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Dra. Marisa Biasoli
Centro de Referencia de Micología
CANDIDIASIS
• DEFINICIÓN: - Es una infección causada
por levaduras del género Candida.
- Presenta manifestaciones clínicas
extremadamente variables:
- Evolución aguda, subaguda, crónica o
episódica.
- Lesiones cutáneas, mucocutáneas,
profundas ó diseminadas (forma invasiva).
 Habitat natural: suelo, aguas dulces, vegetales, frutas etc., (en
sustancias ricas en HC simples).
 Componentes de la microbiota habitual del hombre en la mucosa
bucal, intestinal , vaginal y en la piel.
Es la capacidad de un microorganismo de llegar a la superficie
del hospedero por una puerta de entrada (piel o mucosas),
formar o establecer una colonia en el epitelio y resistir la
acción de los sistemas locales de defensa sin causar
enfermedad en el hospedero.
COLONIZACIÓN
… la piel?
Candida albicans.............. 17%
Candida tropicalis............. 14%
Candida parapsilosis. ....... 63%
Candida spp........................ 6%
• Biasoli y col., 1989 (CEREMIC)
• Luque y col., 2009 (CEREMIC)
Candida albicans........ ......74%
Candida tropicalis........ .... 16%
Candida glabrata........ ....... 2%
Candida parapsilosis.... ..... 2%
Candida dubliniensis... ...... 2%
Candida spp.........................4%
… la cavidad orofaríngea?
¿Cuáles son las especies que colonizan…
• AGENTES ETIOLÓGICOS DE LA CANDIDIASIS:
 Candida albicans
 C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei
 C. dubliniensis, C. famata, C. guillermondi, C. lusitaniae, C.
haemuloni, etc.
• ¿Porqué las levaduras del género Candida se
transforman en patógenos?
Levadura
Paciente
Medio
ambiente
CANDIDIASIS
El desarrollo de la enfermedad por Candida depende de la
interacción de ciertos factores:
1-Factores predisponentes para la infección.
2-Patogenicidad intrínseca del microorganismo.
3-Mecanismos de defensa del huésped.
• PATOGENIA:
- Fisiológicas: edades extremas, embarazo
1- Factores predisponentes para la infección:
En la mayoría de los casos de CI confluyen dos o más de
estos factores.
- Mecánicas: humedad y maceración, oclusión, prótesis, heridas,
traumatismos, exposición ocupacional.
- Alteraciones de la flora normal: por uso de antibióticos.
- Endocrinas: diabetes, hipotiroidismo, obesidad, hiperuricemia, síndrome
de Cushing, déficit de hierro.
-Enfermedades debilitantes: neoplasias, inanición, leucemias quemaduras,
linfomas, anemias, neutropenia, infección por VIH
, cateterismo, etc.
- Factores iatrogénicos: anticonceptivos orales, prótesis, uso prolongado de
corticoides, quimioterápicos, alimentación parenteral, transplantes, cirugía
abdominal, sondas, catéteres, inmunosupresores, agentes citotóxicos,
radioterapia, hemodiálisis, cateterismo, etc.
Nombre y Apellido: LM Sexo: F Edad: 2 meses.
Localización de la lesión: Mucosa bucal y lengua
• Caso Problema 1:
Examen físico: paciente nacido a término,
buen estado de nutrición. Desde hace 1
semana presenta lesiones con placas
diseminadas en toda la mucosa bucal y
lengua, de aspecto pseudomembranoso y
blanquecino adherente. Dos semanas
atrás fue tratada con antibióticos por vía
oral por un cuadro de infección
respiratoria.
Nombre y Apellido: LC Edad: 43 años
Antecedentes: paciente de sexo masculino que presenta una
recaída de una Leucemia Linfógena Aguda. Se lo interna y se le
coloca un catéter en la vena safena a través del cual se le realiza
quimioterapia. Al 8º día de tratamiento se agrega fluconazol como
profilaxis antifúngica orofaríngea. En el día 10 aparece
granulocitopenia y fiebre de 38ºC. Se agrega tratamiento ATB
(vancomicina-tobramicina) sin remisión del cuadro febril.
• Caso Problema 2:
2- Factores de virulencia en Candida (C. albicans )
 Capacidad de adherencia
 Producción de hifas y pseudohifas
 Producción de enzimas extracelulares:
 Capacidad de switching o variabilidad fenotípica
 Formación de biofilm
 Adherencia
• Interacción levadura – célula del hospedero
L a
Adhesina CÉLULA
HOSPEDERO
r
Receptor
Luz TGI
• Interacción levadura – célula del TGH
 Formación de hifas y seudohifas
 Aumenta la capacidad invasiva
 Aumenta de la capacidad de adherencia
 Aumenta la resistencia a la fagocitosis
L
F S
 Producción de enzimas extracelulares:
- Proteinasas.
- Fosfolipasas
 Capacidad de switching o variabilidad fenotípica:
Es un cambio espontáneo, frecuente y reversible entre diferentes
fenotipos distinguibles por la morfología de la colonia o por la
morfología celular.
 Formación de biofilm
 Son comunidades microbianas adheridas a superficies, biológicas
o no, encerradas a una matriz.
 Las levaduras exhiben un aumento de la resistencia a las defensas del
huésped y a la terapia antifúngica.
 Más del 65% de las infecciones fúngicas involucran la formación de
biofilms
3-Mecanismos de defensa del huésped
A- No inmunes:
1- La interacción con otros miembros de la flora microbiana.
2- La integridad funcional del estrato córneo.
3- El proceso de descamación debido a la proliferación
epidérmica inducida por la inflamación.
B- Inmunes:
1- Inmunidad innata y adaptativa (Inmunidad mediada por células).
• Patogénesis de la Candidiasis Invasiva
Invasión de mucosa, tejidos queratinizados (piel)
Candidiasis
1-Colonización
(carga fúngica
elevada) mucosa
oral, intestino,
vagina, piel
2-Ruptura de la barrera
cutáneo-mucosa
Uso prolongado de catétes,
cirugía, traumatismos,
quemaduras, mucositis ,
diálisis
Causa predisponente
Sangre
Tejido intestinal
Luz TGI Tejido intestinal
Luz TGI Sangre
• Patogénesis de la Candidiasis Invasiva
Cuadros Clínicos
• Candidiasis de las mucosas
- Candidiasis orofaríngea
- Vaginitis y balanitis
- Bronquial y pulmonar
- Candidiasis esofágica, intestinal
- Candidiasis mucocutánea crónica
• Candidiasis cutánea
- Intertrigos
- Paroniquia y onicomicosis
- Granuloma candidiásico
• Candidiasis Invasiva (localizada o diseminada)
Intertrigo: Es una inflamación en
pliegues y áreas adyacentes de piel
que se rozan o se presionan entre sí ,
en presencia de calor y humedad.
• Candidiasis Cutánea
Intertrigos (pequeños y grandes
pliegues): interdigitales, sub e
intermamarios, axilares, interglúteos,
inguinales
Factores predisponentes: roce,
maceración y humedad, obesidad,
diabetes y hábitos laborales
www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/yeast-like_fungi
• Candidiasis Cutánea: Pequeños pliegues
www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/yeast-like_fungi
• Candidiasis Cutánea: Grandes pliegues
• Candidiasis Cutánea: Paroniquia y onicomicosis
Paroniquia: es inflamación del pliegue ungueal tras la
destrucción de la cutícula, que aparece rojo, hinchado y
doloroso, ocasionalmente con pus.
Onicomicosis es una infección causada por hongos en las uñas
de pies y/o manos
Factores predisponentes: diabetes, dermatitis crónica, uso de
corticoides, trabajos con agua, uso permanente de guantes
oclusivos, manicuría, maceración con detergentes y sustancias
abrasivas, contacto con azúcares (pasteleros) .
www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/yeast-like_fungi
Cuadros Clínicos
• Candidiasis de las mucosas
- Candidiasis orofaríngea
- Vaginitis y balanitis
- Bronquial y pulmonar
- Candidiasis esofágica, intestinal
- Candidiasis mucocutánea crónica
• Candidiasis cutánea
- Intertrigos
- Paroniquia y onicomicosis
- Granuloma candidiásico
• Candidiasis Invasiva (localizada o diseminada)
• Candidiasis pseudomembranosa
-Candidiasis eritematosa
- Candidiasis orofaríngea
- Glositis
- Queilitis angular (boqueras)
- Vaginitis y balanitis
-La vaginitis es una inflamación de la vulva, la vagina y el tejido
endocervical ectópico.
- Sintomatología más frecuentes: Picazón, sensación de quemazón,
descarga vaginal anormal, eritema vulvar y vaginal.
-La CVV se define como recurrente, cuando se producen 3 o más episodios
en un año.
- Candidiasis Bronquial
Produce un cuadro de bronquitis, con tos, expectoración y engrosamiento
peribronquial.
- Candidiasis esofágica
-Lesiones similares a aftas (endoscopía). Disfagia, odinofagia, fiebre.
-Es frecuente en pacientes VIH (+)
- Candidiasis Invasiva (o invasora, CI)
Engloba una amplia variedad de cuadros graves: candidemia, endocarditis,
meningitis, endoftalmitis y afectación de diversos órganos profundos; excluye
las infecciones superficiales como las candidiasis orofaríngeas y esofágicas.
• Múltiple localización visceral o
• Candidemia persitente + localización visceral única
- Candidiasis diseminada o sistémica:
- Candidemia: Hallazgo de levaduras del género Candida en muestras de
hemocultivos
Puede ser: -Transitoria (Hc positivo aislado)
-Persistente (Hc positivos reiterados)
Es común en pacientes con cateterizaciones venosas prolongadas.
- Candidiasis profunda localizada:
-Afecta a un único órgano: pulmones, riñones, sistema nervioso, ojos,
endocardio. Es necesario demostrar la presencia del hongo en los tejidos
comprometidos, a través de estudios histopatológicos.
- Candidiasis Invasiva (o invasora, CI)
CANDIDIASIS:
Diagnóstico Micológico
ESTUDIOS MICOLÓGICOS
1- Obtención de la muestra
2- Examen directo
3- Cultivos
4- Identificación de género y especie
5- Estudios complementarios
6- Interpretación e informe de los resultados
1- Obtención de la muestra:
- Piel y faneras: raspado con bisturí estéril
- Mucosas
(Caso problema 1)
RASPADO CON HISOPO
Nombre y Apellido: LC
Antecedentes: paciente con una recaída de una LLA con catéter en la vena safena
(por la quimioterapia). En el día 10 aparece granulocitopenia y fiebre de 38 ºC.
Se agrega tratamiento ATB sin remisión del cuadro febril.
• Caso Problema 2:
- HEMOCULTIVO
1- Obtención de la muestra:
•MUESTRAS:
•Escamas de piel y faneras: raspado con bisturí estéril. Se recojen sobre
portas o caja de Petri estéril
•Mucosa bucal, vaginal, surco balano-prepucial: se toma con hisopo y se
recoge en tubo con solución fisiológica estéril.
• Otras localizaciones: Hemocultivo, esputo, LBA, biopsias de diferentes
tejidos, LCR, punción hepática, etc. Se recogen en recipientes estériles
-En fresco
-Por fijación y tinción
2- Examen directo
* Tener en cuenta el material a analizar:
- Escamas de piel: Con KOH 20% (disgregante)
- Hisopado de mucosas: En fresco
-Examen directo en fresco:
Se realizan para todoas las muestras clínicas, (excepto el hemocultivo)
Hisopado de boca.Se observan levaduras y
pseudomicelio KOH 20 % - 400X
Escamas de uña. Se observan
levaduras y pseudomicelio KOH 20 % -
400X
Frotis teñido con Gomori-Groccot. Se
observan levaduras y pseudomicelio -
400 X
-Examen directo por fijación y tinción:
LBA, esputo, biopsia, liq. de punción, etc
Frotis teñido con Gram. Se observan
levaduras y pseudomicelio - 400 X
* Gram-Nicolle, MGG, Groccot, PAS
• Escamas de piel
Agar Sabouraud glucosa (ASG),
Lactrimel, Mycosel
-Incubar a 28 ºC, 2 semanas
ASG, ASG cloranfenicol
-Incubar a 28 ºC, 1 semana
• Hisopado de
mucosa
3- Cultivos
• Hemocultivos
• En caldo
• Por Lisis-centrifugación
Sembrar o repicar en: ASG, ASG cl,
Mycosel, Cerebro Corazón Sangre
(CCS). Incubar a 28 ºC y 37ºC, 1
mes
• ASG, ASG cl, mycosel, CCS.
Incubar a 28 ºC y 37ºC, 1 mes
• Esputo, LBA,
biopsia, punción,
etc.
3- Cultivos: En 24-48 hs se observa desarrollo de
colonias cremosas, húmedas, lisas.
a- Utilización de Medio Cromogénico:
Aislamiento o reaislamiento en CHROMagar Candida
Candida tropicalis
Complejo Candida albicans
Candida spp ?
Candida krusei
Identificación presuntiva de:
4- Identificación de género y especie
- Esta prueba es (+) para las levaduras del complejo C. albicans
(colonias verdes en CHROMAagar)
-Formación de tubo germinativo (prueba rápida)
Incubar las levaduras en suero 2.30-3 hs a 37ºC
4- Identificación de género y especie
b-Estudios Micromorfológicos
-C. albicans o C. dubliniensis.:
-Levaduras y/o pseudomicelio + Clamidoconidios
terminales
-Micromorfología en AHM: Incubar 48 hs- 28ºC
b-Estudios Micromorfológicos
Levaduras y/o pseudomicelio
-Otras especies de Candida:
C. parapsilosis C. glabrata
4- Identificación de género y especie
c- Pruebas Bioquímicas para la identificación de otras
especies de Candida
- Auxonograma (Asimilación) de sustancias hidrocarbonadas y
nitrogenadas
- Zimograma (Fermentación) de sustancias
hidrocarbonadas
- Utilización de kits comerciales (con pruebas bioquímicas
de asimilación, fermentación, sensibilidad a ATF y/o
perfiles enzimáticos). Ej.: API 20 C AUX y ID 32C
(BioMérieux), Auxacolor (Sanofi Diagnostics), Fungichrom
(International Microbio), etc.
4- Identificación de género y especie
ID 32 C
VITEK 2 (bioMérieux)
- Sistema completamente automatizado que permite realizar la identificación y
susceptibilidad de levaduras.
 Permite detectar moléculas en un amplio rango de masas
moleculares. Se conoce como "soft-ionization" ya que permite
ionizar biomoléculas, como péptidos y proteínas, sin ruptura
durante el proceso. Existen distintos analizadores pero el TOF
("time of flight") es el más común.
4- Identificación de género y especie
Utilización de tecnología MALDI-TOF MS
(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time Of Flight-Mass Spectrometry)
2.30 a 3.00
• Alta probabilidad de ID de
especie
2.00 a 2.29
1.70 a 1.99
• ID de género segura, especie
probable
• ID de género probable
0.00 a 1.69
• ID no confiable
Criterios de informe
Permite discriminar especies
relacionadas:
C. parapsilosis/metapsilosis/
orthopsilosis
C. glabrata/bracarensis/ nivariensis
C. albicans/dubliniensis/africana
C. haemolonii/auris
C. guillermondii/famata
Secuenciación directa a partir del producto de amplificación por PCR de las
regiones de rADN (gen 5.8S RNA y las regiones ITS1 and ITS2) y de otros
fragmentos del ADN (gen de la B-tubulina, de la Orotidina descarboxilasa , de
la Quitina sintasa, de la B-Actina, etc.)
 Análisis de secuencias de genes nucleares:
Ha demostrado su utilidad para valorar la relación tanto entre
organismos alejados como entre organismos próximos.
 Amplificación y restricción del ADN ribosomal
Amplificación de diferentes zonas del complejo ribosomal por PCR/ Restricción del
producto de amplificación
4- Identificación de género y especie
Métodos moleculares basados en análisis del ADN
Marcha de identificación de levaduras de Candida de importancia clínica
Aislamiento primario (o reaislamiento) en CHROMagar
Siembra en AHM+Tween 80
Incubar 48 hs -28 ºC
Identificación definitiva con API 20
C Aux, ID 32 C, VITEK, MALDI-TOF,
Biología Molecular
Colonias de 1 único color
Especie aislada
Mezcla de Colonias (más de un color)
Mezcla de especies
Cada una de las colonias de diferente color
C. tropicalis C. krusei Otras especies
de Candida
C. albicans o C.
dubliniensis
Colonias verdes y
clamidoconidios
Colonias azules
y pseudomicelio
Colonias rosas
secas y
pseudomicelio
Colonias rosas
húmedas
Siembra ASGirasol (ASGi)
Clamidoconidios-24 hs-28ºC
(+) C. dubliniensis
(-) C. albicans
Identificación presuntiva de
C. albicans / C.
dubliniensis
Siembra ASGi
(-) C. albicans
(+) C. dubliniensis
C. tropicalis C. krusei
Candida spp.
API 20 C Aux-ID 32 C
Identificación definitiva
Marcha para la identificación de levaduras de importancia clínica
Complejo de especies
Formado por dos o más especies relacionadas que poseen características
fenotípicas similares y han sido asignadas a una especie.
Implica que dos o más especies están agrupadas bajo el nombre de una misma
especie.
Especies crípticas: Implica que dos o más especies están agrupadas
bajo el nombre de una especie.
En general las nuevas especies crípticas que forman estos complejos
de especies se encuentran en menor frecuencia que las especies
formales. Pueden tener diferencia en la patogenicidad y la
susceptibilidad a los ATF.
 Complejo C. albicans: C. albicans sensu stricto , C. dubliniensis
y Candida africana
 Complejo C. parapsilosis: C. parapsilosis sensu stricto, Candida
metapsilosis, Candida orthopsilosis
 Complejo C. glabrata: C. glabrata sensu stricto, Candida
nivariensis, Candida bracarensis
ESTUDIOS MICOLÓGICOS
1- Obtención de la muestra
2- Examen directo
3- Cultivos
4- Identificación de género y especie
5- Estudios complementarios
6- Interpretación e informe de los resultados
Detección de Ac, Ag,
metabolitos fúngicos,
ADN
 POR QUÉ SE UTILIZAN… ?
- Por la alta tasa de mortalidad de la CI
- Para realizar un diagnóstico temprano
- Porque los signos y síntomas son inespecíficos
- Los hemocultivos son frecuentemente negativos
- Los estudios histopatológicos están
contraindicados
5-Pruebas complementarias para Candidiasis Invasiva:
Pared celular
Detección de Antígenos Detección de Anticuerpos
Detección de ADN
Detección de
metabolitos fúngicos
 QUÉ PRUEBAS PODEMOS REALIZAR… ?
 Detección de Anticuerpos
Antígenos utilizados:
- Ag de manana (α y β-mananos, Ag de pared)
- Ag inmunodominantes de 48 kD (enolasa)
- Ag citoplámático
- Ag de la fase micelial (Candida albicans IFA Ig-Lab Vircell)
Técnicas utilizadas: ID, CIEF, ELISA, IF
-Utilidad: Diagnóstico y seguimiento de CI (Utilizar Ag
citoplasmáticos, enolasa o Ag micelio)
-Limitaciones:
-Detección de títulos altos en pacientes colonizados (utilizar Ag más
específicos , ej: Ag de la fase micelial de Candida )
-Respuesta reducida o inexistente en pacientes nmunocomprometidos
(utilizar técnicas más sensibles)
-Antígenos detectados:
- Ag de manana
- Ag inmunodominantes de 48 kD (enolasa)
-Anticuerpos utilizados: Mono y policlonales
-Técnicas utilizadas: APL, Elisa, Inmunobloting
 Detección de Antígenos
PRUEBA TÉCNICA Ag detectado Ac Utilizado
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Limitaciones:
- Antigenemia transitoria,
- Liberación de inmunocomplejos,
- Sensibilidad ( Combinar con otras pruebas)
Utilidad y conducta a seguir:
- Realizar pruebas seriadas (Antigenemia transitoria)
- Combinar con otras pruebas para aumentar la sensibilidad (detección Ac,
ADN o metabolitos fúngicos)
 Detección de Metabolitos Fúngicos (componentes no antigénicos)
D-arabinitol:
-Lo producen C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. kefyr, etc.
- Se detecta por cromatografía gas-líquido.
Limitaciones:
- No apto para lab. de rutina
- En pacientes con problemas renales se dan valores aumentados.
(1-3)-ß-D-glucano:
-Es un componente importante de la pared celular de muchos hongos
(excepto Cryptococcus neoformans y Mucorales)
-Es un marcador panfúngico
-Se libera durante la infección
-Su eliminación es lenta (no hay glucanasas en suero)
-No existe en tej. de mamíferos, cel. proc. y virus
-Marcas comerciales: Fungitell, Fungitec G, Wako, B-G Star
-Tiene una S > 78% y una E > 87,5% en el diagnóstico de la CI.
Los patógenos fúngicos oportunistas
incluyen Candida spp., Aspergillus spp.,
Fusarium spp., Trichosporon spp.,
Saccharomyces cerevisiae,
Acremonium spp., Coccidioides immitis,
Histoplasma capsulatum, Sporothrix
schenckii, Exserohilum rostratum, y
Pneumocystis jirovecii. El (1→3)-β-D-
glucano producido por estos y otros
microorganismos puede detectarse
mediante el ensayo Fungitell.
Hay ciertas especies fúngicas
producen concentraciones muy bajas
de (1→3)-β-D-glucano, por lo que el
ensayo Fungitell® no suele
detectarlas. Dichas especies incluyen
el género Cryptococcus, así como
Mucorales como Absidia, Mucor y
Rhizopus.
Ventajas:
-La inexistencia de este metabolito en tejidos de mamíferos
-La ausencia de glucanasas.
-Se considera que una prueba (+) indica un criterio microbiológico de IFI
-Desventajas:
-Al ser un marcador panfúngico debe combinarse con otras pruebas que
permitan identificar la especie fúngica infectante.
-Se han detectado falsos (+): tratamientos de hemodiálisis con membrana de
celulosa, tratamiento con albúminas, agentes anti-cancerosos y ciertos ATB.
(1-3)-ß-D-glucano: es un marcador útil para CI pero debe
combinarse con una prueba específica de especie. Se positiviza
una media de diez días antes que el diagnóstico clínico en CI.
Pueden haber falsos positivos.
 Detección de ADN
-Técnicas utilizadas:
- PCR Standard
- PCR Nested
- PCR- EIA
- PCR en tiempo real
PCR > sensibilidad
-Secuencias target más utilizadas:
Genes ribosomales y sus espaciadores internos
-Limitaciones:
-Falta estandarización en métodos de extracción y detección del
ADN (no existe una prueba evaluada y utilizada universalmente)
-Difícil comparación entre estudios
-No diferencia entre colonización e infección.
-Falsos negativos: baja S del método diseñado para gen copia
simple.
-Falsos positivos: por colonización o contaminación de la muestra
antes de la amplificación
 Detección de ADN
 Conclusiones sobre la utilización de pruebas
complementarias para el diagnóstico de CI:
 Hemocultivos: baja sensibilidad (50%)
 Son de utilidad en paciente crítico febril con hemocultivos
(-) y factores de riesgo para CI.
 Es necesaria la detección de más de 1 marcador (combinación
de pruebas) para lograr niveles de S y E
 Un resultado (+) de cualquiera de los marcadores es
anterior al diagnóstico clínico, permite anticipar el
tratamiento antifúngico mejora el pronóstico del
paciente.
ESTUDIOS MICOLÓGICOS
1- Obtención de la muestra
2- Examen directo
3- Cultivos
4- Identificación de género y especie
5- Estudios complementarios
6- Interpretación e informe de los resultados
• Para definir un diagnóstico es necesario que exista correlación entre:
- examen directo (es muy importante)
- cultivos (es importante si el material es de un órgano estéril)
- cuadro clínico.
6- Interpretación e informe de los resultados:
• Cuando se aíslan levaduras de una muestra clínica es necesario
determinar:
- si está colonizando
- si está causando infección
• Para ello se adoptan distintos criterios dependiendo de:
- hongo involucrado
- tipo de muestra
- características del paciente
 Candidiasis cutánea, Candidiasis vaginal, Candidiasis
orofaríngea, Candidiasis esofágica, Candidiasis
mucocutánea crónica:
Criterios a seguir para el diagnóstico de:
 ED (+) y Cultivo (+) INFECCIÓN
 ED (-) y Cultivo (+) COLONIZACIÓN
-Examen directo positivo (levaduras y/o pseudomicelio) y
-Cultivo positivo para levaduras con una lesión y signos
clínicos compatibles.
• Candidemia (paciente neutropénico):
- Hemocultivo positivo (con retrocultivo negativo).
• Candidiasis profunda localizada:
- Biopsia de un órgano con examen directo y/o cultivo
positivo;
• Candidiasis sistémica:
- Hemocultivo positivo/orina por punción suprapúbica
(directo y/o cultivo positivo) + Biopsia con examen
directo y/o cultivo positivo;
No se considera como criterio diagnóstico de Candidiasis sistémica un
examen directo (+) y/o cultivo (+) para levaduras de catéter, retrocultivo,
orina por sonda o chorro medio, heces, BAL u otras muestras provenientes
de sitios no estériles.
 EN CANDIDIASIS INVASIVA:
Criterios a seguir para el diagnóstico de:

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  • 1. Dra. Marisa Biasoli Centro de Referencia de Micología CANDIDIASIS
  • 2. • DEFINICIÓN: - Es una infección causada por levaduras del género Candida. - Presenta manifestaciones clínicas extremadamente variables: - Evolución aguda, subaguda, crónica o episódica. - Lesiones cutáneas, mucocutáneas, profundas ó diseminadas (forma invasiva).  Habitat natural: suelo, aguas dulces, vegetales, frutas etc., (en sustancias ricas en HC simples).  Componentes de la microbiota habitual del hombre en la mucosa bucal, intestinal , vaginal y en la piel.
  • 3. Es la capacidad de un microorganismo de llegar a la superficie del hospedero por una puerta de entrada (piel o mucosas), formar o establecer una colonia en el epitelio y resistir la acción de los sistemas locales de defensa sin causar enfermedad en el hospedero. COLONIZACIÓN
  • 4. … la piel? Candida albicans.............. 17% Candida tropicalis............. 14% Candida parapsilosis. ....... 63% Candida spp........................ 6% • Biasoli y col., 1989 (CEREMIC) • Luque y col., 2009 (CEREMIC) Candida albicans........ ......74% Candida tropicalis........ .... 16% Candida glabrata........ ....... 2% Candida parapsilosis.... ..... 2% Candida dubliniensis... ...... 2% Candida spp.........................4% … la cavidad orofaríngea? ¿Cuáles son las especies que colonizan… • AGENTES ETIOLÓGICOS DE LA CANDIDIASIS:  Candida albicans  C. parapsilosis, C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei  C. dubliniensis, C. famata, C. guillermondi, C. lusitaniae, C. haemuloni, etc.
  • 5. • ¿Porqué las levaduras del género Candida se transforman en patógenos? Levadura Paciente Medio ambiente CANDIDIASIS El desarrollo de la enfermedad por Candida depende de la interacción de ciertos factores: 1-Factores predisponentes para la infección. 2-Patogenicidad intrínseca del microorganismo. 3-Mecanismos de defensa del huésped. • PATOGENIA:
  • 6. - Fisiológicas: edades extremas, embarazo 1- Factores predisponentes para la infección: En la mayoría de los casos de CI confluyen dos o más de estos factores. - Mecánicas: humedad y maceración, oclusión, prótesis, heridas, traumatismos, exposición ocupacional. - Alteraciones de la flora normal: por uso de antibióticos. - Endocrinas: diabetes, hipotiroidismo, obesidad, hiperuricemia, síndrome de Cushing, déficit de hierro. -Enfermedades debilitantes: neoplasias, inanición, leucemias quemaduras, linfomas, anemias, neutropenia, infección por VIH , cateterismo, etc. - Factores iatrogénicos: anticonceptivos orales, prótesis, uso prolongado de corticoides, quimioterápicos, alimentación parenteral, transplantes, cirugía abdominal, sondas, catéteres, inmunosupresores, agentes citotóxicos, radioterapia, hemodiálisis, cateterismo, etc.
  • 7. Nombre y Apellido: LM Sexo: F Edad: 2 meses. Localización de la lesión: Mucosa bucal y lengua • Caso Problema 1: Examen físico: paciente nacido a término, buen estado de nutrición. Desde hace 1 semana presenta lesiones con placas diseminadas en toda la mucosa bucal y lengua, de aspecto pseudomembranoso y blanquecino adherente. Dos semanas atrás fue tratada con antibióticos por vía oral por un cuadro de infección respiratoria.
  • 8. Nombre y Apellido: LC Edad: 43 años Antecedentes: paciente de sexo masculino que presenta una recaída de una Leucemia Linfógena Aguda. Se lo interna y se le coloca un catéter en la vena safena a través del cual se le realiza quimioterapia. Al 8º día de tratamiento se agrega fluconazol como profilaxis antifúngica orofaríngea. En el día 10 aparece granulocitopenia y fiebre de 38ºC. Se agrega tratamiento ATB (vancomicina-tobramicina) sin remisión del cuadro febril. • Caso Problema 2:
  • 9. 2- Factores de virulencia en Candida (C. albicans )  Capacidad de adherencia  Producción de hifas y pseudohifas  Producción de enzimas extracelulares:  Capacidad de switching o variabilidad fenotípica  Formación de biofilm  Adherencia • Interacción levadura – célula del hospedero L a Adhesina CÉLULA HOSPEDERO r Receptor Luz TGI • Interacción levadura – célula del TGH
  • 10.  Formación de hifas y seudohifas  Aumenta la capacidad invasiva  Aumenta de la capacidad de adherencia  Aumenta la resistencia a la fagocitosis L F S  Producción de enzimas extracelulares: - Proteinasas. - Fosfolipasas  Capacidad de switching o variabilidad fenotípica: Es un cambio espontáneo, frecuente y reversible entre diferentes fenotipos distinguibles por la morfología de la colonia o por la morfología celular.
  • 11.  Formación de biofilm  Son comunidades microbianas adheridas a superficies, biológicas o no, encerradas a una matriz.  Las levaduras exhiben un aumento de la resistencia a las defensas del huésped y a la terapia antifúngica.  Más del 65% de las infecciones fúngicas involucran la formación de biofilms 3-Mecanismos de defensa del huésped A- No inmunes: 1- La interacción con otros miembros de la flora microbiana. 2- La integridad funcional del estrato córneo. 3- El proceso de descamación debido a la proliferación epidérmica inducida por la inflamación. B- Inmunes: 1- Inmunidad innata y adaptativa (Inmunidad mediada por células).
  • 12. • Patogénesis de la Candidiasis Invasiva Invasión de mucosa, tejidos queratinizados (piel) Candidiasis 1-Colonización (carga fúngica elevada) mucosa oral, intestino, vagina, piel 2-Ruptura de la barrera cutáneo-mucosa Uso prolongado de catétes, cirugía, traumatismos, quemaduras, mucositis , diálisis Causa predisponente
  • 13. Sangre Tejido intestinal Luz TGI Tejido intestinal Luz TGI Sangre • Patogénesis de la Candidiasis Invasiva
  • 14. Cuadros Clínicos • Candidiasis de las mucosas - Candidiasis orofaríngea - Vaginitis y balanitis - Bronquial y pulmonar - Candidiasis esofágica, intestinal - Candidiasis mucocutánea crónica • Candidiasis cutánea - Intertrigos - Paroniquia y onicomicosis - Granuloma candidiásico • Candidiasis Invasiva (localizada o diseminada)
  • 15. Intertrigo: Es una inflamación en pliegues y áreas adyacentes de piel que se rozan o se presionan entre sí , en presencia de calor y humedad. • Candidiasis Cutánea Intertrigos (pequeños y grandes pliegues): interdigitales, sub e intermamarios, axilares, interglúteos, inguinales Factores predisponentes: roce, maceración y humedad, obesidad, diabetes y hábitos laborales www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/yeast-like_fungi
  • 16. • Candidiasis Cutánea: Pequeños pliegues www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/yeast-like_fungi • Candidiasis Cutánea: Grandes pliegues
  • 17. • Candidiasis Cutánea: Paroniquia y onicomicosis Paroniquia: es inflamación del pliegue ungueal tras la destrucción de la cutícula, que aparece rojo, hinchado y doloroso, ocasionalmente con pus. Onicomicosis es una infección causada por hongos en las uñas de pies y/o manos Factores predisponentes: diabetes, dermatitis crónica, uso de corticoides, trabajos con agua, uso permanente de guantes oclusivos, manicuría, maceración con detergentes y sustancias abrasivas, contacto con azúcares (pasteleros) . www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/yeast-like_fungi
  • 18. Cuadros Clínicos • Candidiasis de las mucosas - Candidiasis orofaríngea - Vaginitis y balanitis - Bronquial y pulmonar - Candidiasis esofágica, intestinal - Candidiasis mucocutánea crónica • Candidiasis cutánea - Intertrigos - Paroniquia y onicomicosis - Granuloma candidiásico • Candidiasis Invasiva (localizada o diseminada)
  • 19. • Candidiasis pseudomembranosa -Candidiasis eritematosa - Candidiasis orofaríngea - Glositis - Queilitis angular (boqueras)
  • 20. - Vaginitis y balanitis -La vaginitis es una inflamación de la vulva, la vagina y el tejido endocervical ectópico. - Sintomatología más frecuentes: Picazón, sensación de quemazón, descarga vaginal anormal, eritema vulvar y vaginal. -La CVV se define como recurrente, cuando se producen 3 o más episodios en un año. - Candidiasis Bronquial Produce un cuadro de bronquitis, con tos, expectoración y engrosamiento peribronquial. - Candidiasis esofágica -Lesiones similares a aftas (endoscopía). Disfagia, odinofagia, fiebre. -Es frecuente en pacientes VIH (+)
  • 21. - Candidiasis Invasiva (o invasora, CI) Engloba una amplia variedad de cuadros graves: candidemia, endocarditis, meningitis, endoftalmitis y afectación de diversos órganos profundos; excluye las infecciones superficiales como las candidiasis orofaríngeas y esofágicas. • Múltiple localización visceral o • Candidemia persitente + localización visceral única - Candidiasis diseminada o sistémica: - Candidemia: Hallazgo de levaduras del género Candida en muestras de hemocultivos Puede ser: -Transitoria (Hc positivo aislado) -Persistente (Hc positivos reiterados) Es común en pacientes con cateterizaciones venosas prolongadas. - Candidiasis profunda localizada: -Afecta a un único órgano: pulmones, riñones, sistema nervioso, ojos, endocardio. Es necesario demostrar la presencia del hongo en los tejidos comprometidos, a través de estudios histopatológicos.
  • 22. - Candidiasis Invasiva (o invasora, CI)
  • 24. ESTUDIOS MICOLÓGICOS 1- Obtención de la muestra 2- Examen directo 3- Cultivos 4- Identificación de género y especie 5- Estudios complementarios 6- Interpretación e informe de los resultados
  • 25. 1- Obtención de la muestra: - Piel y faneras: raspado con bisturí estéril - Mucosas (Caso problema 1) RASPADO CON HISOPO
  • 26. Nombre y Apellido: LC Antecedentes: paciente con una recaída de una LLA con catéter en la vena safena (por la quimioterapia). En el día 10 aparece granulocitopenia y fiebre de 38 ºC. Se agrega tratamiento ATB sin remisión del cuadro febril. • Caso Problema 2: - HEMOCULTIVO 1- Obtención de la muestra: •MUESTRAS: •Escamas de piel y faneras: raspado con bisturí estéril. Se recojen sobre portas o caja de Petri estéril •Mucosa bucal, vaginal, surco balano-prepucial: se toma con hisopo y se recoge en tubo con solución fisiológica estéril. • Otras localizaciones: Hemocultivo, esputo, LBA, biopsias de diferentes tejidos, LCR, punción hepática, etc. Se recogen en recipientes estériles
  • 27. -En fresco -Por fijación y tinción 2- Examen directo * Tener en cuenta el material a analizar: - Escamas de piel: Con KOH 20% (disgregante) - Hisopado de mucosas: En fresco -Examen directo en fresco: Se realizan para todoas las muestras clínicas, (excepto el hemocultivo) Hisopado de boca.Se observan levaduras y pseudomicelio KOH 20 % - 400X Escamas de uña. Se observan levaduras y pseudomicelio KOH 20 % - 400X
  • 28. Frotis teñido con Gomori-Groccot. Se observan levaduras y pseudomicelio - 400 X -Examen directo por fijación y tinción: LBA, esputo, biopsia, liq. de punción, etc Frotis teñido con Gram. Se observan levaduras y pseudomicelio - 400 X * Gram-Nicolle, MGG, Groccot, PAS
  • 29. • Escamas de piel Agar Sabouraud glucosa (ASG), Lactrimel, Mycosel -Incubar a 28 ºC, 2 semanas ASG, ASG cloranfenicol -Incubar a 28 ºC, 1 semana • Hisopado de mucosa 3- Cultivos • Hemocultivos • En caldo • Por Lisis-centrifugación Sembrar o repicar en: ASG, ASG cl, Mycosel, Cerebro Corazón Sangre (CCS). Incubar a 28 ºC y 37ºC, 1 mes • ASG, ASG cl, mycosel, CCS. Incubar a 28 ºC y 37ºC, 1 mes • Esputo, LBA, biopsia, punción, etc.
  • 30. 3- Cultivos: En 24-48 hs se observa desarrollo de colonias cremosas, húmedas, lisas.
  • 31. a- Utilización de Medio Cromogénico: Aislamiento o reaislamiento en CHROMagar Candida Candida tropicalis Complejo Candida albicans Candida spp ? Candida krusei Identificación presuntiva de: 4- Identificación de género y especie
  • 32. - Esta prueba es (+) para las levaduras del complejo C. albicans (colonias verdes en CHROMAagar) -Formación de tubo germinativo (prueba rápida) Incubar las levaduras en suero 2.30-3 hs a 37ºC 4- Identificación de género y especie b-Estudios Micromorfológicos
  • 33. -C. albicans o C. dubliniensis.: -Levaduras y/o pseudomicelio + Clamidoconidios terminales -Micromorfología en AHM: Incubar 48 hs- 28ºC b-Estudios Micromorfológicos Levaduras y/o pseudomicelio -Otras especies de Candida: C. parapsilosis C. glabrata 4- Identificación de género y especie
  • 34. c- Pruebas Bioquímicas para la identificación de otras especies de Candida - Auxonograma (Asimilación) de sustancias hidrocarbonadas y nitrogenadas - Zimograma (Fermentación) de sustancias hidrocarbonadas - Utilización de kits comerciales (con pruebas bioquímicas de asimilación, fermentación, sensibilidad a ATF y/o perfiles enzimáticos). Ej.: API 20 C AUX y ID 32C (BioMérieux), Auxacolor (Sanofi Diagnostics), Fungichrom (International Microbio), etc. 4- Identificación de género y especie
  • 35. ID 32 C VITEK 2 (bioMérieux) - Sistema completamente automatizado que permite realizar la identificación y susceptibilidad de levaduras.
  • 36.  Permite detectar moléculas en un amplio rango de masas moleculares. Se conoce como "soft-ionization" ya que permite ionizar biomoléculas, como péptidos y proteínas, sin ruptura durante el proceso. Existen distintos analizadores pero el TOF ("time of flight") es el más común. 4- Identificación de género y especie Utilización de tecnología MALDI-TOF MS (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time Of Flight-Mass Spectrometry) 2.30 a 3.00 • Alta probabilidad de ID de especie 2.00 a 2.29 1.70 a 1.99 • ID de género segura, especie probable • ID de género probable 0.00 a 1.69 • ID no confiable Criterios de informe Permite discriminar especies relacionadas: C. parapsilosis/metapsilosis/ orthopsilosis C. glabrata/bracarensis/ nivariensis C. albicans/dubliniensis/africana C. haemolonii/auris C. guillermondii/famata
  • 37. Secuenciación directa a partir del producto de amplificación por PCR de las regiones de rADN (gen 5.8S RNA y las regiones ITS1 and ITS2) y de otros fragmentos del ADN (gen de la B-tubulina, de la Orotidina descarboxilasa , de la Quitina sintasa, de la B-Actina, etc.)  Análisis de secuencias de genes nucleares: Ha demostrado su utilidad para valorar la relación tanto entre organismos alejados como entre organismos próximos.  Amplificación y restricción del ADN ribosomal Amplificación de diferentes zonas del complejo ribosomal por PCR/ Restricción del producto de amplificación 4- Identificación de género y especie Métodos moleculares basados en análisis del ADN
  • 38. Marcha de identificación de levaduras de Candida de importancia clínica Aislamiento primario (o reaislamiento) en CHROMagar Siembra en AHM+Tween 80 Incubar 48 hs -28 ºC Identificación definitiva con API 20 C Aux, ID 32 C, VITEK, MALDI-TOF, Biología Molecular Colonias de 1 único color Especie aislada Mezcla de Colonias (más de un color) Mezcla de especies Cada una de las colonias de diferente color C. tropicalis C. krusei Otras especies de Candida C. albicans o C. dubliniensis Colonias verdes y clamidoconidios Colonias azules y pseudomicelio Colonias rosas secas y pseudomicelio Colonias rosas húmedas Siembra ASGirasol (ASGi) Clamidoconidios-24 hs-28ºC (+) C. dubliniensis (-) C. albicans
  • 39. Identificación presuntiva de C. albicans / C. dubliniensis Siembra ASGi (-) C. albicans (+) C. dubliniensis C. tropicalis C. krusei Candida spp. API 20 C Aux-ID 32 C Identificación definitiva Marcha para la identificación de levaduras de importancia clínica
  • 40. Complejo de especies Formado por dos o más especies relacionadas que poseen características fenotípicas similares y han sido asignadas a una especie. Implica que dos o más especies están agrupadas bajo el nombre de una misma especie. Especies crípticas: Implica que dos o más especies están agrupadas bajo el nombre de una especie. En general las nuevas especies crípticas que forman estos complejos de especies se encuentran en menor frecuencia que las especies formales. Pueden tener diferencia en la patogenicidad y la susceptibilidad a los ATF.  Complejo C. albicans: C. albicans sensu stricto , C. dubliniensis y Candida africana  Complejo C. parapsilosis: C. parapsilosis sensu stricto, Candida metapsilosis, Candida orthopsilosis  Complejo C. glabrata: C. glabrata sensu stricto, Candida nivariensis, Candida bracarensis
  • 41. ESTUDIOS MICOLÓGICOS 1- Obtención de la muestra 2- Examen directo 3- Cultivos 4- Identificación de género y especie 5- Estudios complementarios 6- Interpretación e informe de los resultados Detección de Ac, Ag, metabolitos fúngicos, ADN
  • 42.  POR QUÉ SE UTILIZAN… ? - Por la alta tasa de mortalidad de la CI - Para realizar un diagnóstico temprano - Porque los signos y síntomas son inespecíficos - Los hemocultivos son frecuentemente negativos - Los estudios histopatológicos están contraindicados 5-Pruebas complementarias para Candidiasis Invasiva:
  • 44. Detección de Antígenos Detección de Anticuerpos Detección de ADN Detección de metabolitos fúngicos  QUÉ PRUEBAS PODEMOS REALIZAR… ?
  • 45.  Detección de Anticuerpos Antígenos utilizados: - Ag de manana (α y β-mananos, Ag de pared) - Ag inmunodominantes de 48 kD (enolasa) - Ag citoplámático - Ag de la fase micelial (Candida albicans IFA Ig-Lab Vircell) Técnicas utilizadas: ID, CIEF, ELISA, IF -Utilidad: Diagnóstico y seguimiento de CI (Utilizar Ag citoplasmáticos, enolasa o Ag micelio) -Limitaciones: -Detección de títulos altos en pacientes colonizados (utilizar Ag más específicos , ej: Ag de la fase micelial de Candida ) -Respuesta reducida o inexistente en pacientes nmunocomprometidos (utilizar técnicas más sensibles)
  • 46. -Antígenos detectados: - Ag de manana - Ag inmunodominantes de 48 kD (enolasa) -Anticuerpos utilizados: Mono y policlonales -Técnicas utilizadas: APL, Elisa, Inmunobloting  Detección de Antígenos PRUEBA TÉCNICA Ag detectado Ac Utilizado P PL LA AT TE EL LI IA A C Ca an nd di id da a A Ag g E EL LI IS SA A A Ag g M Ma an na an no o P Po ol li ic cl lo on na al l ( (  E E; ;  S S) ) C CA AN ND D- -T TE EC C A AP PL L A Ag g t te er rm mo ol lá áb bi il l P Po ol li ic cl lo on na al l ( (  E E; ;  S S) ) P PA AS ST TO OR RE EX X C Ca an nd di id da a A AP PL L A Ag g M Ma an na an no o M Mo on no oc cl lo on na al l ( (  E E; ;  S S) ) N No o c co om me er rc ci ia al li iz za ad do o I In nm mu un no ob bl lo ot ti in ng g E En no ol la as sa a P Po ol li ic cl lo on na al l ( (  E E; ;  S S) ) Limitaciones: - Antigenemia transitoria, - Liberación de inmunocomplejos, - Sensibilidad ( Combinar con otras pruebas) Utilidad y conducta a seguir: - Realizar pruebas seriadas (Antigenemia transitoria) - Combinar con otras pruebas para aumentar la sensibilidad (detección Ac, ADN o metabolitos fúngicos)
  • 47.  Detección de Metabolitos Fúngicos (componentes no antigénicos) D-arabinitol: -Lo producen C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. kefyr, etc. - Se detecta por cromatografía gas-líquido. Limitaciones: - No apto para lab. de rutina - En pacientes con problemas renales se dan valores aumentados. (1-3)-ß-D-glucano: -Es un componente importante de la pared celular de muchos hongos (excepto Cryptococcus neoformans y Mucorales) -Es un marcador panfúngico -Se libera durante la infección -Su eliminación es lenta (no hay glucanasas en suero) -No existe en tej. de mamíferos, cel. proc. y virus -Marcas comerciales: Fungitell, Fungitec G, Wako, B-G Star -Tiene una S > 78% y una E > 87,5% en el diagnóstico de la CI.
  • 48. Los patógenos fúngicos oportunistas incluyen Candida spp., Aspergillus spp., Fusarium spp., Trichosporon spp., Saccharomyces cerevisiae, Acremonium spp., Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum, Sporothrix schenckii, Exserohilum rostratum, y Pneumocystis jirovecii. El (1→3)-β-D- glucano producido por estos y otros microorganismos puede detectarse mediante el ensayo Fungitell. Hay ciertas especies fúngicas producen concentraciones muy bajas de (1→3)-β-D-glucano, por lo que el ensayo Fungitell® no suele detectarlas. Dichas especies incluyen el género Cryptococcus, así como Mucorales como Absidia, Mucor y Rhizopus.
  • 49. Ventajas: -La inexistencia de este metabolito en tejidos de mamíferos -La ausencia de glucanasas. -Se considera que una prueba (+) indica un criterio microbiológico de IFI -Desventajas: -Al ser un marcador panfúngico debe combinarse con otras pruebas que permitan identificar la especie fúngica infectante. -Se han detectado falsos (+): tratamientos de hemodiálisis con membrana de celulosa, tratamiento con albúminas, agentes anti-cancerosos y ciertos ATB. (1-3)-ß-D-glucano: es un marcador útil para CI pero debe combinarse con una prueba específica de especie. Se positiviza una media de diez días antes que el diagnóstico clínico en CI. Pueden haber falsos positivos.
  • 50.  Detección de ADN -Técnicas utilizadas: - PCR Standard - PCR Nested - PCR- EIA - PCR en tiempo real PCR > sensibilidad -Secuencias target más utilizadas: Genes ribosomales y sus espaciadores internos -Limitaciones: -Falta estandarización en métodos de extracción y detección del ADN (no existe una prueba evaluada y utilizada universalmente) -Difícil comparación entre estudios -No diferencia entre colonización e infección. -Falsos negativos: baja S del método diseñado para gen copia simple. -Falsos positivos: por colonización o contaminación de la muestra antes de la amplificación
  • 52.  Conclusiones sobre la utilización de pruebas complementarias para el diagnóstico de CI:  Hemocultivos: baja sensibilidad (50%)  Son de utilidad en paciente crítico febril con hemocultivos (-) y factores de riesgo para CI.  Es necesaria la detección de más de 1 marcador (combinación de pruebas) para lograr niveles de S y E  Un resultado (+) de cualquiera de los marcadores es anterior al diagnóstico clínico, permite anticipar el tratamiento antifúngico mejora el pronóstico del paciente.
  • 53. ESTUDIOS MICOLÓGICOS 1- Obtención de la muestra 2- Examen directo 3- Cultivos 4- Identificación de género y especie 5- Estudios complementarios 6- Interpretación e informe de los resultados
  • 54. • Para definir un diagnóstico es necesario que exista correlación entre: - examen directo (es muy importante) - cultivos (es importante si el material es de un órgano estéril) - cuadro clínico. 6- Interpretación e informe de los resultados: • Cuando se aíslan levaduras de una muestra clínica es necesario determinar: - si está colonizando - si está causando infección • Para ello se adoptan distintos criterios dependiendo de: - hongo involucrado - tipo de muestra - características del paciente
  • 55.  Candidiasis cutánea, Candidiasis vaginal, Candidiasis orofaríngea, Candidiasis esofágica, Candidiasis mucocutánea crónica: Criterios a seguir para el diagnóstico de:  ED (+) y Cultivo (+) INFECCIÓN  ED (-) y Cultivo (+) COLONIZACIÓN -Examen directo positivo (levaduras y/o pseudomicelio) y -Cultivo positivo para levaduras con una lesión y signos clínicos compatibles.
  • 56. • Candidemia (paciente neutropénico): - Hemocultivo positivo (con retrocultivo negativo). • Candidiasis profunda localizada: - Biopsia de un órgano con examen directo y/o cultivo positivo; • Candidiasis sistémica: - Hemocultivo positivo/orina por punción suprapúbica (directo y/o cultivo positivo) + Biopsia con examen directo y/o cultivo positivo; No se considera como criterio diagnóstico de Candidiasis sistémica un examen directo (+) y/o cultivo (+) para levaduras de catéter, retrocultivo, orina por sonda o chorro medio, heces, BAL u otras muestras provenientes de sitios no estériles.  EN CANDIDIASIS INVASIVA: Criterios a seguir para el diagnóstico de: