El documento describe los diferentes tipos de microscopios, incluyendo microscopios ópticos, electrónicos, de fluorescencia y otros. Explica que la microscopía permite observar objetos demasiado pequeños para ver a simple vista y que los microscopios están formados por lentes y sistemas de iluminación que producen imágenes aumentadas.
Van Young, Eric. - La otra rebelión. La lucha por la independencia de México,...
Guía completa sobre microscopía
1.
2. ¿QUÉ ES LA MICROSCOPÍA?
Se ha definido a la microscopía como la técnica
que permite observar objetos con un
microscopio (simple o compuesto) y obtener
una imagen aumentada de ello.
Una de las finalidades de la microscopia es
permitir observar los especímenes de la
mejor manera posible, logrando un buen
balance entre el contraste y la resolución.
3. ¿QUÉ ES UN MICROSCOPIO?
El microscopio es un instrumento que permite
observar objetos que son demasiados
pequeños para apreciar a simple vista.
Existen diversas clases de microscopios, según
la conformación, la naturaleza de los
sistemas de luz y otros elementos utilizados
para obtener las imágenes.
5. TIPOS DE
MICROSCOPIOS
El microscopio óptico:
puede ser monocular, binocular, trinocular
(para microfotografía). En los microscopios
binoculares la observación se hace con los
dos ojos y esto permite una observación
más cómoda y se percibe una mayor nitidez
de los detalles en la imagen.
6. Microscopio electrónico:
*De transmición: se utilizan electrones en lugar de rayos de
luz, y la función de las lentes la realizan electromagnetos,
operándose al vacío.Tiene alta resolución, pero los haces
electrolitos poseen bajo poder de penetración por eso se
utilizan técnicas de cortes ultrafinos. Para aumentar el
contraste se preparan las muestras con compuestos como el
ácido ósmico, permanganato, uranio, lantano o plomo
porque desvían adecuadamente los electrones.
*De barrido: la muestra se recubre con una fina capa de un
metal pesado, como el oro. el haz de electrones barre la
superficie de la muestra, los electrones desviados por la capa
de metal son recogidos y proyectados sobre una pantalla
para producir una imágen.
"Todos los microscopios electrónicos incorporan cámaras que
permiten fotografiar las muestras".
7. DENTRO DE LOS CUALES SE
DESCRIBEN
Microscopios fotónicos especiales:
Ciertos especímenes, principalmente las células vivas o
muestras no coloreadas, al ser observados en el
microscopio común de campo claro, muestran un muy
pobre contraste de sus estructuras y no aportan datos
relevantes. Para ello se han creado microscopios con
ciertas particularidades que permiten la observación de
ese tipo de especímenes con un incremento muy
satisfactorio del contraste. Entre ellos se citan:
Microscopio de campo oscuro.
Microscopio de contraste de fases.
Microscopios interferenciales.
Microscopio de fluorescencia.
8. Microscopio de campo oscuro.
los especímenes observados al microscopio de campo
oscuro se ven blancos y brillantes sobre un fondo oscuro
(negro).
La iluminación de campo oscuro se puede realizar tanto
mediante luz transmitida (trans-iluminación) como con luz
incidente (epi-iluminación)
9. Microscopio de contraste de
fases.
Al crear interferencias en la luz empleada para iluminar el
espécimen se creaban condiciones que producían un
incremento del contraste.
Con esta técnica de iluminación se aumenta el contraste de
manera notoria entre las partes claras y oscuras de las células
transparentes.
10. Microscopio Interferenciales
Microscopio sofisticado de contraste en trans-iluminación,
ideal para visualizar especímenes no coloreados y
transparentes.
Permite obtener información sobre la densidad óptica de la
muestra y observar detalles que de ordinario son invisibles.
Los objetos se ven oscuros o claros en un fondo gris, de
manera semejante a las imágenes del microscopio de
contraste de fases, pero sin halos de difracción.
11. Microscopio de fluorescencia.
Una sustancia neutral en las células o un colorante fluorescente aplicado al corte es
estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía absorbida como rayas
luminosas: esto se conoce como fluorescencia
La molécula fluorescente, aún cuando sea muy pequeña, puede ser observada
debido a la luz que emite
Los filtros empleados son útiles por ejemplo, cuando se emplea la fluoresceína, el
espécimen se ilumina con una luz azul monocromática pura y filtrada. Para
visualizarlo se emplea otro filtro el cual es completamente opaco a la luz azul pero
deja pasar la luz verde (o amarilla y roja emitidas por otros fluorocromos). Las
estructuras celulares marcadas mediante inmunofluorescencia aparecen iluminadas
de verde contrastando con un fondo negro
12. TÉCNICAS ESPECIALES DE
MICROSCOPÍA
El interés de observar células vivas radica en la
posibilidad de captar procesos vitales en pleno
desarrollo, tales como la motilidad, la división, la
fagocitosis y muchos otros, Desafortunadamente,
con los microscopios compuestos de campo claro
ordinarios, no se puede lograr un buen contraste de
células vivas no coloreadas. Sin embargo, Estas
particularidades han motivado a los investigadores a
buscar métodos para incrementar el contraste con la
finalidad de obtener imágenes de células vivas con
más detalles.
En este sentido, las limitaciones presentadas por los
microscopios compuestos ordinarios han sido
superadas mediante el diseño y fabricación de
microscopios particulares o de accesorios especiales
13. Se han diseñado técnicas complejas que incrementan el
contraste sin afectar la resolución. Son artificios que
proporcionan efectos ópticos en la muestra, permitiendo que
detalles que pasan desapercibidos se traduzcan en cambios de
intensidades luminosas las cuales si pueden ser reconocidas
por el ojo humano. Los principios básicos de estas técnicas
especiales de microscopía se basan en:
• La modificación de la manera como incide la luz sobre el
espécimen: Empleo de condensadores y filtros:
- Microscopio de campo oscuro.
- Microscopio de contraste de fase.
- Microscopio de luz polarizada, Microscopio petrográfico y
metalúrgico.
- Contraste por interferencia diferencial (Differential
Interference Contrast) Nomarski.
• La modificación de la fuente emisora de luz: Cambiando la
luz blanca por luz ultravioleta o rayos láser:
- Microscopio de luz ultravioleta.
- Microscopio de fluorescencia.
- Microscopio confocal