2. TAXONOMIA
La familia Neisseriaceae ahora comprende los
géneros :
Neisseria
Moraxella
Acinetobacter
Kingella
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4. TAXONOMIA
El género de Neisseria pertenece a la familia
Neisseriaceae, que a través del tiempo ha sufrido
muchos cambios taxonómcos. El género de
Neisseriaceae le asignó a la familia Coccaceae
hasta 1.948, cuando se reasignó como género tipo
en la familia Neisseriaceae.
.
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5. Microscopicamente
Son Cocos Gram negativo de 0.6 a 1 um. de diámetro en
pares , con los lados adyacentes, aplanados o cóncavos
(diplococos).
Cada coco puede tener individualmente, la forma de un riñón
o un grano de café. El meningococo puede estar
intracelularmente dentro de los polimorfonucleares o fuera
de ellos, para el Gonococo de Neisser en las infecciones
agudas, los diplococos se encuentran especialmente
intracelulares rellenando los leucocitos (leucocitos
empedrados) y extracelular en los procesos crónicos.
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6. Identificación en Cultivo
Medios de cultivo:
Agar Thayer-Martin
Agar Thayer-Martin modificado
Agar chocolate + incubación + CO2
Las Neisseria son bacterias frágiles, de
crecimiento lento y con requerimientos
nutricionales muy estrictos. Requieren
glutamina, hierro, almidón, colesterol o
albúmina. El cultivo se incuba a 35º C
en una atmósfera de 3-5% de CO2
húmeda, durante 72 horas.
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7. Identificación en Cultivo
Tipos de colonias
N. gonorrhoeae.- 1 a 5 mm de diámetro en 48 horas. Las
colonias son lisas, transparentes u opacas , no pigmentadas
y no hemolíticas.
N. meningitidis.- Forma colonias no pigmentadas, lisas,
traslúcidas, se emulsionan fácilmente y son capsuladas.
N. flavescens.- Tiene colonias con pigmento amarillo, poco
húmedas y transparentes.
N. lactamica.- Amarillentas, lisas, translúcidas.
N. subflava.- Forma colonias que producen pigmento
amarillo, grisáceo, duras, opacas, arrugadas.
N. sicca.- Forma colonias opacas, rugosas.
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8. PRUEBA DE LA OXIDASA- IDENTIFICACION PRESUNTIVA
Las colonias de diplococos obtenidos en el cultivo debe ser
sometido a la Prueba de la Oxidasa para tener un diagnóstico
presuntivo del género.
Se fundamenta en la propiedad que tienen las Neisserias y
Moraxellas y otras bacterias de producir enzima (Oxidasa) oxidante,
que en presencia del aire actúan sobre ciertas aminas aromáticas
produciendo compuestos coloreados. El reactivo utilizado es el
Clorhidrato de dimetilo tetrametilo-parafenilendiamina en solución
al 0,5 - 1 %.
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9. TECNICA
- Se coloca unas cuantas gotas sobre un trozo
de papel filtro.
Se toma una porción de colonias con el asa de
inoculación y se frota el crecimiento con el asa
impregnada de papel filtro, o también aplicar
una gota del reactivo con la pipeta Pasteur,
directamente sobre las colonias sospechosas.
- Esperar de 10 a 30 segundos.
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10. INTERPRETACION DE RESULTADOS.
Por acción de la oxidación se produce un cambio
del color del reactivo, de incoloro a púrpura obscuro
en la reacción positiva rápida que es característica
de las especies de este género.
Se debe efectuar tinción de Gram a las colonias
Oxidasa Positiva para comprobar la existencia de
Diplococos Gram Negativos.
Para realizar la identificación confirmativa se
efectúa la Prueba de Degradación de los azúcares.
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11. Neisseria gonorrhoeae
Factores de Patogenicidad
Pili o fimbrias : Se adhieren a las células
epiteliales seguida por la fagocitosis y el
transporte de los gonococos en vacuolas al tejido
subepitelial.
Proteína II : Permite adherencia de gonococos en
las colonias y a las células hospederas. Provee la
capacidad de adaptarse a un ambiente que
experimenta cambios cíclicos.
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12. Fisiopatología Comienza en el epitelio cilíndrico de la uretra, conductos y
glándulas periuretrales, mucosa cervical, conjuntival, faríngea y
rectal.
En menos de 1 hora las bacterias se fijan. Al tercer día penetra al
tejido conectivo subepitelial. Se da una respuesta inflamatoria,
se secreta un exudado de pus que produce quistes de retención
y abscesos submucosos.
Se desordena el tejido conectivo colágeno y destruye las células
epiteliales desapareciendo el revestimiento mucoso facilitando la
penetración de otros gonococos y también de la flora saprófita.
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13.
14. PROCEDIMIENTO.
-Se produce el inóculo (Crecimiento bacteriano solución
fisiológica) en profundidad hasta el tercio medio, utilizando la
pipeta Pasteur, en los tubos de ensayo con (C.T.A.).
-Con una pinza estéril introducir en cada tubo un disco
conteniendo los Hidratos de Carbono respectivamente:
(.GLUCOSA,MALTOSA,SACAROSA,LACTOSA Y FRUCTUOSA)
-Incubar a 18 horas a 37°C en atmósfera de CO2y leer.
INTERPRETACION DE RESULTADOS.
Las reacciones son generalmente muy pronunciadas después de las 4
horas. Una coloración amarilla del medio de cultivo, indica Positividad
de la reacción como consecuencia de la acidificación del Carbohidrato.
Las reacciones Negativas están indicadas por una reacción alcalina (roja)
o una reacción Neutra (anaranjada). Las reacciones pueden observarse
en el siguiente cuadro:
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20. Toma De Muestra
En caso de sospechar
infección gonocócica:
Mujer: endocérvix.
Hombre: secreción
purulenta.
En caso de sospechar infección
meningocócica:
Líquido cefalorraquídeo o sangre.
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21. Identificación: Examen Microscópico
Forma: Diplococos
arriñonados o en grano de
café intraleucocitarios.
Color: Rojo (Gram -).
Diámetro: 0.6 - 1µm
Cápsula:Pueden presentar
excepto gonococo.
Motilidad: Negativo
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22. Neisseria meningitidis:
Este germen causa principalmente
meningitis, meningococcemia y
más raramente otros cuadros
clínicos.
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23. Neisseria meningitidis o Meningococo
Morfología
Cápsula de polisacáridos.
Metabolismo
Marcado tropismo por las meninges.
Estructura Antigénica
Meningitis piógena
Una gruesa capa de
exudado purulento
cubre el tronco
encefálico y el cerebelo.
Antígenos polisacáridos capsulares:
13 serotipos. A, B, C, W135, Y y 29 E
son los responsables de la
enfermedad.
•Antígenos proteínicos de membrana
externa: 5 clases (1-5). 2 o 3 están en
todas las cepas y son análogas a la
proteína I del gonococo.
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25. Transmisiónde del Genero Moraxella
Puerta de entrada: nasofaringe y orofaringe.
40% de las personas sufren colonización asintomática
que crea portadores nasofaríngeos (reservorio de la
infección) quienes diseminan la enfermedad a
personas susceptibles por inhalación de pequeñas
gotas de secreción infectadas, por contacto oral
directo o indirecto. La epidemia se relaciona con la
aparición de una cepa antigénicamente diferente en
una población.
INCUBACION
El tiempo de incubacion es de 10 meses.
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