Morfologia microbiana y coloraciones simples

1. MORFOLOGÍA BACTERIANA -
EXAMEN EN FRESCO Y
TINCIÓN SIMPLE
MESA Nº 1
Est. Med. Raymundo Gómez José Luis

2. GENERALIDADES
Bacteria: bacterium = bastón
Características
Procariota: pro=primitivo,
karyon=núcleo
Ribosoma 70S
Pared bacteriana
Ausencia de esteroles
Ausencia de mitocondrias,
RE, AG
Órganos de Movilidad
Cromosoma único
Plásmidos

3. Estructura de la célula bacteriana

4. MORFOLOGÍA MICROBIANA
Tamaño:
0.2 a 3-4 μm de
diámetro.
Micoplasmas
(pequeñas)
Forma:
Cocos
Bacilos
Espirales
Filamentosas
Pleomórficas
Tamaño pequeño
intercambio más
eficiente, permite
mayor velocidad
metabólica

5. Clasificación de la bacterias
Según su forma y agrupación:
 Cocos
 Bacilos
 Espirilos
 Vibrios

7. Cocos o micrococos
De aspecto redondeado:
 diplococos: que aparecen aislados
o en grupos de dos.
 estreptococos :forman cadenas
arrosariadas:
 estafilococos :
 sarcinas: grupos arracimadoso
masas cúbicas
Ejemplos:
Diplococos (Diplococcus
pneumoniae, causante de la
pulmonía bacteriana).
Estafilococos (Staphylococcus
aureus, que vive sobre la piel y
puede producir erupciones)
Estreptococos (Streptococcus
thermophilus que se emplea para
hacer yogurt).

8. Bacillus o Bacilos
Alargados y cilíndricos
se pueden encontrar como:
 Diplobacilos
 Estreptobacilos.
El género más representativo de
esta morfología lleva el nombre
Bacillus
se suelen dividir en:
Bacilos Grampositivos:
Bacilos Gramnegativos:
ejemplos: Salmonella typhi
(causante de la tifoidea),
Mycobacterium tuberculosis
(causante de la tuberculosis).

9. Spirillum o
Espiraladas son muy cortos y curvados,
pueden ser:
 Espirilos, en forma de
“coma” (Vibrio comma,
bacteria causante del cólera)
 Espiroquetas, bacterias con
muchas espirales
(Treponema pallidum,
bacteria causante de la sífilis)
Las formas espirales se
mueven en medios viscosos
avanzando en tornillo
Vibrios.
en forma de coma.
Ejemplo: Vibrio cholerae

11. ¡ CAUSAN ENFERMEDADES!

12. EXAMEN EN FRESCO
Es el método de elección cuando se desea evitar la
alteración que sufre los microorganismos de una muestra
OBJETIVOS
1: observar microorganismos
2: observar movimientos
microbianos

13. TINCIÓN SIMPLE
Materiales y procedimientos
 MATERIALES:
Mechero Bunsen
 Hisopo
 Baja lengua
 Portaobjeto
 Azul de metileno
 Aceite de inmersión

14. TINCIÓN SIMPLE
Objetivos:
Observar la morfología de la bacteria.
 Observar la agregación o tipo de distribución bacteriana.
Fundamento:
Se basa en la afinidad de los colorantes a los distintos componentes
celulares, ya que las células bacterianas en medios a pH neutros
suelen presentar una débil carga negativa. Así pues, la bacteria
cargada negativamente se combinará con los iones positivos de los
colorantes básicos.
Colorantes: Las propiedades ácidas o básicas de los colorantes
permiten su fácil clasificación en:
 Ácidos. Los colorantes ácidos se unen a las partes de las células
cargadas positivamente. Ejem: Eosina, rojo congo, fucsina ácida.
 Básicos. Estos colorantes tienen afinidad por el material nuclear y
otros componentes. Ejem: Azul de metileno, fucsina básica, cristal de
violeta.
 Neutros. Ejem: Giemsa.

15. TINCIÓN SIMPLE
Procedimientos:
I. Preparación de un frotis
1. En una laminilla limpia añada utilizando un asa de inoculación:
a) Si usa suspensión microbiana en medio líquido, una pequeña gota de
la suspensión en el centro de la laminilla.
b) Si usa cultivo en tubo con agar, una pequeña gota de agua en el
centro de la laminilla. Luego añada asépticamente una pequeña porción
del cultivo microbiano y mezcle bien.
2. Flamee el asa.
3. Permita que el frotis bacteriano quede seco (sólo al aire)

16. TINCIÓN SIMPLE
Procedimientos:
II. Fijación del frotis
1. Fijar los frotis de cultivos líquidos con dos gotas de metanol o etanol
absoluto y dejar secar al aire.
2. Los frotis de cultivos sólidos, completamente secos se fijarán con
calor.
3. Palpar la parte inferior del portaobjetos con el dorso de la mano
izquierda para enfriar y comprobar que no hubo sobrecalentamiento.

17. TINCIÓN SIMPLE
Procedimientos:
III. Tinción simple
1. Cubrir el frotis con gotas de azul de metileno durante 2 a 3
minutos.
2. Eliminar el exceso de colorante con lavado suave al agua
corriente o con la ayuda de la pipeta con agua destilada.
3. Dejar secaral aire
Ventajas:
 Los microorganismos incrementa el contraste con sus alrededores y
por tanto son mucho mas visibles.
Desventajas:
No será 100% fiable ya que no permite diferenciar bacterias,
formaciones de tejidos como colágeno, fibras...