n medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, que cuenta con el pH y la temperatura adecuada para permitir el crecimiento y desarrollo de microorganismos células y tejidos vegetales, los medios de cultivos pueden presentarse en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, ya preparados pueden encontrarse en estado sólido semisólido o líquido.
Una forma de para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.
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Preparación de medios de cultivo en el laboratorio de microbiología
1. UNIVERSISDAD ESTATAL
AMAZONICA
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA #1
INTEGRANTES: Fernando Miranda, Magaly Quispe, Carlos Ashqui, Williams Brito,
Grace Ramírez
DOCENTE: Ing. Sandra Soria Re
NIVEL: 3ro “A”
TEMA: Preparación de medios de cultivo
INTRODUCCION.
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, que cuenta con el pH y la temperatura
adecuada para permitir el crecimiento y desarrollo de microorganismos células y tejidos
vegetales, los medios de cultivos pueden presentarse en forma de polvo fino o granular
antes de ser preparados, ya preparados pueden encontrarse en estado sólido semisólido o
líquido.
Una forma de para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en
sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.
OBJETIVOS:
● Crear un medio de cultivo en el que puedan desarrollarse diferentes
microorganismos, como hongos bacterias y virus.
● Reconocer los diferentes agar que existen para la elaboración de medios de cultivos
en el laboratorio
MATERIALES Y REACTIVOS:
Materiales Reactivo
Vaso de precipitación Magneto
PHmetro-Autoclave Agua
Caja Petri pHmetro
Lámpara de alcohol, algodón, agua
destilada, Agar para coliformes
Agar para coliformes, APD
METODOLOGIA:
2. 1. Realizar los cálculos de 125ml de medio APD por grupo.
2. Pesar el medio en polvo.
3. Agitarlo con cantidad suficiente de agua destilada (inferior a los 100ml).
4. Ajustar el pH a 6.5.
5. Agregar el agar y agitar.
6. Autoclavar el medio.
7. Dispensar 20 ml en cada caja Petri.
CUESTIONARIO
1. Porque un medio de cultivo que contiene agar se lo denomina semisólido.
Por qué se encuentra en un estado coloidal lo que quiere decir que si la preparación
se encuentra semisólida está en buen estado y si se encuentra en forma líquida está
dañado.
2. Porque un medio de cultivo APD se lo llama medio de cultivo general.
El agar de patata y dextrosa es el medio más utilizado para el crecimiento de
hongos y levaduras que atacan a las plantas vivas o materia vegetal muerta en
descomposición, por su riqueza en azufre, carbono ,hidrogeno, fosforo, potasio el
cual es muy importante en el crecimiento bacterias .
3. Cuáles son las principales diferencias entre el medio de los dos medios de
cultivos utilizados en el laboratorio de microbiología para uso rutinario.
AGAR PAPA DEXTROSA AGAR PARA COLIFÓRMES
Se la utiliza para el crecimiento de
hongos y levaduras.
Se la utiliza para el crecimiento de
bacterias.
Permite el estudio de
microorganismos que atacan a las
plantas vivas o materia vegetal
muerta en descomposición.
Permite el estudio de
microorganismos causantes
enfermedades son transmitidas por
vía fecal-oral utilizando como
vehículo los alimentos y el agua
Algunos procedimientos señalan
bajar el pH del medio a 3.5 ± 0.1
Su pH óptimo de crecimiento es
de7.0 a 7.5 con un pH mínimo de
crecimiento de valor de 4.0 y un pH
máximo de crecimiento de valor de
8.5
4. Consulte la receta del medio de cultivo APD para prepararlos sin disponer del
medio en polvo.
PAPA: 200 gramos.
3. DEXTROSA: 10 gramos.
AGAR - AGAR: 15-18 gramos.
EXTRACTO DE CARNE: 5 gramos.
AGUA DESTILADA: 1000 ml/ 1lt.
Proporciones para preparado de 1 litro de medio del cultivo
PAPA:����� →������ �� ���
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�=��� ������.
DEXTROSA:
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AGAR - AGAR:
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EXTARCTO DE CARNE:
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PREPARADO DEL MEDIO DE CULTIVO
PDA (AGAR PAPA DEXTROSA).
PROCEDIMIENTO
1. proporciones para preparado de 115 ml.
PAPA:����� →������ �� ���
� →����� �� ��� �=�� ������.
DEXTROSA:
���� →������ �� ��� � →����� �� ��� �=�.��������.
AGAR
���� →������ �� ��� � →����� �� ��� �=�.��� ������.
EXTARCTO DE CARNE:
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Lavado, pelado y picado de papa.
Pesado de sustancias.
4. Medir agua destilada.
Homogenizar el agua más la papa.
Hervir durante 30 minutos.
Colar con gaza o tamiz.
Homogenizar la solución de papa más otros componentes químicos, hasta disolver
las partículas.
Trasvasar: se transfiere del matraz a la botella antes que se enfrié el medio.
Acondicionar.
5. Describa la preparación de un medio de cultivo para microbiología diferente a
los empleados en el laboratorio
PURPLE LACTOSE AGAR (Agar lactosa púrpura)
Fundamento
El Azul de Bromotimol cambia de color por la fermentación ácida de la Lactosa. La
Cistina favorece el crecimiento de las Enterobacteriáceas y el bajo contenido en
electrolitos reduce la difusión de Proteus. Las peptonas, el extracto de carne y la
Lactosa constituyen los elementos nutrientes del medio.
Fórmula (por litro)
Azul de Bromotimol................................ 0,02 g
L-Cistina................................................. 0,128 g
Extracto de Carne.................................. 3,0 g
Lactosa.................................................. 10,0 g
Peptona de Caseína............................... 4,0 g
Peptona de Gelatina............................... 4,0 g
Agar........................................................ 15,0 g
pH final: 7,3 ±0,2
Preparación
Suspender 36,1 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullición y hervir
durante 1 minuto. Esterilizar a 121ºC durante 15 minutos. Homogeneizar y distribuir en
placas de Petriestériles.
Modo de empleo
Sembrar por estría en la superficie del medio. Incubar a 37ºC de 18 a 24 horas.
Control físico-químico
Aspecto: polvo fino.
Color: beige verdoso.
Solubilidad: total.
pH: 7,3 ±0,2
Control microbiológico
Los siguientes resultados fueron obtenidos a partir de cepas patrón, después de
incubación a temperatura de 37ºC y observados a las 24 horas.
6. OBSERVACIONES
● El agar se fue vaciando de poco a poco para evitar los grumos nuevamente, luego
se agito para que se disolviera completamente el agar y comenzó a tomar un color
café desde que fue colocada en el vaso de precipitación.
● El agar se colocó en una parrilla eléctrica la cual se encendió y se dejó durante 10
minutos y se observó un cambio de coloración y con un aroma de descomposición.
● En el autoclave para la esterilización del medio de cultivo a una temperatura de 121
°C durante 15 minutos después de concluir se observó la salida del vapor de agua
para evitar quemaduras en la piel y aumento el aroma del medio.
● Observamos la colocación del medio de cultivo en las cajas Petri para el reposo del
mismo, el cual debe estar libre de agentes biológicos para luego proceder a la
colocación de los microorganismos.
CONCLUCIONES
● Mediante el desarrollo de esta práctica definimos, estudiamos y aplicamos los
procedimientos que se deben realizara para la elaboración de un medio de cultivo,
por otro lado conocimos y utilizamos los diferentes instrumentos para la
preparación del agar en condiciones óptimas de seguridad.
● Los diferentes agares que existen y las diferentes formas de preparación.
Bibliografía
http://es.slideshare.net/WARAUYA20/medios-de-cultivos-metodologa-y-usos?from_action=save.
https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_papa_dextrosa.