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UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE CIENCAS BIOLOGICAS Y AGROPECUARIAS
POZA RICA-TUXPAN
CARRERA DE BIOLOGIA
“AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE VIBRIO SPP. EN EL OSTION AMERICANO
CRASSOSTREA VIRGINICA , EN LA LAGUNA DE TAMPAMACHOCO;
TUXPAN, VERACRUZ”
PRESENTA:
KATIA GONZÁLEZ HERNÁNDEZ
RICARDO SANTIAGO
EDGAR REYES TOBÍAS
ADRIANA RAMÍREZ PÉREZ
DOCENTE:
DR. PABLO SAN MARTÍN DEL ANGEL
TUXPAN, VER. MAYO DEL 2013
INTRODUCCION
• La contaminación de las aguas superficiales, en especial las
costeras, constituye un problema crucial en ascenso para la
salud humana. Las causas más frecuentes se deben a continuas
descargas de aguas residuales domésticas no tratadas o con
escaso tratamiento, situación que se agudiza en los países en
vía de desarrollo, afectando la calidad microbiológica de las
aguas destinadas a la recreación, a la pesca y al cultivo de
mariscos (González María Isabel y Leyva Virginia, 1994-1996).
Las malas condiciones sanitarias de manejo del producto, que
se dan durante el proceso de comercialización, favorecen el
incremento de microorganismos patógenos, y por ende, la
contaminación del ostión (Negrete Pilar, Romero Jorge, 2010).
• En los últimos años se han detectado en los estuarios bacterias
autóctonas de la familia Vibrionaceae que pueden ser agentes
causales de enfermedad en el humano; estas bacterias se
pueden aislar frecuentemente de los ostiones e incluyen: Vibrio
cholerae,
Vibrio
parahaemolyticus,
Vibrio
vulnificus,
Aeromonas, etcétera.
ANTECEDENTES
•

La OMS (2009) hace mención que la programación de estos patógenos y contaminantes a
través de las fronteras nacionales significa que las enfermedades de transmisión alimenticia
constituyen ahora una amenaza para la seguridad sanitaria pública a nivel mundial. Los
recientes acontecimientos relacionados tanto con la contaminación química (por ejemplo, por
melanina o dioxina) y contaminación microbiología de productos alimenticios con patógenos
tradicional mente (por ejemplo, salmonella, spp.) o nuevo (Restonebolavirus) ponen de
relieve, la dimensión mundial del problema.

•

Castillo y García (1984), señala que el género Vibrio contiene más de 34 especies 12 son
patógenas para el hombre o han sido aisladas en muestras clínicas y de estas 10 se
consideran halófilas. Se aíslan con frecuencia en agua costeras templadas y
tropicales, especialmente en meses cálidos, cuando la temporada del agua es superior a 17
°C. el reservorio de estos microorganismos lo constituye las aguas donde habitan los
alimentos de origen marino o contaminado con agua de mar.

•

Silva (2007) indica que los mariscos, especialmente los moluscos bivalvos, como
ostras,
almejas,
manchas,
acumulan
cantidades
importantes
de
Vibrio.
En
general, crustáceos y pescados no poseen Vibrio en cantidades importantes para causar
infección, pero puede alcanzar grandes cantidades de este al dejarse sin adecuada
refrigeración por unas pocas horas. La enfermedad se tramite por ingestión de cualquier
alimento contaminado crudo o mal cocido.

•

Brok (1978) afirma que un patógeno debe conseguir primero el acceso a los tejidos del
huésped y multiplicarse antes que pueda causar daño. Esto requiere que el organismo
penetre en la piel., en la membranas mucosas en el epitelio intestinal, superficial que
normalmente actúan como barreras microbianas. El pasaje a través de la piel hasta las capas
subcutáneas se produce casi siempre a través delas heridas ; solo en casos raros existen
pruebas de que los patógenos puedan penetrar por una piel sana.
OBJETIVOS
 Determinar la presencia de bacterias del género Vibrio sp. En el ostión
americano Crassostrea virginica en la Laguna de Tampamachoco;
Tuxpan, Ver.

 Aislar cepas bacterianas del género Vibrio sp. en el ostión americano.
 Identificar por medio de la tinción de Gram bacterias del Género Vibrio
sp. En el ostión americano.
 Describir los posibles riesgos de infección a la salud humana, que podría
ocasionar la presencia de bacterias patógenas en el ostión americano.
ÁREA DE ESTUDIO
Laguna de
Tampamachoco
MATERIAL
 Muestra de Ostiones americanos
 6 cajas petri de plástico
esterilizadas
 Vaso de precipitados
 Probeta
 Balanza analítica
 Asa de platino
 Estufa de calentamiento
 Incubadora
 campana de flujo laminar
 mechero de bunsen

 asa de platino
 microscopio óptico
 portaobjetos

 cubreobjetos
Sustancias
 agua destilada
 alcohol al 70%
 cristal violeta

 lugol
 alcohol acetona
 safranina
Medio de cultivo

 TCBS (tiosulfato-citrato-sales
biliares-sacarosa)
METODOLOGIA
• Fase de
Colecta

• Medios Selectivos
Preparación del medio
agar TCBS (tiosulfatocitrato-sales biliaressacarosa).

• Fase de Laboratorio
• Determinación
Taxonómica

• Tinción de Gram
RESULTADOS

Vibrio parahaemolyticus
(verde-azulado)

Vibrio cholerae
(amarillenta)
Vibrio cholerae

Observacion
microscopica
aumento 40x muestra del
Vibrio cholerae.

Observacion
microscopica
aumento 100x muestra del
Vibrio cholerae.

Se identificaron las bacterias Vibrio cholerae Gram negativa
(ya que presentan coloracion rosada tenue) con forma de
bastón (un bacilo) curvo.
Vibrio parahaemolyticus

Observacion
microscopica
aumento 40x muestra del
Vibrio parahaemolyticus.

Observacion
microscopica
aumento 100x muestra del
Vibrio parahaemolyticus.

Se identificaron las bacterias Vibrio parahaemolyticus Gram
negativas (ya que presentan coloracion rosada tenue) con forma
forma cilíndrica alargada (un bacilo).
La Norma Oficial Mexicana NOM-031-SSA1-1993
establece las especificaciones sanitarias de los
moluscos bivalvos frescos-refrigerados y congelados, es
de observancia obligatoria en el territorio nacional para
las personas físicas o morales que se dedican a su
proceso o importación.
Que los moluscos bivalvos frescos-refrigerados y
congelados deben estar exentos de materia extraña.
Con un límite de este microorganismo de Vibrio cholerae
0 1 Ausente.
Riesgos De Infección A La Salud Humana
• Las bacterias patógenas encontradas en el presente
trabajo
fueron
Vibrio
Cholerae
y
Vibrio
parahaemolyticus, éstas se asocias a las causantes de
la mayoría de las enfermedades gastrointestinales
transmitidas por los alimentos. La bacteria Vibrio
cholerae provoca el cólera en humanos. El Vibrio
parahaemolyticus es capaz de causar gastroenteritis.
• Son las enfermedades diarreicas las que se encuentran
entre las principales causas de morbilidad y mortalidad
infantil no solo en Veracruz y México, sino en países
desarrollados como Estados Unidos.
DISCUSIÓN

La OMS (2009) ha realizado programas donde encontró que de los patógenos y
contaminantes de transmisión alimenticia constituyen una amenaza para la seguridad
sanitaria pública a nivel mundial
Los moluscos bivalvos se han convertido en un recurso natural muy importante debido a la
intensificación de su explotación comercial al ser incorporados como productos
convencionales y su impacto en la salud humana (SSA, 1993), a esto se argumenta la
publicación de Silva (2007) donde indica que los mariscos, especialmente los moluscos
bivalvos, como ostras, almejas, manchas, ostiones acumulan cantidades importantes de
Vibrio, en general; pueden alcanzar grandes cantidades de este al dejarse sin adecuada
refrigeración por unas pocas horas.
Esta enfermedad se tramite por ingestión de cualquier alimento contaminado crudo o mal
cocido, y como sabemos la mayor parte de la población consume el ostión crudo, lo que
aumenta el riesgo de enfermarse a causa de bacterias, por lo que se recomienda que deba
cocerse lo antes posible, hasta que abran sus conchas.
Castillo y García (1984), señalan que el género Vibrio contiene más de 34 especies 12 son
patógenas para el hombre o han sido aisladas en muestras clínicas.
Las principales enfermedades producidas por esta bacteria Vibrio spp. Son el colera,
diarrea y enfermedades gastrointestinales de alto peligro para la salud que puede
provocar hasta la muerte.
CONCLUSIÓN
•

Se determinó la presencia de bacterias del genero Vibrio cholerae y
V. parahaemolyticus sp. en el ostión americano

•

Se identificaron estas bacterias de Vibrio cholerae y V.
parahaemolyticus de morfotipo en forma de bacilo (bastón curvo)
resultando ser Gram negativas por su coloración rosado tenue.

•

La bacteria más abundante presente en el ostión americano es la sp.
Vibrio cholerae.

•

Los ostiones no cuentan con la sanidad adecuada en base a la La
Norma Oficial Mexicana NOM-031-SSA1-1993, que nos menciona que
el producto debe estar exento o con un límite de este microorganismo
de Vibrio cholerae 0 1 Ausente.

•

Vibrio cholerae y V. parahaemolyticus principales causantes del cólera
y enfermedades gastrointestinales.
BIBLIOGRAFÍA
•

García-Lázaro, M., Almodóvar, M.C, Rivero, A. Y Torre-Cisneros, J. Unidad De
Gestión Clínica De Enfermedades Infecciosas. Hospital Reina Sofía.
Córdoba. España, 2010

•

Castillo, V., Valdés, E., Cisneros D. Y
Pérez B. Aislamiento De Vibrios
Patógenos Y Valoración De La
Calidad Sanitaria De Ostiones Frescos
Cosechados En Cuba, 1996, Revista Cubana Aliment Nutr 1996;10(2),
Instituto De Nutrición E Higiene De Los
Alimentos

•

Norma Oficial Mexicana Nom-031-Ssa1-1993, Bienes Y Servicios.
Productos
De La Pesca. Moluscos Bivalvos FrescosRefrigerados Y
Congelados.
Especificaciones Sanitarias.
Ssa. 1993.

•

Negrete, P.,
Redondo, J. Artículo De Investigación, Carga Bacteriana En Ostión
(Crassostrea
Virginica),*Desde Su Recolecta Hasta Su Consumo 2,
Universidad Autónoma MetropolitanaXochimilco,
Departamento El Hombre Y Su Ambiente, 2. Universidad
Nacional
Autónoma
De
México, Instituto De Ciencias Del Mar Y Limnología. 2010

•

González, Ma. I., Castillo, V. Identificación De Especies Del Genero Vibrio
Aisladas De
Aguas
Costeras. Instituto Nacional De
Higiene,
Epidemiología Y Microbiología,Infanta 1158, E/ Clavel Y Llinás,
Centro
Habana, Cip 10300, Cuba, Fax: 78-1479, E-Mail: Saludamb@Heinsa.Sld.Cu

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Aislamiento e identificacion de Vibrio en ostión

  • 1. UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE CIENCAS BIOLOGICAS Y AGROPECUARIAS POZA RICA-TUXPAN CARRERA DE BIOLOGIA “AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE VIBRIO SPP. EN EL OSTION AMERICANO CRASSOSTREA VIRGINICA , EN LA LAGUNA DE TAMPAMACHOCO; TUXPAN, VERACRUZ” PRESENTA: KATIA GONZÁLEZ HERNÁNDEZ RICARDO SANTIAGO EDGAR REYES TOBÍAS ADRIANA RAMÍREZ PÉREZ DOCENTE: DR. PABLO SAN MARTÍN DEL ANGEL TUXPAN, VER. MAYO DEL 2013
  • 2. INTRODUCCION • La contaminación de las aguas superficiales, en especial las costeras, constituye un problema crucial en ascenso para la salud humana. Las causas más frecuentes se deben a continuas descargas de aguas residuales domésticas no tratadas o con escaso tratamiento, situación que se agudiza en los países en vía de desarrollo, afectando la calidad microbiológica de las aguas destinadas a la recreación, a la pesca y al cultivo de mariscos (González María Isabel y Leyva Virginia, 1994-1996). Las malas condiciones sanitarias de manejo del producto, que se dan durante el proceso de comercialización, favorecen el incremento de microorganismos patógenos, y por ende, la contaminación del ostión (Negrete Pilar, Romero Jorge, 2010). • En los últimos años se han detectado en los estuarios bacterias autóctonas de la familia Vibrionaceae que pueden ser agentes causales de enfermedad en el humano; estas bacterias se pueden aislar frecuentemente de los ostiones e incluyen: Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Aeromonas, etcétera.
  • 3. ANTECEDENTES • La OMS (2009) hace mención que la programación de estos patógenos y contaminantes a través de las fronteras nacionales significa que las enfermedades de transmisión alimenticia constituyen ahora una amenaza para la seguridad sanitaria pública a nivel mundial. Los recientes acontecimientos relacionados tanto con la contaminación química (por ejemplo, por melanina o dioxina) y contaminación microbiología de productos alimenticios con patógenos tradicional mente (por ejemplo, salmonella, spp.) o nuevo (Restonebolavirus) ponen de relieve, la dimensión mundial del problema. • Castillo y García (1984), señala que el género Vibrio contiene más de 34 especies 12 son patógenas para el hombre o han sido aisladas en muestras clínicas y de estas 10 se consideran halófilas. Se aíslan con frecuencia en agua costeras templadas y tropicales, especialmente en meses cálidos, cuando la temporada del agua es superior a 17 °C. el reservorio de estos microorganismos lo constituye las aguas donde habitan los alimentos de origen marino o contaminado con agua de mar. • Silva (2007) indica que los mariscos, especialmente los moluscos bivalvos, como ostras, almejas, manchas, acumulan cantidades importantes de Vibrio. En general, crustáceos y pescados no poseen Vibrio en cantidades importantes para causar infección, pero puede alcanzar grandes cantidades de este al dejarse sin adecuada refrigeración por unas pocas horas. La enfermedad se tramite por ingestión de cualquier alimento contaminado crudo o mal cocido. • Brok (1978) afirma que un patógeno debe conseguir primero el acceso a los tejidos del huésped y multiplicarse antes que pueda causar daño. Esto requiere que el organismo penetre en la piel., en la membranas mucosas en el epitelio intestinal, superficial que normalmente actúan como barreras microbianas. El pasaje a través de la piel hasta las capas subcutáneas se produce casi siempre a través delas heridas ; solo en casos raros existen pruebas de que los patógenos puedan penetrar por una piel sana.
  • 4. OBJETIVOS  Determinar la presencia de bacterias del género Vibrio sp. En el ostión americano Crassostrea virginica en la Laguna de Tampamachoco; Tuxpan, Ver.  Aislar cepas bacterianas del género Vibrio sp. en el ostión americano.  Identificar por medio de la tinción de Gram bacterias del Género Vibrio sp. En el ostión americano.  Describir los posibles riesgos de infección a la salud humana, que podría ocasionar la presencia de bacterias patógenas en el ostión americano.
  • 5. ÁREA DE ESTUDIO Laguna de Tampamachoco
  • 6. MATERIAL  Muestra de Ostiones americanos  6 cajas petri de plástico esterilizadas  Vaso de precipitados  Probeta  Balanza analítica  Asa de platino  Estufa de calentamiento  Incubadora  campana de flujo laminar  mechero de bunsen  asa de platino  microscopio óptico  portaobjetos  cubreobjetos Sustancias  agua destilada  alcohol al 70%  cristal violeta  lugol  alcohol acetona  safranina Medio de cultivo  TCBS (tiosulfato-citrato-sales biliares-sacarosa)
  • 7. METODOLOGIA • Fase de Colecta • Medios Selectivos Preparación del medio agar TCBS (tiosulfatocitrato-sales biliaressacarosa). • Fase de Laboratorio
  • 10. Vibrio cholerae Observacion microscopica aumento 40x muestra del Vibrio cholerae. Observacion microscopica aumento 100x muestra del Vibrio cholerae. Se identificaron las bacterias Vibrio cholerae Gram negativa (ya que presentan coloracion rosada tenue) con forma de bastón (un bacilo) curvo.
  • 11. Vibrio parahaemolyticus Observacion microscopica aumento 40x muestra del Vibrio parahaemolyticus. Observacion microscopica aumento 100x muestra del Vibrio parahaemolyticus. Se identificaron las bacterias Vibrio parahaemolyticus Gram negativas (ya que presentan coloracion rosada tenue) con forma forma cilíndrica alargada (un bacilo).
  • 12. La Norma Oficial Mexicana NOM-031-SSA1-1993 establece las especificaciones sanitarias de los moluscos bivalvos frescos-refrigerados y congelados, es de observancia obligatoria en el territorio nacional para las personas físicas o morales que se dedican a su proceso o importación. Que los moluscos bivalvos frescos-refrigerados y congelados deben estar exentos de materia extraña. Con un límite de este microorganismo de Vibrio cholerae 0 1 Ausente.
  • 13. Riesgos De Infección A La Salud Humana • Las bacterias patógenas encontradas en el presente trabajo fueron Vibrio Cholerae y Vibrio parahaemolyticus, éstas se asocias a las causantes de la mayoría de las enfermedades gastrointestinales transmitidas por los alimentos. La bacteria Vibrio cholerae provoca el cólera en humanos. El Vibrio parahaemolyticus es capaz de causar gastroenteritis. • Son las enfermedades diarreicas las que se encuentran entre las principales causas de morbilidad y mortalidad infantil no solo en Veracruz y México, sino en países desarrollados como Estados Unidos.
  • 14. DISCUSIÓN La OMS (2009) ha realizado programas donde encontró que de los patógenos y contaminantes de transmisión alimenticia constituyen una amenaza para la seguridad sanitaria pública a nivel mundial Los moluscos bivalvos se han convertido en un recurso natural muy importante debido a la intensificación de su explotación comercial al ser incorporados como productos convencionales y su impacto en la salud humana (SSA, 1993), a esto se argumenta la publicación de Silva (2007) donde indica que los mariscos, especialmente los moluscos bivalvos, como ostras, almejas, manchas, ostiones acumulan cantidades importantes de Vibrio, en general; pueden alcanzar grandes cantidades de este al dejarse sin adecuada refrigeración por unas pocas horas. Esta enfermedad se tramite por ingestión de cualquier alimento contaminado crudo o mal cocido, y como sabemos la mayor parte de la población consume el ostión crudo, lo que aumenta el riesgo de enfermarse a causa de bacterias, por lo que se recomienda que deba cocerse lo antes posible, hasta que abran sus conchas. Castillo y García (1984), señalan que el género Vibrio contiene más de 34 especies 12 son patógenas para el hombre o han sido aisladas en muestras clínicas. Las principales enfermedades producidas por esta bacteria Vibrio spp. Son el colera, diarrea y enfermedades gastrointestinales de alto peligro para la salud que puede provocar hasta la muerte.
  • 15. CONCLUSIÓN • Se determinó la presencia de bacterias del genero Vibrio cholerae y V. parahaemolyticus sp. en el ostión americano • Se identificaron estas bacterias de Vibrio cholerae y V. parahaemolyticus de morfotipo en forma de bacilo (bastón curvo) resultando ser Gram negativas por su coloración rosado tenue. • La bacteria más abundante presente en el ostión americano es la sp. Vibrio cholerae. • Los ostiones no cuentan con la sanidad adecuada en base a la La Norma Oficial Mexicana NOM-031-SSA1-1993, que nos menciona que el producto debe estar exento o con un límite de este microorganismo de Vibrio cholerae 0 1 Ausente. • Vibrio cholerae y V. parahaemolyticus principales causantes del cólera y enfermedades gastrointestinales.
  • 16. BIBLIOGRAFÍA • García-Lázaro, M., Almodóvar, M.C, Rivero, A. Y Torre-Cisneros, J. Unidad De Gestión Clínica De Enfermedades Infecciosas. Hospital Reina Sofía. Córdoba. España, 2010 • Castillo, V., Valdés, E., Cisneros D. Y Pérez B. Aislamiento De Vibrios Patógenos Y Valoración De La Calidad Sanitaria De Ostiones Frescos Cosechados En Cuba, 1996, Revista Cubana Aliment Nutr 1996;10(2), Instituto De Nutrición E Higiene De Los Alimentos • Norma Oficial Mexicana Nom-031-Ssa1-1993, Bienes Y Servicios. Productos De La Pesca. Moluscos Bivalvos FrescosRefrigerados Y Congelados. Especificaciones Sanitarias. Ssa. 1993. • Negrete, P., Redondo, J. Artículo De Investigación, Carga Bacteriana En Ostión (Crassostrea Virginica),*Desde Su Recolecta Hasta Su Consumo 2, Universidad Autónoma MetropolitanaXochimilco, Departamento El Hombre Y Su Ambiente, 2. Universidad Nacional Autónoma De México, Instituto De Ciencias Del Mar Y Limnología. 2010 • González, Ma. I., Castillo, V. Identificación De Especies Del Genero Vibrio Aisladas De Aguas Costeras. Instituto Nacional De Higiene, Epidemiología Y Microbiología,Infanta 1158, E/ Clavel Y Llinás, Centro Habana, Cip 10300, Cuba, Fax: 78-1479, E-Mail: Saludamb@Heinsa.Sld.Cu