Microbiología básica y mecanismos de resistencia bacteriana
1. Microbiología básica y
Mecanismos de
Resistencia
Bacteriana
María Alejandra
Angie Paola Rosero
Roland David Montoya Gómez
Monica Alejandra Valencia Ruano
2. ¿ QUÉ ES UNA INFECCIÓN ?
• Invasión del organismo por agentes
bacterianos que ocasiona cambios locales y/o
sistémicos
3. COMO SE ADQUIERE LA INFECCIÓN?
El proceso de infectarse implica tres
pasos bien definidos:
• Contacto: Interacción permanente
del organismo con el medio
• Colonización: “instalación” de los
gérmenes en el organismo.
• Invasión: El germen rompe las
barreras de defensa del organismo,
provocando la infección.
4. ¿Como se llega
a la infección ?
Inóculo entre 10 4 y 10 5 UFC.
La primera propuesta tratar de evitar la
colonización.
La estructura epitelial
La tercera barrera está compuesta por el
sistema inmunológico.
5. FACTORES QUE FAVORECEN LA
INFECCIÓN EN LOS PACIENTES
CRÍTICOS
Ambientales: es un proveedor permanente de
agentes infectantes. En UCI este factor puede ser
una gran amenaza , no olvidar vector humano (
lavado de manos )
F. Germen: La capacidad de crecimiento depende de
la magnitud del inóculo que puede ser variable
según las condiciones que rodeen al germen
F. Hospedero:
• Si se rompe la barrera epitelial
• Uso frecuente de antiácidos
• Los catéteres intravasculares, sondas vesicales,
heridas quirurgicas.
• Se debe considerar la disminución general de la
defensa inmunológica
7. Definiciones Microbiológicas
Patógeno: Cualquier microorganismo
capaz de producir enfermedad.
Colonización: Presencia de un
germen en un hospedero, sin
respuesta inmune.
Infección: Presencia anormal de
microorganismos dentro de un
hospedero que desencadena una
respuesta inmune
8. Definiciones Microbiológicas
Virulencia: Rasgos genéticos que
permiten al germen establecerse en su
hospedero y causar respuesta
Período de Incubación: Tiempo entre el
ingreso de un microorganismo y la
aparición de signos y síntomas.
Reservorio: Organismos asintomáticos
portadores de microorganis- mos
causantes de enfermedad que pueden
mantenerlos y transmitirlos.
9. Bacterias
Agentes microscópicos
tienen una clasificación
como organismos celulares
o no celulares
Los virus a pesar de tener
material no poseen la
organización celular
Los organismos celulares se
van a dividir en Eucariotas y
Procariotas
10. Formas
La forma de las
bacterias está
determinada por su
pared
constituida por la
membrana celular y la
capa de peptidoglicanos
Esta última es un fuerte
armazón constituido
por Mureína
Clasificación Según
Tinción de Gram: Que
las separa en bacterias
Gram positivas y Gram
negativas
11. • Bacterias que se tiñen de morado
• presenta membrana y pared celular
Gram positivos
• tienen una capa de peptidoglucanos más
delgada
• su envoltura está compuesta por 3 capas
Gram negativos
12. Las bacterias sintetizan activamente
su pared durante la replicación que
consiste en 3 etapas
1. Formación de precursores
2. Polimerización de precursores
3. Transpeptidación y terminación del
enlace cruzado
13.
14. proteínas fijadoras de
penicilina encargadas
de dirigir etapas de
transpeptidación y
glicosilación
existen 2 tipos: las de
alto peso molecular y
las de bajo peso
molecular
penicilina se une a
proteínas luego de
traspasar la capa de
peptidoglucano en
gram positivos
o la membrana celular
externa y la capa de
peptidoglucanos en
gram negativos
para atravesar la pared
de las gram negativas el
antibiótico
generalmente utiliza
porinas
Gérmenes sin pared
celular:
Microorganismos no
poseen pared célula
15. Trucos a la Interpretación
cocos gram positivos
ESTREPTOCOCOS
• Se clasifican según la hemolisis en medios de cultivo:
• Alfa hemolíticos: hemolisis parcia
• Beta hemolíticos: hemolisis total.
• Se presentan tres grupos
• Grupo A: S. pyogenes
• Grupo B: S. agalactiae
• Grupo D: Enterococcus (son una familia distinta) y no
Enterococcus: S. bovis
16. ESTAFILOCOCOS
Es evidente su
formación en racimo
Tienen catalasa.
Uno de los pasos
iniciales en su
identificación es la
prueba de coagulasa
Coagulasa positivo,
la mayoría
corresponden a S.
aureus
Coagulasa negativa
principalmente son
S. epidermidis.
17. BACILOS GRAM (-) FERMENTADORES
DE LACTOSA
• En general son las Enterobacterias y en los
medios selectivos para Gram negativos
como MacConkey se utiliza un colorante
rojo neutral.
• características especiales que pueden
ayudar a un clínico:
1. Si las colonias son de rojo intenso :
Serratia
2. Si las colonias son cremosas (babosas):
Klebsiella
3. Si son uniformes de mediano tamaño: E.
coli.
18. BACILOS GRAM(-) NO
FERMENTADORES DE LACTOSA
En estos gérmenes es de vital importancia su rápida
identificación. Sirve usar una nemotecnia:
Pseudomonas
Acinetobacter
Burkholderia
Eikenella
Stenotrophomonas
Alcaligenes
Roseomonas
19. Flora normal
La flora normal es el conjunto de microorganismos que se
encuentran frecuentemente en el cuerpo de una persona sana
y normal. La aniquilación total o parcial de estos
microrganismos puede ser el determinante para generar
infecciones, por colonización de otras especies no residentes
20.
21. Microbiota del tracto digestivo
Verde = <10%; Rosa = 10-25%; Violeta = 25-75%; Azul = 100%
22. Hongos
Se han dividido los hongos según su
morfología
en levaduras y micelios.
Algunos hongos tienen la capacidad de
presentar dimorfismo, es decir presentarse
como
levaduras o micelios dependiendo
de las condiciones ambientales,
especialmente la temperatura.
23. Levaduras
Se refiere al crecimiento unicelular. Muchas
levaduras se reproducen por gemación y
algunas pocas lo hacen por división binaria.
Mohos o micelios
Colonias multicelulares cilíndricos
ramificados que se denominan hifas. Estas
continúan su crecimiento con una forma
de ramificación constante y característico.
Hongos dimórficos
Algunas especies de hongos tienen la
capacidad de crecer como levadura a
temperatura cercana a la corporal y como
moho a temperaturas por debajo de los 30ºC.
24. Identificación de los hongos
La identificación de la mayoría de
los hongos de importancia médica
se basa en las características
morfológicas del cultivo y algunas
pruebas bioquímicas.
25. Perlas en el diagnostico
•Un resultado negativo de
una prueba rápida no descarta
el diagnóstico de infección micótica
•Hay falsos positivos que
dependen de la experiencia
del examinador
•Los aspectos morfológicos
con una tinción rápida permiten
diferenciar entre levaduras y mohos
•Los cultivos son más sensibles,
así́que si el material es escaso, éste
es el procedimiento de elección
•M. furfur y ciertas especies de Candida,
especialmente C. parapsilopsis se asocian a
infecciones relacionadas con lo catéteres de
nutrición parenteral.
•En un paciente con diabetes y
acidosis severa considere
cigomicosis
•En un paciente neutropénico
considere aspergilosis invasiva o cigomicosis
26. Resistencia Bacteriana
Capacidad que tienen las
bacterias de soportar los efectos
de los antibióticos
Intrínseca
Fenómeno que se desarrolla de
forma natural en ausencia de
mecanismos de presión de
selección antimicrobiana
Adquirida
Dos puntos de vista uno
bioquímico y otro genético
Bioquímico
27. Punto de Vista Genético
Resistencia adquirida
puede ser un
fenómeno temporal
Forma permanente en
mutaciones o
adquisición de material
genético extrínseco
Los agentes
antimicrobianos no
generan mutaciones
por si solos
28. Mecanismos de Transmisión de la Resistencia
Cromosomal: Al ocurrir la división celular la célula madre
transmite la resistencia a sus células hijas
Plásmidos: El plásmido puede auto replicarse y
transmitirse a otra bacteria o transferir el gen de
resistencia al cromosoma de otra bacteria
Transposón: Este es un material genético móvil que
puede transferirse a un plásmido, cromosoma, o
permanecer libre en el citoplasma de la bacteria
Conjugación: Dos bacterias pueden intercambiar su
material genético a través de los plásmidos o de su
cromosoma
29. 1.DISMINUCIÓN DE LA CAPTACIÓN DELANTIBIÓTICO
bacterias Gram- no van a permitir
el paso de moléculas hidrofobicas
ingresan -- porinas -- actúan como canales entre
la membrana celular y el espacio periplásmico
eritromicina o la
oxacilina
presencia en la membrana
plasmática externa de
lipopolisacáridos
Principales mecanismos de Resistencia Antimicrobiana
30. REMOCION DEL MEDICAMENTO DE LA
CÉLULA
Las bacterias operan tomando
el antibiótico del espacio
periplásmico y expulsándolo al
exterior
Existen bombas eflujo las cuales
se consideran como un principal
mecanismo de resistencia
intrínseco de las bacterias
Afecta:
• Betalactámicos
• Quinolonas
• Tetraciclinas
• Cloranfenicol
Gram negativos: tres proteínas
1. Alto peso molecular asociada a
membrana citoplasmática.
2. Función de fusión ambas membranas.
3. Porina asociada a membrana externa.
31. La producción de estos
transportadores explica el
desarrollo de altos niveles de
resistencia
Bombas de expulsión para
MACROLIDOS Y LINCOSAMIDAS
Las cuales hacen resistentes a
Streptococo pneumonie
Gram – como E. coli transportador
CmlA es resistente a TETRACICLINA,
ERITROMICINA algunas
FLUOROQUINOLONAS y al
CLORANFENICOL.
32. Inactivación o destrucción del agente antimicrobiano
mediante actividad enzimática
Mecanismos enzimáticos más frecuentemente desarrollados en
los gram negativos y algunos gram positivos
Máximo exponente las B-lactamasas
Gram Negativas
B-lactamasas en el espacio periplásmico, entre la pared
celular y la membrana exterior
Gram positivas
Carecen de membrana exterior las B-lactamasas son excretadas
al medio exterior
33. BLEE
Enzimas de
configuración
plasmídica producidas
por entero bacterias
Hidrolizan los
antibióticos B-
lactámicos
K. pneumoniae, E. Coli,
Proteus, Serratia,
Enterobacter o
Salmonella
Se pueden adquirir por
• Transferencia de
plásmidos
• Transferencia de genes de
resistencia mediada por
cromosomas
• Mutaciones espontaneas
• Selección de gérmenes
resistentes favorecida por
el uso de medicamentos
de amplio espectro
34. perdida de la afinidad --- la
destrucción del microorganismo
La mutación se puede dar a nivel de los
ribosomas
La resistencia del s. aureus y s.pneumoniae se da por medio de la modificación en la enzima blanco, la presencia
del gen MecA codifica para una PBP modificada que no tiene afinidad para b-lactamicos.
4.ALTERACION DEL SITIO DIANA
35. COMO EVALUAR E INTERPRETAR LA
RESISTENCIA BACTERIANA
• Susceptibilidad la cual se basa en la capacidad de
detectar la CIM lo que nos lleva a la conclusión de que un
germen es sensible o resistente para esto se utiliza tres
técnicas:
Difusión en Disco: Discos impregnados
de antibiótico en un medio de cultivo
con microrganismos aislados, evalúa la
inhibición del crecimiento después de
18-24 horas de incubación.
36. • Difusión en gradiente: Se utiliza una tira
con un gradiente de concentración del
antibiótico, la ventaja de esta es que puede
determinarnos con mayor exactitud la CIM
para cada bacteria.
Microdilucion en caldo: Consiste en colocar
varias concentraciones del antibiótico en un
medio liquido con un inoculo estandarizado de
la bacteria aislada del paciente. La
concentración más baja en la que se inhibe el
crecimiento de la bacteria se considera la CIM.
37. Bibliografía
• Gómez D, A., Alvarez M, C. A., & León, A. (2004). Enfermedades Infecciosas en UCI.
Una aproximación basada en la evidencia. Bogotá, Colombia: Editorial Distribuna.
• Murray, P. R., Rosenthal, K. S., & Pfaller, M. A. (2014). Microbiología Médica (7.a ed.).
Barcelona, España: Elsevier.