El documento describe un estudio sobre la expresión del gen prosistemina de tomate en papa. Se generaron líneas transgénicas de papa insertando el gen prosistemina completo o incompleto. Las plantas transgénicas mostraron sobreexpresión de genes relacionados a la defensa como Lox3, mientras que los genes endógenos Prosys y ProHypSys no se vieron afectados. La expresión del gen prosistemina afectó otros genes como GluB2 y PR1b involucrados en la respuesta a patógenos. El estudio conclu

1. “Año del Bicentenario del Perú: 200 años de independencia”
ILO-MOQUEGUA-PERU
Fecha de entrega: 27/06/2021
UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
FACULTAD DE INGENIERIA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL
ARTÍCULO:
“Expresión del gen prosistemina de tomate en papa (solanum tuberosum)”
DOCENTE:
BLGO. Hebert Hernan Soto Gonzales
CURSO:
Biotecnología
ESTUDIANTE:
Lidia Marleni Coaquera Zanga
CODIGO:
2018205015
CICLO: VII

2. EXPRESIÓN DEL GEN PROSISTEMINA DE TOMATE
EN PAPA (Solanum tuberosum)
INTRODUCCIÓN
Araujo-Burgos y Raó R.
OBJETIVO
El conocimiento sobre el
rol biotecnológico de la
prosistemina
Autores
Los
mecanismos de defensa de la
planta
estudio de la expresión del gen
prosistemina
gen prosistemina
siempre presentes en la planta
Es ampliar
función de este
precursor
Sobre todo, la
para
incrementar la resistencia
endógena
de la
planta frente al estrés
biótico
en una
especie diferente al
tomate.
pueden ser de
tipo constitutivo
están y está
contiene 11
exones
último codifica para
sistemina
de los cuales el
ubicado en la región
terminal C del
precursor
además
el
tomate en papa y del mismo gen
al cual se le ha borrado la porción
que codifica para la sistemina.
genotipos transgénicos de papa PR
presentan la inserción del ADNc
Los
prosistemina de tomate y los
genotipos transgénicos PRx
contienen el mismo gen incompleto.
de
de

3. el
MATERIALES Y MÉTODOS
Transformación genética de
Agrobacterium
Control de células de
Agrobacterium
transgénico.
Transformación genética de
papa
Material vegetal
Extracción y análisis de
ADN genómico
Extracción y análisis de ARN
total
Extracción y análisis de
proteínas totales
Análisis de expresión
génica
vectores binarios PR y PRx están
en células de E.C. cepa DH5α.
células transformadas se inoculan con
LB agar con antibióticos selectivos.
vitroplantas se transfirieron a suelo
estéril y crecieron hasta la producción
de tubérculos.
gen Elongation Factor 1-alpha fue el gen
endógeno de referencia usado para
normalizar los niveles de expresión.
eligió entre 90 y 135
pares de bases (bp)
obtuvieron dos geles
idénticos para el análisis
Western
los ADN, control de electroforesis
en gel de agarosa al 1%.
Las
colonia solitaria de las
células cultivadas en LB
agar con antibióticos
ADN plasmídico, control con
electroforesis en gel de agarosa
al 1%.
realizó el test de
ketolactosa
el Luego
se
Una
creció in vitro en caldo
MS20 a 21°C
virulencia de la bacteria se
indujo usando el medio
simplificado de inducción, SIM
La las
Plantas transformadas y no
transformadas de variedad
4 a 6 semanas de edad se utilizaron
en todos los experimentos
de
las
colectó material vegetal en nitrógeno
líquido, el ADN genómico se aisló.
Se productos de la amplificación
mediante PCR y RT-PCR
observaron en gel de agarosa al
2% y se visualizaron con luz UV.
ARN total se aisló de
las hojas usando
calidad de ARN se vio con
electroforesis en gel de agarosa 1.2%.
método estándar de extracción
en base a fenol/cloroformo.
un La
0.5 g de hojas de papa
congeladas en nitrógeno
líquido se molieron.
litro de solución de
tampón salino fosfato
Otro gel se usó en la
transferencia electroforética
con membranas de
nitrocelulosa (BioRad)
tiñó con azul brillante de
Coomassie para visualizar
proteínas
se
el
se
Un
en
El
Todos
los
se

4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Transformación vegetal y caracterización molecular de
los transgénicos.
Plantas transgénicas mostraron un efecto específico
en la expresión de genes de defensa.
CONCLUSIONES
total, de 29 líneas PR y 29 líneas PRx fueron positivas en el
análisis PCR, todos los transformantes positivos se transfi
rieron in vivo en invernadero.
Un
banda de proteína con un peso molecular aparente de
37 kDa se detectó en controles positivos de tomate.
bandas de proteínas se observó en plantas de papa no
transformada
terminal N de prosistemina también juega un rol en la
activación de algunos genes de defensa en papa
sugieren que la
líneas transgénicas de papa mostraron una sobre
expresión en Lox3
Las dos
La expresión del
gen prosistemina en papa
afecta los genes relacionados con respuesta
a patógenos como GluB2 y PR1b.
no
genes de las prosisteminas endógenas relacionadas
con el mecanismo de defensa, Prosys y ProHypSys
fueron afectados por el transgen
los
no
Una
Ninguna de las dos
Link de artículo: http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S2307-
96062013000100003&lng=es&nrm=iso