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AGAR ENTEROBACTERIA

PRESENTADO POR:
HAROLD ORLANDO DELGADO DELGADO

PRESENTADO A:
ADRIANA PEñA

FUNDACION UNIVERSITARIA DE POPAYAN
ECOLOGIA
POPAYAN
2014

Encontrado en http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm
E.M.B. Agar.
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo
de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias
nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae.
Fundamento
Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para
obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y
otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos
capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de
hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un
efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de
Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las
cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada,
mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento
de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad
permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en
este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que
Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul
lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a
partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a
sus membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de
especies de Salmonella y Shigella.
Fórmula (en gramos por litro)
Peptona
10.0
Lactosa
5.0
Sacarosa
5.0
Fosfato dipotásico
2.0
Agar
13.5
Eosina
0.4
Azul de metileno

Instrucciones
Suspender 36 g del polvo en un
litro de agua destilada. Reposar
5 minutos; mezclar, calentando
a ebullición durante 1 o 2
minutos hasta su disolución.
Esterilizar en autoclave a no
más de 121°C durante 15
0.065 minutos. Enfriar a 45°C y
distribuir agitando suavemente.
pH final: 7.2 ± 0.2

Siembra
En superficie, por estriado a partir de un inóculo poco denso, para obtener
colonias aisladas.
En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
Incubación
De 24 a 48 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.

Encontrado en http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm
Resultados
Microorganismos
Escherichia coli ATCC 25922
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Proteus mirabilis ATCC 43071
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Shigella flexneri ATCC 12022
Salmonella typhimurium ATCC 14028

Tipo de Colonia
Verdosas con brillo metálico y centro
negro azulado
Mucosas, rosa púrpura, confluentes
Incoloras
Incoloras, pequeñas, puntiformes
Incoloras
Incoloras

Características del medio:
Placas preparadas: color púrpura.
La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de metileno al color naranja. El
color púrpura se restaura por agitación. La presencia de un precipitado en el
medio esterilizado es normal y no debe ser removido, ya que es parte esencial del
mismo.
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
Presentación
x 100g :Código: B02-101- x 500g :Código: B02-10105
06

6 x 50 ml: B04-101-84

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Agar enterobacteria

  • 1. AGAR ENTEROBACTERIA PRESENTADO POR: HAROLD ORLANDO DELGADO DELGADO PRESENTADO A: ADRIANA PEñA FUNDACION UNIVERSITARIA DE POPAYAN ECOLOGIA POPAYAN 2014 Encontrado en http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm
  • 2. E.M.B. Agar. Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae. Fundamento Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella. Fórmula (en gramos por litro) Peptona 10.0 Lactosa 5.0 Sacarosa 5.0 Fosfato dipotásico 2.0 Agar 13.5 Eosina 0.4 Azul de metileno Instrucciones Suspender 36 g del polvo en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos; mezclar, calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos hasta su disolución. Esterilizar en autoclave a no más de 121°C durante 15 0.065 minutos. Enfriar a 45°C y distribuir agitando suavemente. pH final: 7.2 ± 0.2 Siembra En superficie, por estriado a partir de un inóculo poco denso, para obtener colonias aisladas. En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas. Incubación De 24 a 48 horas a 35-37 °C, en aerobiosis. Encontrado en http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm
  • 3. Resultados Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Proteus mirabilis ATCC 43071 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Shigella flexneri ATCC 12022 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Tipo de Colonia Verdosas con brillo metálico y centro negro azulado Mucosas, rosa púrpura, confluentes Incoloras Incoloras, pequeñas, puntiformes Incoloras Incoloras Características del medio: Placas preparadas: color púrpura. La esterilización del medio de cultivo reduce el azul de metileno al color naranja. El color púrpura se restaura por agitación. La presencia de un precipitado en el medio esterilizado es normal y no debe ser removido, ya que es parte esencial del mismo. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 ºC. Medio preparado: a 2-8 ºC. Presentación x 100g :Código: B02-101- x 500g :Código: B02-10105 06 6 x 50 ml: B04-101-84 Encontrado en http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm