esterilidad microbiologica

1. Ensayo de Esterilidad
Control de calidad
Blgo. Victor Quispe

2. Ensayo de esterilidad
 Objetivos:
Determinar si un artículo farmacopeico, que se afirma
es estéril, cumple con los requisitos establecidos en la
monografía individual con respecto a la prueba de
Esterilidad.

3. Generalidades:
 Se emplea el ensayo de esterilidad para verificar la
ausencia de contaminación por microorganismos
(bacterias y hongos) en muestras de productos
esterilizados o preparados asépticamente.
 La ausencia de contaminación microbiana,
evidenciada por este procedimiento, confirma que el
producto cumple con los requisitos del ensayo
aunque el mismo no es suficiente para suponer la
esterilidad de la totalidad del lote ensayado, dadas
las limitaciones inherentes a la estadística del
muestreo. La condición de estéril se asegura a
través de la validación del proceso de esterilización
o del procesamiento aséptico.

4. Precauciones
 La prueba de esterilidad se llevará a cabo
en condiciones asépticas, para lograr estas
condiciones se recomienda condiciones de
trabajo en las que se realice monitoreo
regularmente al área de trabajo y
realización de otros controles apropiados.
Control ambiental Control de superficies
Uniforme estéril

5. Requisitos previos a la realización del
ensayo
-Realizar la aptitud de esterilidad de los
productos a analizar

6. Incubar
x
Métodos:
Medios de cultivo:
• Medio Líquido de Tioglicolato (MLT), sirve principalmente para el cultivo
de bacterias anaerobias. Sin embargo, también detecta bacterias
aerobias. Este medio se incubará de 32.5 ± 2.5 ºC
• Medio de Digerido de Caseína y Soja (CST), es adecuado para el
cultivo tanto de hongos como de bacterias aerobias. Este medio se
incubará de 22.5 ± 2.5 ºC.

7. Filtración por membrana
 Aplica a:
• Soluciones acuosas
• Sólidos solubles
• Aceite y soluciones oleosas
• Sólidos filtrables
• Semisólidos
- Usar filtros de membrana con un tamaño nominal de poro no mayor a
0,45μm, cuya eficacia para retener microorganismos haya sido establecida.
- El aparato de filtración y la membrana se esterilizan utilizando técnicas
adecuadas.
- El aparato se diseña de tal modo que la solución a examinar se pueda
introducir y filtrar en condiciones asépticas: permite retirar asépticamente la
membrana para transferirla al medio de cultivo.
- Se utiliza un líquido de dilución y lavado: Líquido A, Líquido K, Líquido D.

8. Procedimiento
Equipo de filtración estéril, el cual
debe estar conectado a un sistema de
vacío, dentro del área estéril
Se retira uno de los vasos para
colocar el filtro, con ayuda de pinzas
estériles
Se vuelve a colocar el vaso, se incorpora la
muestra a analizar, y se realiza el enjuague
con 100mL de Liquido A (x 3 veces)
Se retira el filtro, se coloca la mitad
del filtro dentro del CST, la otra mitad
dentro del MLT y se lleva a
incubación.

9. Inoculación o Transferencia directa
 Aplica a todas las muestras que no se pueda
analizar por el método de filtración.
 Se inocula o agrega la muestra directamente en
ambos medios de cultivo tal que el volumen de la
muestra no sea mayor al 10% del volumen del
medio de cultivo, a menos que lo indique la
monografía del producto. Se emplea cuando el
producto en sí no posee inhibidores que alteren la
efectividad del mismo.
 En caso el producto presenta actividad
antimicrobiana, realizar la prueba después de
neutralizar esta actividad con una sustancia
neutralizante adecuada o mediante su dilución en

10. Cantidad Mínima a Usar para cada
Medio
Cantidad por Envase
Cantidad Mínima a Usar (a menos que se
justifique y autorice algo diferente)
Líquidos
Menos de 1 mL El contenido total de cada envase
1 – 40 mL
La mitad del contenido de cada envase,
pero no menos de 1 mL
Más de 40 mL y
no más de 100 mL
20 mL
Más de 100 mL
10% del contenido del envase, pero
no menos de 20 mL
Líquidos antibióticos 1 mL
Preparaciones insolubles, cremas y
ungüentos que deben suspenderse o
emulsionarse
Usar el contenido de cada envase para
suministrar no menos de 200 mg
Sólidos
Menos de 50 mg El contenido total de cada envase
50 mg o más, pero
menos de 300 mg
La mitad del contenido de cada envase,
pero no menos de 50 mg
300 mg - 5 g 150 mg
Más de 5 g 500 mg
Catgut y otros materiales de sutura
quirúrgica para uso veterinario
3 secciones de una hebra (cada uno de 30
cm de longitud)
Apósito quirúrgico/algodón/gasa (en
envases)
100 mg por envase
Material de sutura y otro material de un solo
uso envasado individualmente
El dispositivo completo
Otros dispositivos médicos
El dispositivo completo, cortado
en piezas o desmontado

11. Número Mínimo de Artículos a Evaluar en Relación con el
Número de Artículos en la Partida
Número de Artículos en la Partida*
Número Mínimo de Artículos a evaluar para cada
Medio (a menos que se justifique y autorice algo
diferente) **
Preparaciones parenterales
No más de 100 envases 10% ó 4 envases, lo que resulte mayor
Más de 100 pero no más de 500 envases 10 envases
Más de 500 envases 2% ó 20 envases, lo que resulte menor
Para preparaciones parenterales de gran volumen 2% ó 10 envases, lo que resulte menor
Antibióticos sólidos
Envases a granel para farmacias (< 5 g) 20 envases
Envases a granel para farmacias (> 5 g) 6 envases
Graneles y mezclas Ver Productos sólidos a granel
Preparaciones oftálmicas y otras preparaciones no inyectables
No más de 200 envases 5% ó 2 envases, lo que resulte mayor
Más de 200 envases 10 envases
Si el producto se presenta en la forma de envases monodosis, aplicar el esquema mostrado anteriormente para preparaciones
para uso parenteral.
Catgut y otros materiales de sutura quirúrgica para uso veterinario
2% ó 5 envases, lo que resulte mayor, hasta un total
máximo de 20 envases
No más de 100 artículos 10% ó 4 artículos, lo que resulte mayor
Más de 100, pero no más de 500 artículos 10 artículos
Más de 500 artículos 2% ó 20 artículos, lo que resulte menor
Productos sólidos a granel
Hasta 4 envases Cada envase
Más de 4 envases, pero no más de 50 envases 20% ó 4 envases, lo que resulte mayor
Más de 50 envases 2% ó 10 envases, lo que resulte mayor

12. Interpretación de resultados
Examinar los medios durante los 14 días de incubación e
indicar si la prueba es:
 Estéril: cuando no se encuentra evidencia de crecimiento
microbiano en los medios al final de los 14 días, es decir no se
observa turbidez.
 No Estéril: cuando se encuentra evidencia de crecimiento
microbiano, es decir se observa turbidez; esto puede ocurrir en
cualquiera de los 14 días.

14. Lectura y reporte
 Se realiza la lectura
diaria en el formato F-
069/MC Registro
interno de análisis de
esterilidad, y se emite
un reporte final en el
formato F-011/MC
Reporte de esterilidad