cocos gram negativos

1. COCOS GRAM
NEGATIVOS
MSc: Jans Velarde Negrete
Neisseria
Moraxella

2. Taxonomía
Familia Neisseriaceae:
Neisseria: (N. meningitidis y N.
gonorrhoeae)
Eikenella
Kingella
Simonsiella
Alysiella

3. GENERO: Neisseria
El genero Neisseria engloba 29 especies, dos de las cuales, son patogenas estrictas
en el ser humano.
Las demás especies están presentes de forma frecuente en las superficies mucosas de la
orofaringe y la nasofaringe, yen algunos casos colonizan las membranas mucosas
anogenitales. Las enfermedades causadas por N. gonorrhoeae y N. meningitidis son bien
conocidas y las restantes especies de Neisseria tienen escasa virulencia y generalmente
producen infecciones oportunistas

4. Neisserias
Son cocos gramnegativos aerobias en pares (diplococos).
de 0.6 – 1 µm de diámetro
Intracelulares, Se encuentra: Dentro de las células polimorfonucleares.
Son patógenos para humanos.
Algunas neisserias son residentes normales del sistema respiratorio humano, pocas
veces en el peor de los casos producen enfermedad y residen fuera de células.

5. Neisserias
El hierro es fundamental para el desarrollo y el
metabolismo de N. gonorrhoeae y N. meningitidis.
Estas neiserias patógenas son capaces de competir
con el hospedador humano por el hierro al unir la
transferrina de la célula del hospedador a ciertos
receptores de la superficie bacteriana.
El principal factor de virulencia para N. meningitidis es la
capsula de polisacarido.
La superficie externa de N. gonorrhoeae no se encuentra
recubierta de una verdadera capsula de carbohidratos; sin
embargo, la superficie celular de N. gonorrhoeae
tiene una carga negativa de tipo capsular.

6. Morfología e identificación
A. Microorganismos típicos
Diplococo gramnegativo, Inmóvil, Forma de riñón.
B. Cultivo
Las colonias son transparentes u opacas, no
pigmentadas y no hemolíticas.
C. Características de crecimiento
Crecen mejor a 35-37 °C en atmosfera humeda
suplementada con CO2
Oxidasa y catalasa-positivos; produccion de acido a
partir de glucosa de forma oxidativa

7. NEISSERIA GONORRHOEAE
Los gonococos oxidan sólo glucosa y tienen antígenos
diferentes a los de otras neisserias.
Producen colonias más pequeñas que las demás neisserias.
Las colonias opacas se relacionan con la presencia de una
proteína expuesta a la superficie, Opa.
Las infecciones por N. gonorrhoeae, sobre todo la
gonorrea,
enfermedad de transmisión sexual, se han conocido
durante
siglos.

8. Estructura antigénica
Neisseria gonorrhoeae

9. Patogenia e inmunidad
Los gonococos se adhieren a las celulas mucosas, penetran en las células y se multiplican, y
posteriormente pasan a traves de ellas al espacio subepitelial, donde se produce la infeccion.
Los pili, las proteinas PorB y Opa intervienen en la fijación y la penetración en las celulas del
hospedador.
El LOS gonocócico estimula la respuesta inflamatoria y la liberación del factor de necrosis
tumoral a (TNF-a), que es el responsable de la mayoría de los síntomas que se asocian a la
enfermedad gonocócica.
IgG3 es el principal anticuerpo que se forma como respuesta a la infección, estos AC.
Reconocen a la pilina, la proteína Opa y LOS.
Los anticuerpos frente a LOS pueden activar el complemento, liberando el componente C5a
del mismo, el cual ejerce un efecto quimioatrayente sobre los neutrofilos.

10. Manifestaciones clínicas
Gonorrea
La infeccion genital en el hombre se restringe
principalmente a la uretra.
Despues de 2 o 5 dias de incubacion aparecen un
exudado uretral purulento y disuria.
Alrededor del 95% de los hombres infectados tienen
sintomas agudos.
Aunque las complicaciones son infrecuentes, pueden
darse epididimitis, prostatitis y abscesos periuretrales.
El principal sitio de infeccion en las mujeres es el
cuello uterino debido a que las bacterias infectan las
celulas del epitelio cilindrico del endocervix.
Secreción uretral purulenta en un hombre
aquejado de uretritis.
Las pacientes sintomaticas experimentan generalmente flujo vaginal, disuria y dolor abdominal.

11. Manifestaciones clínicas
Gonococcemia
Las infecciones diseminadas con septicemia e infecciones
de la piel y de las articulaciones se observan en el 1% al
3% de las mujeres infectadas, y en un porcentaje mucho
menor de los hombres infectados.
Las manifestaciones clinicas de la enfermedad
diseminada son fiebre, artralgias migratorias, artritis
supurativa de las munecas, las rodillas y los tobillos y un
exantema pustular sobre una base eritematosa en las
extremidades, pero no en la cabeza ni en el tronco. N.
gonorrhoeae es una de las causas mas importantes de
artritis supurativa en adultos.
Lesiones cutáneas de la infección
gonocócica diseminada.

12. Manifestaciones clínicas
Otros síndromes producidos por N.
gonorrhoeae
Otras enfermedades que se asocian con N.
gonorrhoeae son la perihepatitis (síndrome de
Fitz-Hugh-Curtis), la conjuntivitis purulenta,
fundamentalmente en los recién nacidos por
via vaginal (ophthalmia neonatorum u oftalmia
gonococica), la gonorrea anorrectal en los
homosexuales y la faringitis.
Oftalmía gonocócica del neonato.

14. Neisseria gonorrhoeae, segunda etiología bacteriana de ITS, en
frecuencia
luego deChlamydia trachomatis
notable morbilidad, alto costo económico.
o vaginales
o anales
o orales
o madre a hijo durante el parto.
Transmisón, relaciones sexuales sin protección:

15. Toma de Muestra
Nota:
• Usar hisopos de
alginato de calcio.
• Algodón pre-
tratados con
Carbon activado

16. Diagnóstico de laboratorio
Microscopia
La tinción de Gram es muy sensible (mas del 90%) y
especifica (98%) para detectar las infecciones gonococicas
en hombres con uretritis purulenta.
Es relativamente insensible en la deteccion de la cervicitis
gonococica tanto en mujeres sintomaticas como
asintomáticas.
Por tanto, la tincion de Gram se puede utilizar para
diagnosticar de forma fiable las infecciones en los
hombres con uretritis purulenta, mientras que todos los
resultados negativos en mujeres y en hombres
asintomaticos se deben confirmar.
Es útil en el diagnostico precoz de la artritis purulenta, pero carece de sensibilidad para la
deteccion en los pacientes con lesiones cutaneas, infecciones anorrectales o faringitis.

17. Diagnóstico de laboratorio
Detección de antígenos
Las pruebas antigenicas para la deteccion de N. gonorrhoeae son menos sensibles
que los cultivos o las pruebas de amplificación de los acidos nucleicos y no se
recomiendan salvo que se realicen como pruebas de confirmacion en muestras
negativas.
Pruebas basadas en los ácidos nucleicos
Se han desarrollado pruebas de amplificacion de los acidos nucleicos (AAN)
especificas de N. gonorrhoeae para la detección directa de la bacteria en las
muestras clinicas.
Las pruebas de este tipo son sensibles, especificas y rapidas (los resultados estan
disponibles en 1 o 2 horas).

18. Cultivo de Neisseria gonorrhoeae.
o Ideal siembra inmediata.
o Caso contrario, conservar no mas de 12 horas en
Stuart – Cary Blair - Amies
o Sembrar en Agar Chocolate suplementado.
o En la mujer obligatorio, medio selectivo y enriquecido
“Thayer Martin”.
o Incubar en tarro con vela y algodón húmedo 48 - 72
hs.
Suplementos vitamínicos:
• Isovitalex.
• Polyvitex.
• Britalex.
Antibióticos:
• Vancomicina.
• Colistina.
• Nistatina.
• Trimetoprima

19. Tratamiento
Tradicionalmente la penicilina ha constituido el antibioticode eleccion en el tratamiento de
la gonorrea; sin embargo, no se utiliza en la actualidad debido a que la concentración del
farmaco necesaria para destruir las celulas ≪susceptibles≫ se ha elevado de manera
gradual y la resistencia manifiesta derivada de la produccion de b-lactamasas (codificadas
en plasmidos) o las modificaciones cromosomicas de las proteínas de union a penicilina y
la permeabilidad de la pared celular son actualmente frecuentes.
Tambien es prevalente la resistencia a tetraciclinas, eritromicina y fluoroquinolonas, como
ciprofloxacino.
Actualmente, los Centros para el Control y la Prevencion se recomiendan el empleo de
ceftriaxona como tratamiento empirico inicial.
Para proteger a los recién nacidos frente a las infecciones gonococicas oculares se emplea de
modo profixalis con nitrato de plata al 1%, y pomadas oculares con 1% de tetraciclina o 0,5% de
eritromicina.

20. Prevención y control
La gonorrea se transmite exclusivamente mediante el contacto sexual, a menudo
por mujeres y varones con infecciones asintomáticas.
La tasa de infección se puede reducir evitando parejas sexuales múltiples,
erradicando con rapidez los gonococos en individuos infectados por medio del
diagnóstico y tratamiento oportunos y el descubrimiento de casos y contactos a
través de educación y detección en las poblaciones con alto riesgo.
La profilaxis mecánica (condones) proporciona una protección parcial.
La quimioprofilaxis tiene una utilidad limitada por el aumento de la resistencia del
gonococo a los antibióticos.

21. NEISSERIA
MENINGITIDIS
Las cepas de N. meningitidis pueden colonizar la nasofaringe de personas sanas sin
producir enfermedad o pueden producir meningitis contraida en la comunidad, sepsis
fulminante y rapidamente mortal o bronconeumonia.

22. Morfología
Diplococos Gram
negativos
0.6 – 1 µm de diámetro
Intracelulares

23. Estructura antigénica
Poseen pili
Salen de la membrana externa de la
pared bacteriana
Son microorganismos capsulados
Existen 13 serogrupos
(A, B, C, D, E-29, H, I, K, L, X, Y, Z, W-135)
Los serogrupos A, B, C, Y, W-135
son responsables del 90% de las
enfermedades a nivel global

24. Mecanismos de patogenicidad
IgA1 proteasa
Cliva la IgA (propil-serilpeptido)
Endotoxinas LOS (Lipooligosacáridos) media la mayor parte de las
manifestaciones clinicas
La capsula protege a las bacterias de la
fagocitosis mediada por anticuerpos.
Los receptores especificos para los pili
meningocócicos de tipo IV permiten la
colonizacion de la nasofaringe y la replicacion; la
modificacion postraduccional de los pili favorece
la penetracion en la celula del hospedador y la
diseminacion de persona a persona}
Las bacterias pueden sobrevivir a la muerte
intracelular en ausencia de inmunidad humoral

25. Patogenia
La enfermedad meningococica ocurre en pacientes que carecen de anticuerpos específicos
dirigidos frente a la capsula de polisacáridos y otros antígenos bacterianos expresados.
Los recién nacidos disfrutan inicialmente de la protección que les confiere la transmisión pasiva
de los anticuerpos maternos.
Sin embargo, a los 6 meses de edad esta inmunidad protectora ha disminuido, un hecho que
concuerda con la observación de que la incidencia de la enfermedad es mayor en niños menores
de 2 años.
La inmunidad puede estimularse mediante la colonizacion por N. meningitidis o por bacterias
portadoras de antigenos con reactividad cruzada (p. ej., colonizacion por especies no
encapsuladas de Neisseria, exposición al antigeno K1 de Escherichia coli, el cual presenta
reactividad cruzada con el polisacarido capsular del grupo B)
Se calcula que los pacientes con defectos en C5, C6, C7 o C8 del complemento
tienen un riesgo 6.000 veces superior de adquirir la enfermedad meningococica.

26. Manifestaciones clínicas
Los meninigococos afectan solo al ser humano
Puerta de entrada nasofaríngea.
Se transmite de persona a persona, por inhalación de pequeñas gotas de secreción infectadas,
por contacto oral directo o indirecto.
Desde la nasofaringe, los microorganismos llegan al torrente sanguíneo y producen bacteriemia;
los síntomas son parecidos a los de una infección respiratoria alta. La meningococemia
fulminante es más grave y se manifiesta por fiebre elevada y exantema hemorrágico puede
haber coagulación intravascular diseminada y colapso circulatorio.
La meningitis es la complicación más frecuente de la meningococemia. Por lo general comienza
en forma brusca con cefalea intensa, vómito y rigidez del cuello y evoluciona al estado de coma
a las pocas horas.
Durante la meningococemia hay trombosis de diversos vasos sanguíneos pequeños en muchos
órganos con infiltración perivascular y hemorragias petequiales. Puede haber miocarditis
intersticial, artritis y lesiones de la piel.

27. Patologías
Meningococemia (Sindrome
de Waterhouse-Friderichsen)
Microorganismos responsables: Neisseria
meningitidis como responsable de 75-80% de
los casos, Pseudomona ssp. Neumococo
Haemophilus influenzae Escafilococos

31. Aislamiento bacteriano
 Muestras
L.C.R.
Hemocultivo
Hisopado
nasofaríngeo
Petequias

32. Cuidados con la muestra de LCR
 INMEDIATAMENTE llevar a laboratorio
 Procesado INMEDIATO, ya que el recuento puede
disminuir en un 32% después de 1 hora y en un
50% después de las dos horas de extracción
 Si no se procesa dentro de las 2 hrs., NO
refrigerar la muestra
Extraer 3 - 5 mL aproximadamente
Repartir en 2 frascos estériles
•1º frasco examen citoquímico
•2º frasco tinciones y cultivo

33. Pruebas diagnósticas
de laboratorio
B. Frotis
Los frotis de sedimento de líquido cefalorraquídeo
centrifugado o del aspirado petequial teñido con tinción
de Gram a menudo muestran los gonococos
característicos dentro de los leucocitos polimorfonucleares
o extracelulares.
C. Medios de Cultivo
Agar sangre
Agar chocolate
Agar Thayer Martin
Otros
Atmósfera
5 -7 % de CO2
Temperatura
35 ºC

34. Características de crecimiento
 Colonias
 Depende del serotipo
Amarillas
rugosas
Blancas
mucoides

35. Pruebas de identificación
Catalasa +
Oxidasa +
Fermentación de Carbohidratos
Prueba de la DNASA -
Serotipificación por aglutinación en placa
Acidificación del medio: amarillo
Alcalinización del medio: rojo

36. Tratamiento y profilaxis
La penicilina G es el fármaco de elección para tratar la infección meningocócica.
En personas alérgicas a las penicilinas se utiliza
 Cloranfenicol
 Cefalosporinas de 3ra. Generación
 Rifampicina

37. Moraxella
catarrhalis

38. TAXONOMÍA
 Familia:
Moraxellaceae
Géneros:
Moraxella:
M. catarrhalis
M. lacunata
Psychrobacter

39. Morfología
Diplococos Gram negativos
Forma de granos de café
Inmóviles
No producen esporas
Moraxella catarrhalis anteriormente se
denominaba Branhamella catarrhalis y antes de
esto Neisseria catarrhalis. Es un miembro de la
microflora normal en 40 a 50% de los niños de
edad escolar sanos.
También es causa importante de infección en
pacientes inmunodeficientes.
Se puede diferenciar de las neisserias por su falta
de fermentación de hidratos de carbono y por
su producción de DNAasa.

40. Estructura antigénica
 Lipooligosacáridos (LOS)
 OMP (UspAs)
 Lipoproteínas (LPP)
 Adhesinas
 Pili
 Capacidad para organizar biofilms

41. PROTEÍNAS DE LA MEMBRANA EXTERNA

42. P
A
T
O
G
E
N
I
A

43. PATOLOGÍA
 Otitis media
 Sinusitis
 Conjuntivitis
 Bronconeumonía (EPOC)
 Faringitis crónica

44. Tipos de muestras
 Tímpanocentesis
 Punción antral para senos paranasales
 Secreción conjuntival
 Esputo o lavado broncoalveolar
 Hisopado faríngeo (EN ADULTOS)

45. Aislamiento
 Medios de Cultivo
Agar sangre
Agar chocolate
 Atmósfera
5 – 10% de CO2
 Temperatura
35 ºC

46. Características de crecimiento
 Colonias
No hemolíticas
Brillantes
Rugosas
M. catarrhalis

47. Pruebas de identificación
Catalasa -
Oxidasa -
Producción de DNAsa +
Fermentación de Carbohidratos -
Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa,
maltosa, sacarosa y fructosa.
Reducción de nitratos y nitritos

48. ANTIBIOGRAMA
 Agar Mueller-Hinton
 Discos a ser utilizados:
 Amoxicilina/sulbactam
 Ampicilina/clavulánico
 Eritromicina
 Tetraciclina
 Cotrimoxazol
 Incubar durante 20 a 24 hrs con 5% de CO2

49. MECANISMOS DE RESISTENCIA
 La mayoría de los aislamientos clínicamente importantes producen β-
lactamasas. En la actualidad se han descrito dos tipos de β-lactamasas en las
cepas de Moraxella catarrhalis, BRO-1 y BRO-2. Las dos β-lactamasas BRO
hidrolizan penicilina, ampicilina, meticilina y cefaclor.
 Una tercera enzima β-lactamasa, BRO-3 fue descrita, pero ahora se sabe que
es un precursor unido a la membrana de las otras enzimas BRO. El nombre
“BRO” es una contracción de BRanhamella y mOraxella, debido a que se
han encontrado β-lactamasas similares en moraxelas baciliformes: M.
lacunata y M. nonliquefaciens.
 Se ha demostrado la transferencia por conjugación de BRO entre cepas de
Moraxella catarrhalis, y entre ésta y M. nonliquefaciens.

50. TRATAMIENTO
 β - lactámicos de amplio espectro asociados a inhibidores de β –
lactamasa
 Macrólidos: Eritromicina, Azitromicina, Claritromicina,
Roxitromicina
 Tetraciclina
 Cotrimoxazol

51. GRACIAS