suero fetal bovino
➔ Los cultivos se incuban a 37 °C
con una atmósfera de 5% de
dióxido de carbono. Estos
medios permitirán la
multiplicación celular con una
división cada 24 o 48 h.
CULTIVO PRIMARIO
LÍNEAS CELULARES
CONTINUAS
Son inmortales
Se inicia al tratar un
corte de tejido
animal con enzimas
HUEVOS EMBRIONADOS
➔ Se perfora la cáscara del
huevo, se inyecta en él
una
suspensión viral o un
tejido que presuntamente
contiene un virus y se
incuba a 37 °C.
➔ Muerte del embrión
(Desarrollo viral)
➔ Cultivar los virus para
algunas vacunas
ANIMALES DE LABORATORIO
➔ Más usados en virología son
ratones, ratas, cobayos,
hámsters y conejos
➔ Se los inocula por distintas vías,
se los observa para detectar
signos de enfermedad y se los
sacrifica para examinar los
tejidos infectados
➔ Se usan en la investigación de
patogenia, oncogenicidad e
inmunidad viral, ensayos de
vacunas y en la preparación de
antisueros para diagnóstico
INMUNOFLUORESCENCIA
INDIRECTA (IFI)
➔ La IFI, es un método rápido y
confiable para la determinación
de anticuerpos antivirales en el
suero del paciente.
➔ Se basa en la unión de
anticuerpos antivirales presentes
en el suero del paciente a los
antígenos virales expresados en
la superficie y citoplasma de
células infectadas, que han sido
fijadas a un portaobjeto de vidrio.
Como control de especificidad
se usan células no infectadas.
ENZIMOINMUNOANALISIS
INDIRECTO (EIA)
TEST DE AGLUTINACIÓN:
El fundamento y el procedimiento de
esta técnica ya fue descripto para el
estudio de Ag viral (método directo).
Ahora lo que buscamos es detectar
anticuerpos antivirales, por eso se usan
partículas de látex recubiertas con Ag
viral.
WESTERN BLOT (WB):
La técnica de WB se basa en la separación
electroforética de proteínas virales que son
posteriormente inmovilizadas en papel de
nitrocelulosa con el objeto de determinar la
presencia de anticuerpos específicos contra cada
una de esas proteínas.
¿Qué es el efecto citopático viral?
16
Es la alteración producida por los virus en las
células infectadas, se conoce como efecto citopático o acción citopatogénica y
se visualiza por microscopia óptica.
Los cambios que se pueden ver bajo el microscopio
incluyen:
Inclusiones Estos son pequeños puntos u orificios dentro de la
célula o núcleo de la célula. Las inclusiones pueden
verse claras o pueden tener un color rosa.
Membrana
nuclear irregular
Normalmente la membrana es lisa pero, en una célula
infectada por un virus, puede arrugarse.
Cambios de
cromatina
Después de que una célula se infecta con un virus, la
cromatina puede comenzar a verse más oscura de lo
normal o puede moverse a la membrana nuclear.
Células
multinucleadas
Esta gran célula tendrá más de un núcleo. Los
patólogos llaman a esto una célula multinucleada.
¿Puede dar por lo menos 3 ejemplos del efecto
citopático viral?
17
Los efectos citopáticos pueden ser causados por diferentes tipos de virus, entre las más comunes se
pueden encontrar las siguientes mencionadas:
VIRUS DEL HERPES SIMPLE
(HSV)
Ambos tipos de
herpes son
contagiosos y se
propaga al estar en
contacto directo
con las llagas o
incluso cuando no
se presentan llagas
visibles.
Características de las células infectadas por el
virus:
● Aparecen hinchadas y redondeadas
durante las primeras etapas,
presentando cambios y pérdida de
conexión con células vecinas.
● En el avance de la infección, las células
comienzan a replicarse con formación de
cuerpos de inclusión dentro del núcleo.
● HSV-1 Este
generalmente
causa la herpes en
la zona oral o
labial.
● HSV-2 Por otro
lado, comúnmente
causa herpes en la
zona genital.
Este virus proviene de la familia
Herpesviridae, en el cual existe dos
tipos:
VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO (VPH)
Existe más de 100 tipos de virus del
papiloma humano, entre las cuales:
40 afectan en la
región ano-genital.
Se clasifica de acuerdo a su potencial
oncogénico como:
Los de bajo riesgo
(VPH 6, 11, 42, 43, 44) .
Los de alto riesgo
(VPH 16, 18, 31, 33, 45, 56).
Cancer
Verrugas genitales
Es un virus de 55 nm. de diámetro, no
tiene envoltura, cuenta con una
estructura icosaédrica, constituido por
72 capsómeros. Con genoma viral en el
interior compuesto por una doble
cadena circular de ADN con 7900 pares
de bases nucleotídicas.
Via de transmision de la VPH:
En la zona ano-genital es a través de la vía sexual:
Ingresa al organismo a
través de micro-traumas
de la mucosa, teniendo
acceso a las células
basales.
Estando en el
interior se
encuentra en forma
latente, sin causar
manifestación
morfológica o
infección que
produzca viriones.
La replicación viral se reproduce
en la capa superficial del epitelio
y se da el efecto citopático
conocido como coilocitosis.
Célula epitelial de tipo
superficial o intermedio,
con leve agrandamiento
nuclear e hipercromasia a
consecuencia de la
síntesis del ADN de la
célula huésped.
El citoplasma presenta una
cavidad que rodea al núcleo a
consecuencia del
desmantelamiento de la red
de citoqueratina por acción de
la proteína E4.
Para el diagnóstico
de la infección VPH,
se realiza el
extendido hallazgo
cérvico-vaginales
mediante la técnica
de coloración de
Papanicolaou.
VIRUS DEL CITOMEGALOVIRUS (CMV)
Es un Virus ADN de doble
cadena perteneciente a la
subgrupo de la familia
herpesviridae. Esta
enfermedad puede ocurrir
a cualquier edad.
Una vez que
infecta la célula, el
genoma viral
migra hacia el
núcleo celular.
En el curso
subsiguiente de la
infección, esta
depende de la
activación/diferen
ciación de la
célula, donde
existen células
como los
fibroblastos que
permiten
completamente la
replicación viral.
Se da la transcripción
temprana de genes que
codifican la unión ADN viral
a proteínas, las cuales
regulan la expresión de otro
gen viral, seguida de:
➔ Genes que inician
temprano la
replicación genómica.
➔ Genes tardíos que
codifican proteínas
estructurales virales
ensamblados para
formar nuevas
partículas.
Transmisión a través:
● De la saliva.
● Leche materna.
● Contacto sexual.
● Transplante de organos.
Latencia a la
reactivación:
El ADN celular humano
al unirse a proteínas
previamente
acopladas al
promotor-inmediato
del CMV desaparece,
permitiendo que el
virus se reactive
desde el estado de
latencia.
Se lleva a cabo la
producción de partículas
virales infecciosas que son
liberadas en la faringe,
mamas y tracto genital.
En portadores sanos la
reactivación asintomática
ocurre toda la vida, en
especial durante
enfermedades
intercurrentes.
El virus es controlado
normalmente por el sistema
inmune, pero en los
pacientes
inmunocomprometidos, el
virus puede causar una seria
enfermedad.
Citomegalovirus en el
sistema inmunológico:
En la médula ósea el CMV
infecta a las células
progenitoras mieloides, en la
cual el ADN celular unido a
proteínas en el núcleo se une al
promotor-temprano-
inmediato, impidiendo la
transcripción. El virus se puede
mostrar latente en este tipo de
células por lo que el genoma
persiste en el núcleo con genes
ilimitados, por tanto se le hace
difícil al sistema inmune
detectarlo y erradicarlo.
¿QUÉ ES UN BACTERIOFAGO?
18
Los bacteriófagos, también llamados fagos, son virus que infectan a
las bacterias capaces de matar a las responsables de diversas
enfermedades. Es por esto por lo que representan una alternativa
posible para hacer frente al problema de la resistencia a los
antibióticos
CARACTERISTICAS
La estructura cabeza-cola parece ser exclusiva de los
fagos y sus parientes cercanos (y no se encuentra en los
virus de eucariotas)
Los genomas de fagos pueden constar de ADN o ARN .
La cápside de un bacteriófago puede ser icosaédrica,
filamentosa o en forma cabeza-cola.
¿Qué es el ciclo lítico y el ciclo lisogénico?
19
Ciclo Lítico
El fago infecta a una bacteria, la secuestra para hacer varios fagos y luego mata a la célula al hacerla explotar
(lisar).
1.Fijación: las proteínas en la cola del fago se unen a un receptor
específico en la superficie de la célula bacteriana.
2.Penetración: el fago inyecta su genoma dentro del citoplasma de la
bacteria.
3.Copia del genoma y síntesis de proteínas: se copia el genoma del fago
y los genes del fago se expresan para hacer proteínas, como las
proteínas de la cápside.
4.Ensamblaje del nuevo fago: las cápsides se ensamblan a partir de las
proteínas de la cápside y se rellenan con ADN para hacer nuevas
partículas de fago.
5.Lisis: en las últimas etapas del ciclo lítico, el fago expresa los genes
para las proteínas que hacen agujeros en la membrana plasmática y la
pared celular. Los agujeros dejan que entre agua, y hacen que la célula
se expanda y estalle como un globo con demasiada agua.
¿Qué es el ciclo lítico y el ciclo lisogénico?
19
Ciclo Lisogénico
El fago infecta una bacteria e inserta su ADN en el cromosoma bacteriano, lo que permite que el ADN del fago
(ahora llamado profago) sea copiado y transmitido junto con el propio ADN de la célula.
1.Fijación e inyección del genoma
2.Penetración
3.Recombinación con una región particular del cromosoma bacteriano.
Esto hace que el genoma del fago se integre al cromosoma. El fago con el
genoma integrado, es llamado profago, no es activo: sus genes no se
expresan y promueve la producción de fagos nuevos
4.División celular: en esta acción el profago se copia junto con el ADN
anfitrión, sin hacer esfuerzo alguno.
Dato: En condiciones apropiadas, el profago puede volverse activo y
salirse del cromosoma bacteriano, lo que acciona los pasos restantes
del ciclo lítico (copiado del ADN y síntesis de proteínas, ensamblado
del fago y lisis).
¿Qué importancia tiene la lisogenia en su
relación con la virulencia bacteriana?
Ciclo lisogénico
El DNA del fago se integra al
genoma bacteriano. Este se
denomina profago y
permanece inactivo. Las células
bacterianas hospedadoras se
conocen como bacterias
lisogénicas. Cada vez que esta
bacteria se reproduce por
fisión binaria, las células hijas
en su genoma bacteriano
también contienen la
información genética del
profago.
20
¿Qué son los priones?
21
Es un agente proteico infeccioso con
plegamiento anómalo siendo responsable de
varias enfermedades neurodegenerativas, no
necesita de ácidos nucleicos y tampoco es
considerado como un virus. Está constituido por
partículas proteicas carentes de ADN y puede
replicarse sin genes agregando de la proteína
amiloide prión en forma de placa.
Se le identifica con la abreviatura
PrPsc, no causa reacciones
inflamatorias ni inmunitarias
detectables, es muy resistente a
temperaturas altas producidas por
las radiaciones ionizantes.
¿Con qué patologías están relacionados los priones?
22
Ganado: encefalitis espongiforme
bovina o “mal de la vaca loca”;
scrapie, “tembladera” o “prurito
lumbar” de los ovinos, etc.
Los priones causan infecciones lentas al sistema nervioso central en el hombre y en el ganado
Hombre: Las enfermedades humanas son el kuru, la
enfermedad de Creutzfeldt-Jakob o demencia presenil, el
síndrome de Gerstmann-Sträussler-Scheinker y el insomnio
familiar fatal.
El kuru o ataxia degenerativa, que produce agitación o
temblores, se observó en algunas tribus de Nueva Guinea con
hábitos canibalísticos. Los priones son muy resistentes a la
acción de los desinfectantes y a algunos métodos de
esterilización
Prurito lumbar
en los ovinos
“mal de la
vaca loca”
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Sherris. CAPÍTULO 6: Virus. Conceptos básicos [Internet]. Access Medicina; 2022 [citado el 9 de mayo de 2023].
Disponible en:
http://file:///C:/Users/USUARIO/Downloads/CAP%C3%8DTULO%206_%20Virus.%20Conceptos%20b%C3%A1sicos.pdf
Negroni M, Gonzales MI. Capitulo 8 VIRUS: GENERALIDADES [Internet]. Berri.es. 2017 [citado el 9 de mayo de 2023].
Disponible en:
https://www.berri.es/pdf/MICROBIOLOGIA%20ESTOMATOLOGICA%E2%80%9A%20Fundamentos%20y%20gu%C3%A
Da%20pr%C3%A1ctica/9789500695572
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de 2020 [citado el 10 de mayo de 2023]; Disponible en: http://theconversation.com/quince-virus-que-han-cambiado-la-
historia-de-la-humanidad-149031
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Spinelli OM, Eugenia D, Altamirano M. IMAGENES EN MEDICINA [Internet]. Edu.ar. 2003 [citado el 10 de mayo de
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PDFA.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Rodríguez Martínez O, Benítez Cartaya M, Ambou Frutos I, Vilches Lescaille D de la C, Hernández Cruz C, Castro
Machado A. Citomegalovirus: de la primoinfección a la retinitis. Rev Cuba Oftalmol [Internet]. 2014 [citado el 10 de mayo
de 2023];27(3):439-454. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0864-
21762014000300011&script=sci_arttext&tlng=pt
Sitio de Ciencia-Ficcion. Glosario de Ciencia-Ficción - P - Provirus [Internet]. Ciencia-ficcion.com. 2023 [citado el 10 de
mayo de 2023]. Disponible en:https://www.ciencia-ficcion.com/glosario/p/provirus.htm
Qué son los bacteriófagos [Internet]. www.ocu.org. 2017 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en:
https://www.ocu.org/alimentacion/seguridad-alimentaria/informe/bacteriofagos
Efectos citopáticos virales [Internet]. MyPathologyReport.ca. 2020 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en:
https://www.mypathologyreport.ca/es/pathology-dictionary/viral-cytopathic-effects/
Tapia LI. LABORATORIO DE VIROLOGÍA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA. Rev médica Clín Las Condes [Internet]. 2015
[citado el 10 de mayo de 2023] 26(6):744-752. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.rmclc.2015.11.003

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Taller Virus

  • 2. CONTENIDO 1. ¿Qué es un virus? 2. ¿Qué características generales tienen los virus? 3. ¿Cuál es la composición química y las funciones del genoma viral? 4. ¿Cuál es la composición química y las funciones de la cápside? 5. ¿Cuál es la composición química y las funciones de la envoltura? 6. ¿Cuál es la sensibilidad de los virus desnudos y envueltos con respecto a los agentes físico-químicos? 7. ¿Qué es la simetría viral? 8. ¿Qué tipos de simetría viral conoce? De ejemplos de cada una de las simetrías. 9. ¿Cuáles son las etapas de la replicación viral? 10.¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la replicación de los virus con genoma DNA? 11. ¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la replicación de los virus con genoma RNA? 12.¿Qué funciones tienen las proteínas tempranas y las proteínas tardías? 13.¿Cómo es la replicación de los retrovirus? 14.¿Qué es un provirus? 15. ¿Cuáles son los métodos de estudio de los virus? 16.¿Qué es el efecto citopático viral? 17.¿Puede dar por lo menos 3 ejemplos de efecto citopático viral? 18. ¿Qué es un bacteriófago? 19.¿Qué es el ciclo lítico y el ciclo lisogénico? 20. ¿Qué importancia tiene la lisogenia en su relación con la virulencia bacteriana? 21. ¿Qué son los priones? 22. ¿Con qué patologías están relacionados los priones?
  • 3. ¿Que es un virus? 01 Son partículas pequeñas que llegan a medir entre 20 y 300 nm. Están constituidos por un ácido nucleico que pueden ser: ● ADN ● RNA Los virus tienen una envoltura llamada “cápside”que son un conjunto de proteínas que envuelve su material genético del virus , en algunos casos cuentan con una envoltura externa de lipoproteína, los cuales son capaces de infectar las células. Estos no pueden reproducirse por sí mismo por lo que requerirán de los componentes estructurales y metabólicos de una célula viva para su reproducción. ➔ Los virus que infectan a los humanos son virus humanos, el cual se considera junto con la clase general del virus animal. ➔ Las que infectan a las bacterias se llaman bacteriofafos (fagos). ➔ Y las que infectan a las plantas se denominan virus vegetales. Los virus no tienen: ● Nucleo ● Citoplasma ● Mitocondrias ● Otros organelos.
  • 4.
  • 5. ¿Qué características generales tienen los virus? TAMAÑO DEL VIRUS El tamaño del virus puede variar, la cual se encuentra entre los 20 a 300 nm de diámetro. 02 Menor tamaño Mayor tamaño Llegan a medir 20 nm. (La milésima parte de un micrón) Se realiza la visualización a través del microscopio electrónico. Erythrovirus B19 (18 nm.) Poliomeliti (27 nm.) Alcanzan los 300 nm. Los poxvirus (300 nm.) Virus de la viruela Virus del molusco contagioso
  • 6. COMPOSICIÓN QUÍMICA Acido desoxirribonucleico (DNA) El Ácido nucleico es usado para el desarrollo y funcionamiento por parte de algunos virus, donde invaden a una célula huésped para replicarse y propagarse. Acido ribonucleico (RNA) También son usados como material genético en la que su proceso de replicación necesita del ARN. Proteinas Estos se agrupan de acuerdo con su función y en grupos de proteínas virales incluyendo las estructurales, no estructurales, reguladoras y accesorias. COMPUESTO PRINCIPALMENTE POR: Algunos contienen lipidos y glucidos: ➔ La envoltura vírica es una membrana lipídica que es muy común en los virus animal. ➔ Los glúcidos son uno de los lugares de reconocimiento del patógeno para unirse e infectar la célula y forma parte de las glicoproteínas presentes en la envoltura.
  • 7. ESTRUCTURA SE CLASIFICAN: A) Virus de Nucleocapside Desnuda Estos virus no poseen envoltura. B) Virus de Nucleocapside Envuelta Estos poseen su estructura externa de la envoltura. ESTOS POSEEN: Envoltura Capside Genoma viral o Nucleoide Influenza Virus (HPV)
  • 8. SENSIBILIDAD DE LOS VIRUS A FACTORES DEL MEDIO AMBIENTE Y A OTROS AGENTES OTRAS CARACTERÍSTICAS: Virus sin envoltura: La disposición de proteínas con que cuentan les confiere una mayor resistencia a condiciones y factores medioambientales. Virus con envoltura: Estos en cambio se muestran más sensibles, ya que su envoltura lipídica se ve comprometida por la mayoría de los desinfectantes y detergentes. Simetria: De acuerdo a esto se pueden observar los distintos tipos de simetría que tiene el virus, como: ● Simetría helicoidal desnuda ● Helicoidal envuelta ● Icosaédrica desnuda ● Icosaédrica envuelta ● Compleja Replicacion Viral: Tiene la característica de poder replicarse a través de otra célula viva, dependiendo de ellas para sufabricacion de copias.
  • 9. ¿Cuál es la composición química y las funciones del genoma viral? 03 El genoma viral contiene instrucciones para la fabricación de nuevos virus, y dependiendo de su composición química que está basado principalmente en 2 tipos de moléculas, ácidos nucleicos del ADN o ARN y unas series de proteínas como cubierta protectora del material genético Nucleótidos ADN-ácido desoxirribonucleico Nucleótidos ARN-ácido ribonucleico Citosina Guanina Adenina Uracilo Citosina Guanina Adenina Timina
  • 10. ¿Cuál es la composición química y las funciones de la cápside? 04 Es una capa protectora externa de un virus, que protege el ácido nucleico viral, los conjuntos de su unidad (capsómeros) forman una estructura helicoidal siendo una cubierta exterior de proteína o poliproteína de la cápside vírica que contiene el material genético de un virus. ➔ Protección del ácido nucleico de la desecación y de las enzimas tisulares. ➔ Presenta estructuras que permiten la unión del virus a los receptores de membrana de la célula que infectan. ➔ Actúan como complejo antígeno, estimulando la respuesta inmune del huésped. FUNCIONES
  • 11. ¿Cuál es la composición química y las funciones de la envoltura? Los virus varían en tamaños ,formas y ciclos de vida. Sin embargo los virus tienen alguna característica en común. Incluyen: ➔ Una cubierta protectora de proteína o cápside ➔ Un genoma de ácido nucleico, ADN o ARN, dentro de la cápside ➔ Una capa de membrana llamada envoltura (algunos pero no todos los virus). 5
  • 12. Capsides de virus Se compone de muchas moléculas de proteínas . Las proteínas se unen para formar unidades llamadas capsómeros. Las proteínas de la cápside siempre están codificadas por el genoma del virus, lo que significa que es el virus (no la célula hospedera) el que proporciona las instrucciones para hacerlas. Las cápsides pueden tener diversas formas, pero las más comunes son las siguientes : 1.-Icosaedrica 2.-Filamentosa 3.-Compleja
  • 13. Envolturas viricas Los virus también tienen una membrana lipídica externa conocida como envoltura , que rodea toda la cápside.Los virus con envoltura no proporcionan instrucciones para los lípidos de la misma. No son una característica universal de los virus. Los virus tienen material genético (un genoma) hecho de ácido nucleico, por otra parte, pueden utilizar el ARN o el ADN, que son tipos de ácido nucleico. Los virus pueden tener todas las combinaciones posibles de cadenas y de tipo de ácido nucleico (ADN de doble cadena, ARN de doble cadena, ADN monocatenario o ARN monocatenario).
  • 14. ¿Cuál es la sensibilidad de los virus desnudos y envueltos con respeto a los agentes físicos- químicos? Son estables ante factores ambientales como desecación, temperatura, Son resistentes a los detergentes,ácidos , sales biliares , proteasas. Pueden propagarse fácilmente a través de fómites, secar y conservar su infectividad. También sobreviven en el estómago, en el intestino y en aguas residuales. Virus desnudos Virus envueltos Son lábiles ante detergentes, ácidos, desecación, temperatura. Deben permanecer en un ambiente húmedo. Se propagan mediante gotitas respiratorias, secreciones y transfusiones de sangre. No pueden sobrevivir en el tubo digestivo. 06
  • 15. ¿QUÉ ES LA SIMETRÍA VIRAL? Disposición de la nucleocápside en el espacio; es decir, la simetría es la forma que adopta un virus en el espacio y está dada por la estructura de su nucleocápside 7 Manera en que las unidades morfológicas proteicas se ordenan en la cubierta vírica. Pueden ser de diferentes tipos.
  • 16. HELICOIDAL ¿QUÉ TIPOS DE SIMETRÍA CONOCE? (EJEMPLOS) 8 ICOSAÉDRICA COMPLEJA ENVUELTA DESNUDA ENVUELTA Virus del papiloma humano (VPH) Virus del Herpes POXVIRUS (Virus de la viruela) Virus de la gripe Virus del mosaico de tabaco DESNUDA BINARIA Un mismo virus pueden presentarse las dos simetrías anteriores (BACTERIOFÁGOS) Material genético envuelto por los capsómeros que forman un poliedro de 20 caras Los capsómeros están dispuestos en una hélice (caracol). Puede ser rígida extendida como un tubo cilíndrico. No contienen cápsides claramente identificables, no son ni icosaédricos ni helicoidales
  • 17. ¿Cuáles son las etapas de la replicación viral? E T A P A S La replicación viral es un proceso mediante el cual un virus penetra en una célula, a partir de ese momento, la célula penetrada pone todos sus mecanismos a disposición de ese virus. 09 ADSORCION PENETRACIÓN Es la unión específica a través de las proteínas de fijación a un receptor situado en la superficie de la célula que va a ser infectada. Es el pasaje de la partícula viral hacia el interior de la célula. Directa: pasa directamente a través de la membrana introduciendo solamente el genoma. Endocitosis: el virus estimula la invaginación citoplasmática, se produce un endosoma y engloba al virus, este ingresa, en el interior se fusiona con un lisosoma y se libera el virus. Fusión: mecanismo en el cual la envoltura viral se fusiona con la membrana citoplasmática, liberando solamente la cápside al interior de la célula. V. desnudos V. envueltos V. envueltos V. desnudos
  • 18. ¿Cuáles son las etapas de la replicación viral? E T A P A S 09 SINTESIS DE PROTEINA Y REPLICACIÓN DESCAPSIDACIÓN En el interior de la célula, la cápside se elimina mediante enzimas proteicas celulares por degradación. Virus DNA: el genoma ingresa en el núcleo celular Virus RNA : el ácido nucleico viral permanece en el citoplasma. Consiste en copiar el genoma viral para producir más proteínas virales, los materiales como ribosomas y nucleótidos para hacer ADN o ARN nuevo vienen de la célula anfitriona. Virus DNA 1.Núcleo; transcripción porción del DNA (genes tempranos). Insumo; RNA polimerasa celular para sintetizar el mRNA. 2.Replicación del genoma viral 3.Transcripción y traducción de genes tardíos (síntesis de proteínas tardías ocurre en el citoplasma, migran al interior del núcleo celular y son estructurales formando parte de la cápside de los nuevos virus. Virus RNA 1.Citoplasma; los V. RNA de cadena positiva actúan como mRNA. 2. Se unen a los ribosomas y dirigen la síntesis de proteínas. 3.Citoplasma; los V. RNA de cadena negativa constituyen las plantillas para la producción de mRNA. 4.El genoma de RNA (-) sintetiza mRNA. Tienen una RNA polimerasa propia asociada al genoma viral.
  • 19. ¿Cuáles son las etapas de la replicación viral? E T A P A S 09 MADURACION LIBERACIÓN Virus DNA Virus RNA La adquisición de la envoltura se produce después de la asociación de la nucleocápside a regiones que contienen proteínas virales en las membranas de la célula hospedadora. Núcleo; mediante el proceso de gemación adquieren la envoltura en la membrana nuclear, son transportados mediante vesículas del aparato de Golgi, atraviesan el sistema de endomembranas y se fusionan con la MP lo hacen a partir de la membrana citoplasmática, esta membrana rodea a la nucleocápside y se produce una brotación. Virus desnudos: liberados por ruptura de la membrana plasmática Virus envueltos: salen por un proceso de brotación, en algún punto de la membrana citoplasmática de la cual adquieren su estructura y a la que previamente han modificado.
  • 20. ¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la replicación de los virus con genoma DNA? La replicación del virus con genoma DNA es producida en el núcleo de la célula hospedadora. Las células hospedadoras contienen las enzimas y proteínas accesorias que se requieren para la replicación del DNA, el grado al que los virus utilizan la maquinaria de replicación celular depende de su potencial de codificación proteica y, por ende, del tamaño de su genoma. 10 V. pequeños V. grandes Dependen de manera exclusiva de la maquinaria de replicación del DNA del hospedador. Son relativamente independientes de las funciones celulares, estos degradan el cromosoma de la célula hospedadora (bacteriana) a inicios de la infección y reemplazan toda la maquinaria de replicación de la célula hospedadora con proteínas especificadas por el virus. A D N A D N Ciclo de genoma DNA
  • 21. ¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la replicación de los virus con genoma RNA? 11 El virus con genoma RNA realiza su ciclo de replicación en el citoplasma de la célula Los virus RNA deben codificar sus propias polimerasas o transcriptasas Existen dos mecanismos que separan el proceso de la transcripción del de la replicación: ➔ Primero, la transcripción se restringe a partículas subvirales e implica una transcriptasa que se transporta al interior de la célula dentro del virión. ➔ Segundo, en otros casos, el proceso de replicación implica ya sea una RNA polimerasa funcionalmente diferente o depende de la presencia de alguna otra proteína accesoria específica del virus que dirige la síntesis de las copias completas de la plantilla más que de los mRN monocistrónicos más cortos.
  • 22. ¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la replicación de los virus con genoma RNA? 11 La transcripción y la replicación deben ser separadas para la mayoría de los virus RNA Las RNA polimerasas virales, al igual que las DNA polimerasas, sintetizan las cadenas sólo en una dirección; sin embargo, las RNA polimerasas pueden iniciar la síntesis de cadenas nuevas sin necesidad de cebadores. Los picornavirus contienen una proteína que está unida en forma covalente al extremo 5′ del genoma, que se denomina VPg. Esta proteína se encuentra presente en el RNA viral porque está involucrada en el cebado de los nuevos genomas RNA durante la infección, de manera similar al proceso que se describió antes para los adenovirus
  • 23. ¿En qué sitio de la célula hospedadora se produce la replicación de los virus con genoma RNA? 11 Los virus con genoma RNA de cadena positiva actúan como mRNA, se unen a los ribosomas y dirigen la síntesis de proteínas. El RNA (+) es suficiente para iniciar la infección. Hay un grupo especial de virus, los retrovirus, que a pesar de ser RNA (+) poseen una enzima llamada transcriptasa inversa o reversa que sintetiza DNA, el que luego servirá de molde al mRNA y posteriormente se formará el RNA viral Los de cadena negativa constituyen las plantillas para la producción de mRNA. El genoma de RNA (- ) no es infeccioso por sí mismo, deben primero sintetizar mRNA. Tienen una RNA polimerasa propia asociada al genoma viral. Cadena Positiva Cadena Negativa
  • 24. ¿Qué funciones tienen las proteínas tempranas y las proteínas tardías? Proteinas Tempranas 12 ● En el citoplasma se origina la traducción de las proteínas tempranas que no son estructurales, es decir que no forman parte de los nuevos virus. Son enzimas requeridas para la replicación del DNA viral y otras proteínas que pueden inducir diferentes fenómenos en la célula hospedadora. ● Se produce una segunda etapa de replicación, mediada por las proteínas virales, dando a lugar al ARNm tardío. Proteinas Tardias El ARNm tardío dirige la síntesis de las proteínas tardías, producido en el citoplasma, estas migran al interior de la célula donde formarán parte de la cápside de los nuevos virus.
  • 25. ¿CÓMO ES LA REPLICACIÓN DE LOS RETROVIRUS? 13 LOS RETROVIRUS Tipo de virus que contiene ARN en lugar de ADN como material genético. Usa una enzima llamada transcriptasa inversa para convertirse en parte del ADN Luego podrá realizar el ciclo lisogénico para replicarse.
  • 26. ¿QUÉ ES UN PROVIRUS? 14 Un provirus es una cadena doble de ADN originada por la transcripción inversa de una molécula de ARN viral procedente de un retrovirus. Los provirus deben integrarse en los cromosomas de la célula huésped para que se exprecen sus genes y se sinteticen nuevas moléculas de ARN virales. Una de las características de los provirus es que la molécula de ADN creada a partir del ARN viral es más larga que el propio ARN original. Esto se debe a que durante la transcripción inversa se duplican algunas partes del ARN viral para crear la primera molécula de ADN. Todo el proceso de formación de un provirus se realiza en el citoplasma de la célula. CARACTERISTICAS
  • 27. ¿Cuáles son los métodos de estudio de los virus? Como los virus son parásitos intracelulares obligados necesitan células vivas para replicarse 15 MÉTODOS DIRECTOS MÉTODOS INDIRECTOS 1) Aislamiento viral (el virus como agente infeccioso) 2) Técnicas inmunológicas: - Inmunofluorescencia (IF) -Enzimoinmunoanálisis (EIA) -Test de Aglutinación. 3) Técnicas de amplificación de ácidos nucleicos: -PCR 4) Microscopia viral Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Enzimoinmunoanalisis (EIA) -Test de aglutinación - Western Blot (WB) Producción de anticuerpos In Vitro
  • 28. CULTIVOS CELULARES ➔ Consisten en células desarrolladas en medios especiales en el laboratorio y se pueden propagar y manejar de manera similar a los cultivos bacterianos. ➔ Los medios para el crecimiento celular tienen aminoácidos, vitaminas, sal, glucosa, suero de ternera o suero fetal bovino ➔ Los cultivos se incuban a 37 °C con una atmósfera de 5% de dióxido de carbono. Estos medios permitirán la multiplicación celular con una división cada 24 o 48 h. CULTIVO PRIMARIO LÍNEAS CELULARES CONTINUAS Son inmortales Se inicia al tratar un corte de tejido animal con enzimas
  • 29. HUEVOS EMBRIONADOS ➔ Se perfora la cáscara del huevo, se inyecta en él una suspensión viral o un tejido que presuntamente contiene un virus y se incuba a 37 °C. ➔ Muerte del embrión (Desarrollo viral) ➔ Cultivar los virus para algunas vacunas
  • 30. ANIMALES DE LABORATORIO ➔ Más usados en virología son ratones, ratas, cobayos, hámsters y conejos ➔ Se los inocula por distintas vías, se los observa para detectar signos de enfermedad y se los sacrifica para examinar los tejidos infectados ➔ Se usan en la investigación de patogenia, oncogenicidad e inmunidad viral, ensayos de vacunas y en la preparación de antisueros para diagnóstico
  • 31. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI) ➔ La IFI, es un método rápido y confiable para la determinación de anticuerpos antivirales en el suero del paciente. ➔ Se basa en la unión de anticuerpos antivirales presentes en el suero del paciente a los antígenos virales expresados en la superficie y citoplasma de células infectadas, que han sido fijadas a un portaobjeto de vidrio. Como control de especificidad se usan células no infectadas.
  • 32. ENZIMOINMUNOANALISIS INDIRECTO (EIA) TEST DE AGLUTINACIÓN: El fundamento y el procedimiento de esta técnica ya fue descripto para el estudio de Ag viral (método directo). Ahora lo que buscamos es detectar anticuerpos antivirales, por eso se usan partículas de látex recubiertas con Ag viral. WESTERN BLOT (WB): La técnica de WB se basa en la separación electroforética de proteínas virales que son posteriormente inmovilizadas en papel de nitrocelulosa con el objeto de determinar la presencia de anticuerpos específicos contra cada una de esas proteínas.
  • 33. ¿Qué es el efecto citopático viral? 16 Es la alteración producida por los virus en las células infectadas, se conoce como efecto citopático o acción citopatogénica y se visualiza por microscopia óptica. Los cambios que se pueden ver bajo el microscopio incluyen: Inclusiones Estos son pequeños puntos u orificios dentro de la célula o núcleo de la célula. Las inclusiones pueden verse claras o pueden tener un color rosa. Membrana nuclear irregular Normalmente la membrana es lisa pero, en una célula infectada por un virus, puede arrugarse. Cambios de cromatina Después de que una célula se infecta con un virus, la cromatina puede comenzar a verse más oscura de lo normal o puede moverse a la membrana nuclear. Células multinucleadas Esta gran célula tendrá más de un núcleo. Los patólogos llaman a esto una célula multinucleada.
  • 34. ¿Puede dar por lo menos 3 ejemplos del efecto citopático viral? 17 Los efectos citopáticos pueden ser causados por diferentes tipos de virus, entre las más comunes se pueden encontrar las siguientes mencionadas: VIRUS DEL HERPES SIMPLE (HSV) Ambos tipos de herpes son contagiosos y se propaga al estar en contacto directo con las llagas o incluso cuando no se presentan llagas visibles. Características de las células infectadas por el virus: ● Aparecen hinchadas y redondeadas durante las primeras etapas, presentando cambios y pérdida de conexión con células vecinas. ● En el avance de la infección, las células comienzan a replicarse con formación de cuerpos de inclusión dentro del núcleo. ● HSV-1 Este generalmente causa la herpes en la zona oral o labial. ● HSV-2 Por otro lado, comúnmente causa herpes en la zona genital. Este virus proviene de la familia Herpesviridae, en el cual existe dos tipos:
  • 35. VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO (VPH) Existe más de 100 tipos de virus del papiloma humano, entre las cuales: 40 afectan en la región ano-genital. Se clasifica de acuerdo a su potencial oncogénico como: Los de bajo riesgo (VPH 6, 11, 42, 43, 44) . Los de alto riesgo (VPH 16, 18, 31, 33, 45, 56). Cancer Verrugas genitales Es un virus de 55 nm. de diámetro, no tiene envoltura, cuenta con una estructura icosaédrica, constituido por 72 capsómeros. Con genoma viral en el interior compuesto por una doble cadena circular de ADN con 7900 pares de bases nucleotídicas.
  • 36. Via de transmision de la VPH: En la zona ano-genital es a través de la vía sexual: Ingresa al organismo a través de micro-traumas de la mucosa, teniendo acceso a las células basales. Estando en el interior se encuentra en forma latente, sin causar manifestación morfológica o infección que produzca viriones. La replicación viral se reproduce en la capa superficial del epitelio y se da el efecto citopático conocido como coilocitosis. Célula epitelial de tipo superficial o intermedio, con leve agrandamiento nuclear e hipercromasia a consecuencia de la síntesis del ADN de la célula huésped. El citoplasma presenta una cavidad que rodea al núcleo a consecuencia del desmantelamiento de la red de citoqueratina por acción de la proteína E4. Para el diagnóstico de la infección VPH, se realiza el extendido hallazgo cérvico-vaginales mediante la técnica de coloración de Papanicolaou.
  • 37. VIRUS DEL CITOMEGALOVIRUS (CMV) Es un Virus ADN de doble cadena perteneciente a la subgrupo de la familia herpesviridae. Esta enfermedad puede ocurrir a cualquier edad. Una vez que infecta la célula, el genoma viral migra hacia el núcleo celular. En el curso subsiguiente de la infección, esta depende de la activación/diferen ciación de la célula, donde existen células como los fibroblastos que permiten completamente la replicación viral. Se da la transcripción temprana de genes que codifican la unión ADN viral a proteínas, las cuales regulan la expresión de otro gen viral, seguida de: ➔ Genes que inician temprano la replicación genómica. ➔ Genes tardíos que codifican proteínas estructurales virales ensamblados para formar nuevas partículas. Transmisión a través: ● De la saliva. ● Leche materna. ● Contacto sexual. ● Transplante de organos.
  • 38. Latencia a la reactivación: El ADN celular humano al unirse a proteínas previamente acopladas al promotor-inmediato del CMV desaparece, permitiendo que el virus se reactive desde el estado de latencia. Se lleva a cabo la producción de partículas virales infecciosas que son liberadas en la faringe, mamas y tracto genital. En portadores sanos la reactivación asintomática ocurre toda la vida, en especial durante enfermedades intercurrentes. El virus es controlado normalmente por el sistema inmune, pero en los pacientes inmunocomprometidos, el virus puede causar una seria enfermedad. Citomegalovirus en el sistema inmunológico: En la médula ósea el CMV infecta a las células progenitoras mieloides, en la cual el ADN celular unido a proteínas en el núcleo se une al promotor-temprano- inmediato, impidiendo la transcripción. El virus se puede mostrar latente en este tipo de células por lo que el genoma persiste en el núcleo con genes ilimitados, por tanto se le hace difícil al sistema inmune detectarlo y erradicarlo.
  • 39. ¿QUÉ ES UN BACTERIOFAGO? 18 Los bacteriófagos, también llamados fagos, son virus que infectan a las bacterias capaces de matar a las responsables de diversas enfermedades. Es por esto por lo que representan una alternativa posible para hacer frente al problema de la resistencia a los antibióticos CARACTERISTICAS La estructura cabeza-cola parece ser exclusiva de los fagos y sus parientes cercanos (y no se encuentra en los virus de eucariotas) Los genomas de fagos pueden constar de ADN o ARN . La cápside de un bacteriófago puede ser icosaédrica, filamentosa o en forma cabeza-cola.
  • 40. ¿Qué es el ciclo lítico y el ciclo lisogénico? 19 Ciclo Lítico El fago infecta a una bacteria, la secuestra para hacer varios fagos y luego mata a la célula al hacerla explotar (lisar). 1.Fijación: las proteínas en la cola del fago se unen a un receptor específico en la superficie de la célula bacteriana. 2.Penetración: el fago inyecta su genoma dentro del citoplasma de la bacteria. 3.Copia del genoma y síntesis de proteínas: se copia el genoma del fago y los genes del fago se expresan para hacer proteínas, como las proteínas de la cápside. 4.Ensamblaje del nuevo fago: las cápsides se ensamblan a partir de las proteínas de la cápside y se rellenan con ADN para hacer nuevas partículas de fago. 5.Lisis: en las últimas etapas del ciclo lítico, el fago expresa los genes para las proteínas que hacen agujeros en la membrana plasmática y la pared celular. Los agujeros dejan que entre agua, y hacen que la célula se expanda y estalle como un globo con demasiada agua.
  • 41. ¿Qué es el ciclo lítico y el ciclo lisogénico? 19 Ciclo Lisogénico El fago infecta una bacteria e inserta su ADN en el cromosoma bacteriano, lo que permite que el ADN del fago (ahora llamado profago) sea copiado y transmitido junto con el propio ADN de la célula. 1.Fijación e inyección del genoma 2.Penetración 3.Recombinación con una región particular del cromosoma bacteriano. Esto hace que el genoma del fago se integre al cromosoma. El fago con el genoma integrado, es llamado profago, no es activo: sus genes no se expresan y promueve la producción de fagos nuevos 4.División celular: en esta acción el profago se copia junto con el ADN anfitrión, sin hacer esfuerzo alguno. Dato: En condiciones apropiadas, el profago puede volverse activo y salirse del cromosoma bacteriano, lo que acciona los pasos restantes del ciclo lítico (copiado del ADN y síntesis de proteínas, ensamblado del fago y lisis).
  • 42. ¿Qué importancia tiene la lisogenia en su relación con la virulencia bacteriana? Ciclo lisogénico El DNA del fago se integra al genoma bacteriano. Este se denomina profago y permanece inactivo. Las células bacterianas hospedadoras se conocen como bacterias lisogénicas. Cada vez que esta bacteria se reproduce por fisión binaria, las células hijas en su genoma bacteriano también contienen la información genética del profago. 20
  • 43. ¿Qué son los priones? 21 Es un agente proteico infeccioso con plegamiento anómalo siendo responsable de varias enfermedades neurodegenerativas, no necesita de ácidos nucleicos y tampoco es considerado como un virus. Está constituido por partículas proteicas carentes de ADN y puede replicarse sin genes agregando de la proteína amiloide prión en forma de placa. Se le identifica con la abreviatura PrPsc, no causa reacciones inflamatorias ni inmunitarias detectables, es muy resistente a temperaturas altas producidas por las radiaciones ionizantes.
  • 44. ¿Con qué patologías están relacionados los priones? 22 Ganado: encefalitis espongiforme bovina o “mal de la vaca loca”; scrapie, “tembladera” o “prurito lumbar” de los ovinos, etc. Los priones causan infecciones lentas al sistema nervioso central en el hombre y en el ganado Hombre: Las enfermedades humanas son el kuru, la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob o demencia presenil, el síndrome de Gerstmann-Sträussler-Scheinker y el insomnio familiar fatal. El kuru o ataxia degenerativa, que produce agitación o temblores, se observó en algunas tribus de Nueva Guinea con hábitos canibalísticos. Los priones son muy resistentes a la acción de los desinfectantes y a algunos métodos de esterilización Prurito lumbar en los ovinos “mal de la vaca loca”
  • 45. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Sherris. CAPÍTULO 6: Virus. Conceptos básicos [Internet]. Access Medicina; 2022 [citado el 9 de mayo de 2023]. Disponible en: http://file:///C:/Users/USUARIO/Downloads/CAP%C3%8DTULO%206_%20Virus.%20Conceptos%20b%C3%A1sicos.pdf Negroni M, Gonzales MI. Capitulo 8 VIRUS: GENERALIDADES [Internet]. Berri.es. 2017 [citado el 9 de mayo de 2023]. Disponible en: https://www.berri.es/pdf/MICROBIOLOGIA%20ESTOMATOLOGICA%E2%80%9A%20Fundamentos%20y%20gu%C3%A Da%20pr%C3%A1ctica/9789500695572 Megías M, Molist P, Pombal MÁ. La célula. 3. Membrana celular. Glúcidos. Atlas de Histología Vegetal y Animal [Internet]. Uvigo.es. 2023 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en: https://mmegias.webs.uvigo.es/5-celulas/3- glucidos.php Wikipedia contributors. Envoltura vírica [Internet]. Wikipedia, The Free Encyclopedia. 2023 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en: https://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Envoltura_v%C3%ADrica&oldid=148441027 González RR. Quince virus que han cambiado la historia de la Humanidad. The Conversation [Internet]. 12 de noviembre de 2020 [citado el 10 de mayo de 2023]; Disponible en: http://theconversation.com/quince-virus-que-han-cambiado-la- historia-de-la-humanidad-149031 Virus del herpes simple (VHS) [Internet]. MyPathologyReport.ca. 2023 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en: https://www.mypathologyreport.ca/es/pathology-dictionary/herpes-simplex-virus-hsv/
  • 46. Spinelli OM, Eugenia D, Altamirano M. IMAGENES EN MEDICINA [Internet]. Edu.ar. 2003 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en: http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/10283/Documento_completo__.pdf- PDFA.pdf?sequence=1&isAllowed=y Rodríguez Martínez O, Benítez Cartaya M, Ambou Frutos I, Vilches Lescaille D de la C, Hernández Cruz C, Castro Machado A. Citomegalovirus: de la primoinfección a la retinitis. Rev Cuba Oftalmol [Internet]. 2014 [citado el 10 de mayo de 2023];27(3):439-454. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0864- 21762014000300011&script=sci_arttext&tlng=pt Sitio de Ciencia-Ficcion. Glosario de Ciencia-Ficción - P - Provirus [Internet]. Ciencia-ficcion.com. 2023 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en:https://www.ciencia-ficcion.com/glosario/p/provirus.htm Qué son los bacteriófagos [Internet]. www.ocu.org. 2017 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en: https://www.ocu.org/alimentacion/seguridad-alimentaria/informe/bacteriofagos Efectos citopáticos virales [Internet]. MyPathologyReport.ca. 2020 [citado el 10 de mayo de 2023]. Disponible en: https://www.mypathologyreport.ca/es/pathology-dictionary/viral-cytopathic-effects/ Tapia LI. LABORATORIO DE VIROLOGÍA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA. Rev médica Clín Las Condes [Internet]. 2015 [citado el 10 de mayo de 2023] 26(6):744-752. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.rmclc.2015.11.003