2. Objetivos
Definir el CONCEPTO de capsula bacteriana.
Describir los pasos para DESARROLLAR LAS
TINCIONES mas comunes usadas para hacer visibles
las capsulas bacterianas.
Explicar la IMPORTANCIA de la capsula para la
supervivencia, identificación y virulencia de las
bacterias.
3. Contenido:
¿Qué es la capsula bacteriana?
Es una ESTRUCTURA EXTERNA a la pared celular pero
sintetizada entre la membrana celular y la pared de
peptidoglicano.
Streptococcus, Bacillus, Klebsiella, Neisseria, etc.
S. Pneumoniae causante
principal de neumonías
bacterianas debe su
virulencia a su capsula.
S. mutans, S. gingivalis, S.
salivaris, son causantes de
caries dentales.
4. La Cápsula.
Le confiere a la bacteria su valor inmunológico.
Le impide a las células del sistema de defensa del organismo que puedan
atacarlas.
No puede ser teñida con procedimientos sencillos pero es fácil
desarrollar algunas técnicas para hacerlas visibles con respecto a la
tinción de los somas bacterianos y en contraste con el fondo de vidrio del
portaobjetos.
5. Tinciones
La Tinción negativa .
Aplicada para poner en evidencia la cápsula utilizando tinta china para
teñir el fondo y Azul de Metileno para teñir el soma bacteriano.
La Tinción de Hiss.
Utiliza una reacción de expansión de la cápsula con albúmina y el
contraste contra un fondo de sulfato de cobre tiñendo el soma con violeta
cristal.
6. Tinción Negativa
1.
2.
3.
4.
5.
LAVE Y FLAMEE el portaobjetos y colóquelo en
el puente de lavado de la tina.
INCINERE el asa bacteriológica y enfrié.
Coloque una gota de TINTA CHINA en el centro
del portaobjetos.
Seleccione una colonia y obtenga una
MUESTRA pequeña.
Colóquela en el portaobjetos, DISOLVIÉNDOLA
en la gota de tinta china.
7. Tinción Negativa
Continuación
6. DISUELVA Y DISPERSE uniformemente en la
superficie del portaobjetos para obtener una capa
muy delgada.
7. Deje SECAR muy bien.
8. CUBRA con azul de metileno por un minuto.
9. Enjuague por un segundo y escurra. Deje secar y
OBSERVE AL MICROSCOPIO con aceite de emersión
8. Tinción de Hiss
En un portaobjetos limpio, seco y flameado, coloque
una GOTA DE SUERO o de albumina.
2. Sobre ella coloque una PEQUEÑA MUESTRA de una
colonia bacteriana, disuelva y disperse sin producir
chirridos en el portaobjetos.
3. Deje SECAR al aire libre.
4. FIJE con calor suavemente.
1.
9. Tinción de Hiss
Continuación:
5. Cubra el frotis con VIOLETA CRISTAL AL 1% y
mantenga flameado por 2 min.
6. Lave la placa con SULFATO DE COBRE AL 20%.
7. Deje secar al aire libre y observe con ACEITE DE
INMERSIÓN.