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Transcripción y Traducción
La herencia. Genética molecular.

• La transcripción: síntesis y
  procesamiento (maduración) del ARN.
• Mecanismo general de la transcripción:
  las ARN polimerasas y los promotores.
• La reversotranscripción.
• El código genético: características
  generales y pruebas experimentales.
• Mecanismo general de la traducción.
  Regulación de la expresión génica.
Criterios de evaliación
• Explicar el papel del ADN como portador
  de la información genética, la naturaleza
  del código genético y la relación con la
  síntesis de las proteínas.
Transcripción en procariotas
• ADN           ARNm en el citoplasma
• Catalizado por el enzima ARN polimerasa
  5‘        3‘
• Reconocimiento de la región promotora
  en el ADN
• A partir del ARNm de sintetizan ARNr y
  ARNt
• Simultáneamente se produce la
  traducción
Un neutrófilo y bacterias Gram +.
La transcripción: Síntesis de ARN.




                                                         3’
5’                              ARNpolimerasa




3’                                                       5’
                    A   U G U    G C G G C U G C
                    T   A C A    C G C C G A C G




     (i)                                           ARN
                                                   ADN
• ELONGACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN
• TERMINACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN




en E. coli
Transcripción en eucariotas
• ADN          ARNm en el núcleo
• Hay 3 tipos de ARN polimerasas: I, II, III
• ARN polimerasa I: ARNr de la subunidad
  grande
• ARN polimerasa II: ARNm
• ARN polimerasa III: ARNt y ARNr de la
  subunidad pequeña
Región promotora: TATA o CAAT
Tras 30 nucleótidos se añade a 5´ una “caperuza”
formada por 7-metil guanosina triP Para la traducción
Existe un final (TTATTT)
En 3´se añade cola poliA por poli A polimerasa
Transcripción:
1- Iniciación: Una ARN‑polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a
partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso " que se encuentran
en el ADN.




                                   ARNpolimerasa




           T   A   C   G   A   A    C    C   G     T   T   G   C   A   C   A   T   C
           A   U   G C     U   U     G   G C       A   A   C   G   U   G
Transcripción:
2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'→3'. Después
de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de
metil‑GTP en el extremo 5‘ con función protectora.




                                                           ARNpolimerasa




           T   A   C   G   A   A   C   C   G   T   T   G   C    A   C   A   T   C
           A   U   G C     U   U   G   G C     A   A   C    G   U   G




   m-GTP
Transcripción:
3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región
terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA‑polimerasa
añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado
ahora ARNm precursor, se libera.




                                                poliA-polimerasa




m-GTP     A   U   G C   U      C   G   U   G   U   A    G    A     A   A   A   A



ARNm precursor
4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se
trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea
traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de
maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las
ARN‑ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro.




                  Cabeza                                              cola
  ARNm                                                              AAAAAA
  maduro
  precursor             AUG                                   UAG
Maduración del ARNm (Visión de conjunto).




                                Región codificadora del gen

 ADN
       Promotor         E1    I1      E2        I2        E3                   Terminador


                      TAC                                              ATC



                  Cabeza E1     I1         E2        I2        E3            cola
  ARNm                                                                       AAAAAA
  precursor            AUG                                            UAG




                       Cabeza                                       cola
   ARNm
   maduro                                                       AAAAAA
                             AUG                          UAG
Los ARNm eucariontes maduros, poseen una capucha que es agregada enzimáticamente
          y que consiste de un residuo de 7-metilguanosina unido en el extremo inicial (5´) por un enlace trifosfato
 (5´-5´):




                                                                         Figura: representación de la capucha del ARNm.




Adición de la caperuza. Un nucleótido G modificado, denominado caperuza, se
adiciona al extremo 5' de la mayoría de los ARNm.La caperuza se mantiene en el
ARNm y su función está relacionada con la unión al ribosoma y la estabilidad del
ARNm.
Poliadenilación del extremo 3'. Una cola de nucleótidos A, generalmente de
100-200 bases de longitud, se adiciona al extremo 3' de la mayoría de preARNm
eucarióticos. La cola poli(A), que no está codificada en el ADN, se mantiene
también en el ARNm que se exporta al citoplasma (su función es transportar al
ARNm al citoplasma).
El transcrito primario del gen de la ovoalbúmina de pollo tiene 7700 nucleótidos
de longitud, pero el ARNm maduro traducido en el ribosoma tiene sólo 1872 nucleótidos.
Hibridación del ADN del gen de la ovoalbumina
con el ARN mensajero maduro (ARN-m)
Autoprocesamiento de un intrón
Animación de transcripción y traducción McGraw-Hill




  http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120077/bio25.swf
Maduración
Transcripción inversa
EL CÓDIGO GENÉTICO
• El código genético: características
  generales.
• Mencionar la existencia de algunas
  excepciones al código genético
  (mitocondrias y ciliados) pero dejando
  clara la universalidad del mismo.
• Comentar la aportación de Severo Ochoa.
• No hay que memorizar ningún triplete.
Definición código genético


Es la regla de correspondencia
que existe entre la secuencia
de bases del ARN con la
secuencia de aminoácidos en
las proteínas.
El código genético tiene una serie de características:

 Es universal, pues lo utilizan casi todos los seres vivos conocidos. Solo
  existen algunas excepciones en unos pocos tripletes en bacterias.

 No es ambigüo, pues cada triplete tiene su propio significado

 Todos los tripletes tienen sentido, bien codifican un aminoácido o bien
  indican terminación de lectura.

 Es degenerado, pues hay varios tripletes para un mismo aminoácido, es
  decir hay codones sinónimos.

 Carece de solapamiento, es decir los tripletes no comparten bases
  nitrogenadas.

 Es unidireccional, pues los tripletes se leen en el sentido 5´-3´.

            http://www.ucm.es/info/genetica/AVG/problemas/Codigen.htm
• Usos incorrectos.La expresión "código genético"
  es frecuentemente utilizada en los medios de
  comunicación como sinónimo de genoma, de
  genotipo, o de ADN. Frases como "Se analizó el
  código genético de los restos y coincidió con el
  de la desaparecida", o "se creará una base de
  datos con el código genético de todos los
  ciudadanos" son científicamente absurdas.
Excepciones a la Universalidad del Código



                                                            Significado en
                                        Significado en
                                                                 Código
Organismo                Codón               Código
                                                              Mitocondria
                                            Nuclear
                                                                     l
Todos                     UGA                 FIN                  Trp
Levadura                  CUX                 Leu                 Thr
Drosophila                AGA                 Arg                  Ser
Humano, bovino         AGA, AGC               Arg                 FIN
                                                                   Met
Humano, bovino            AUA                  Ile
                                                                (iniciación)
                      AUU, AUC,                                    Met
Ratón                                          Ile
                         AUA                                    (iniciación)

 El código genético mitocondrial es la única excepción a la universalidad del
 código, de manera que en algunos organismos los aminoácidos determinados
 por el mismo triplete o codón son diferentes en el núcleo y en la mitocondria.
Severo Ochoa                            The Nobel Prize in
                                        Physiology or Medicine 1959


    "for their discovery of the mechanisms in the biological synthesis of
    ribonucleic acid and deoxyribonucleic acid"




                                                           Arthur Kornberg
LA TRADUCCIÓN
• La Traducción: mecanismo general. Hay que hablar
  de la activación de los aminoácidos y de su unión al
  ARNt (muy breve pero citar las aminoacil-ARNt
  sintetasas). Explicar claramente el concepto de unión
  codon-anticodon.
• Somera descripción de las 3 fases da traducción:
  iniciación, elongación y terminación.
• Dos detalles importantes: la traducción empieza en
  el extremo 5' del ARNm y todas las proteínas
  inicialmente tienen como primer aminoácido Met
  debido a que viene codificado por AUG (codón de
  iniciación).
• Se puede comentar que la acción antibacteriana de
  determinados antibióticos es debida a su inhibición
  de la traducción.
RIBOSOMAS
Subunidad grande
                         Subunidad pequeña




                               3'




                        ARNm
                   5'
Primera imagen tridimensional de u
Premio Nobel Química 2009




El indio Venkatraman Ramakrishkan,
el estadounidense Thomas A. Steiltz
y la israelí Ada Yonath
   Estos tres científicos, que curiosamente nunca han trabajado juntos,

    consiguieron descubrir cómo se producen las proteínas en las células. Lo

    consiguieron a través de la cristalografía de los rayos X, conociendo al

    estructura en tres dimensiones del ribosoma, la encargada de que en la célula

    se fabriquen las proteínas.

   Como siempre, los premios Nobel premian a aquellas personas que han

    contribuido significativamente al bienestar de la sociedad, y gracias a los

    trabajos de estos tres científicos ahora se sabe cómo actúan los antibióticos

    en las células de las bacterias, lo que es un primer paso para luchar contra la

    preocupante resistencia bacteriana contra los fármacos.

   Sus investigaciones han ayudado a conocer las diferencias entre los

    ribosomas de las células bacterianas y las humanas, por lo que gracias a este

    hallazgo ahora es posible diseñar nuevos antibióticos que atacan únicamente

    a los organismos peligrosos.
Ribosomes and Polyribosomes - liver cell (TEM x173,400)

                                       www.DennisKunkel.com
Rough Endoplasmic Reticulum with Ribosomes (TEM x61,560).
The endoplasmic reticulum. Rough endoplasmic reticulum is on the left,
smooth endoplasmic reticulum is on the right.
Estructura del ARN de transferencia
• Hay que hablar de la activación de los aminoácidos y
   su unión al ARNt (muy breve pero citar las
   aminoacil-ARNt sintetasas).



El aminoácido se liga a su correspondiente ARNt por la acción
de una enzima llamada aminoacil-ARNt sintetasa, que cataliza la unión



 Existen 20 amínoacil – ARNt sintetasas diferentes


Por ejemplo, leucinil-ARNtLeu, lisinil-ARNtlys, fenilalanil-ARNtPhe.
metionil-ARNtMet, etcétera.




                          http://www.maph49.galeon.com/sinte/addaa.html
Síntesis de proteinas




http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120077/micro06.swf




http://www2.uah.es/biomodel/biomodel-misc/anim/inicio.htm#transcri



  http://www.maph49.galeon.com/sinte/initani.html
   http://www.maph49.galeon.com/sinte/elongani.html
• Se puede comentar que la acción antibacteriana de determinados
antibióticos es debida a su inhibición de la traducción

•    Los antibióticos son sustancias, generalmente producidas por
     microorganismos, que tienen la capacidad de inhibir el crecimiento
     bacteriano (bacteriostáticos) o de matar a las bacterias
     (bactericidas)
•    Se conoce una gran variedad de antibióticos y se sabe que actúan
     mediante uno o más modos de acción:


1.   Inhibiendo la síntesis de la pared celular (penicilina, bacitracina)
2.   Interfiriendo la síntesis de ácidos nucleicos (actinomicina D, griseofluvina)
3.   Deteriorando la membrana celular (polimixinas)
4.   Inhibiendo la síntesis de proteinas (cloranfenicol, estreptomicina,
     eritromicina, tetraciclina)
            - se unen a la subunidad 30s
            - se unen a la subunidad 50s
            - interfieren a los factores de elongación

                                http://pathmicro.med.sc.edu/Spanish/chapter6.htm
En procariotas :
         • transcripción-traducción acopladas
         • ausencia de intrones
         • Expresión génica se regula principalmente en la
         transcripción

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Transcripción y traducción

  • 2. La herencia. Genética molecular. • La transcripción: síntesis y procesamiento (maduración) del ARN. • Mecanismo general de la transcripción: las ARN polimerasas y los promotores. • La reversotranscripción. • El código genético: características generales y pruebas experimentales. • Mecanismo general de la traducción. Regulación de la expresión génica.
  • 3. Criterios de evaliación • Explicar el papel del ADN como portador de la información genética, la naturaleza del código genético y la relación con la síntesis de las proteínas.
  • 4. Transcripción en procariotas • ADN ARNm en el citoplasma • Catalizado por el enzima ARN polimerasa 5‘ 3‘ • Reconocimiento de la región promotora en el ADN • A partir del ARNm de sintetizan ARNr y ARNt • Simultáneamente se produce la traducción
  • 5.
  • 6. Un neutrófilo y bacterias Gram +.
  • 7. La transcripción: Síntesis de ARN. 3’ 5’ ARNpolimerasa 3’ 5’ A U G U G C G G C U G C T A C A C G C C G A C G (i) ARN ADN
  • 8.
  • 9.
  • 10. • ELONGACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN • TERMINACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN en E. coli
  • 11. Transcripción en eucariotas • ADN ARNm en el núcleo • Hay 3 tipos de ARN polimerasas: I, II, III • ARN polimerasa I: ARNr de la subunidad grande • ARN polimerasa II: ARNm • ARN polimerasa III: ARNt y ARNr de la subunidad pequeña
  • 12. Región promotora: TATA o CAAT Tras 30 nucleótidos se añade a 5´ una “caperuza” formada por 7-metil guanosina triP Para la traducción Existe un final (TTATTT) En 3´se añade cola poliA por poli A polimerasa
  • 13. Transcripción: 1- Iniciación: Una ARN‑polimerasa comienza la síntesis del precursor del ARN a partir de unas señales de iniciación "secuencias de consenso " que se encuentran en el ADN. ARNpolimerasa T A C G A A C C G T T G C A C A T C A U G C U U G G C A A C G U G
  • 14. Transcripción: 2. Alargamiento: La síntesis de la cadena continúa en dirección 5'→3'. Después de 30 nucleótidos se le añade al ARN una cabeza (caperuza o líder) de metil‑GTP en el extremo 5‘ con función protectora. ARNpolimerasa T A C G A A C C G T T G C A C A T C A U G C U U G G C A A C G U G m-GTP
  • 15. Transcripción: 3- Finalización: Una vez que la enzima (ARN polimerasa) llega a la región terminadora del gen finaliza la síntesis del ARN. Entonces, una poliA‑polimerasa añade una serie de nucleótidos con adenina, la cola poliA, y el ARN, llamado ahora ARNm precursor, se libera. poliA-polimerasa m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A ARNm precursor
  • 16. 4. Maduración (cont.): El ARNm precursor contiene tanto exones como intrones. Se trata, por lo tanto, de un ARNm no apto para que la información que contiene sea traducida y se sintetice la correspondiente molécula proteica. En el proceso de maduración un sistema enzimático reconoce, corta y retira los intrones y las ARN‑ligasas unen los exones, formándose el ARNm maduro. Cabeza cola ARNm AAAAAA maduro precursor AUG UAG
  • 17. Maduración del ARNm (Visión de conjunto). Región codificadora del gen ADN Promotor E1 I1 E2 I2 E3 Terminador TAC ATC Cabeza E1 I1 E2 I2 E3 cola ARNm AAAAAA precursor AUG UAG Cabeza cola ARNm maduro AAAAAA AUG UAG
  • 18. Los ARNm eucariontes maduros, poseen una capucha que es agregada enzimáticamente y que consiste de un residuo de 7-metilguanosina unido en el extremo inicial (5´) por un enlace trifosfato (5´-5´): Figura: representación de la capucha del ARNm. Adición de la caperuza. Un nucleótido G modificado, denominado caperuza, se adiciona al extremo 5' de la mayoría de los ARNm.La caperuza se mantiene en el ARNm y su función está relacionada con la unión al ribosoma y la estabilidad del ARNm.
  • 19. Poliadenilación del extremo 3'. Una cola de nucleótidos A, generalmente de 100-200 bases de longitud, se adiciona al extremo 3' de la mayoría de preARNm eucarióticos. La cola poli(A), que no está codificada en el ADN, se mantiene también en el ARNm que se exporta al citoplasma (su función es transportar al ARNm al citoplasma).
  • 20. El transcrito primario del gen de la ovoalbúmina de pollo tiene 7700 nucleótidos de longitud, pero el ARNm maduro traducido en el ribosoma tiene sólo 1872 nucleótidos.
  • 21.
  • 22. Hibridación del ADN del gen de la ovoalbumina con el ARN mensajero maduro (ARN-m)
  • 24. Animación de transcripción y traducción McGraw-Hill http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120077/bio25.swf
  • 27. EL CÓDIGO GENÉTICO • El código genético: características generales. • Mencionar la existencia de algunas excepciones al código genético (mitocondrias y ciliados) pero dejando clara la universalidad del mismo. • Comentar la aportación de Severo Ochoa. • No hay que memorizar ningún triplete.
  • 28.
  • 29. Definición código genético Es la regla de correspondencia que existe entre la secuencia de bases del ARN con la secuencia de aminoácidos en las proteínas.
  • 30. El código genético tiene una serie de características:  Es universal, pues lo utilizan casi todos los seres vivos conocidos. Solo existen algunas excepciones en unos pocos tripletes en bacterias.  No es ambigüo, pues cada triplete tiene su propio significado  Todos los tripletes tienen sentido, bien codifican un aminoácido o bien indican terminación de lectura.  Es degenerado, pues hay varios tripletes para un mismo aminoácido, es decir hay codones sinónimos.  Carece de solapamiento, es decir los tripletes no comparten bases nitrogenadas.  Es unidireccional, pues los tripletes se leen en el sentido 5´-3´. http://www.ucm.es/info/genetica/AVG/problemas/Codigen.htm
  • 31. • Usos incorrectos.La expresión "código genético" es frecuentemente utilizada en los medios de comunicación como sinónimo de genoma, de genotipo, o de ADN. Frases como "Se analizó el código genético de los restos y coincidió con el de la desaparecida", o "se creará una base de datos con el código genético de todos los ciudadanos" son científicamente absurdas.
  • 32. Excepciones a la Universalidad del Código Significado en Significado en Código Organismo Codón Código Mitocondria Nuclear l Todos UGA FIN Trp Levadura CUX Leu Thr Drosophila AGA Arg Ser Humano, bovino AGA, AGC Arg FIN Met Humano, bovino AUA Ile (iniciación) AUU, AUC, Met Ratón Ile AUA (iniciación) El código genético mitocondrial es la única excepción a la universalidad del código, de manera que en algunos organismos los aminoácidos determinados por el mismo triplete o codón son diferentes en el núcleo y en la mitocondria.
  • 33. Severo Ochoa The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1959 "for their discovery of the mechanisms in the biological synthesis of ribonucleic acid and deoxyribonucleic acid" Arthur Kornberg
  • 34. LA TRADUCCIÓN • La Traducción: mecanismo general. Hay que hablar de la activación de los aminoácidos y de su unión al ARNt (muy breve pero citar las aminoacil-ARNt sintetasas). Explicar claramente el concepto de unión codon-anticodon. • Somera descripción de las 3 fases da traducción: iniciación, elongación y terminación. • Dos detalles importantes: la traducción empieza en el extremo 5' del ARNm y todas las proteínas inicialmente tienen como primer aminoácido Met debido a que viene codificado por AUG (codón de iniciación). • Se puede comentar que la acción antibacteriana de determinados antibióticos es debida a su inhibición de la traducción.
  • 36.
  • 37. Subunidad grande Subunidad pequeña 3' ARNm 5'
  • 39. Premio Nobel Química 2009 El indio Venkatraman Ramakrishkan, el estadounidense Thomas A. Steiltz y la israelí Ada Yonath
  • 40. Estos tres científicos, que curiosamente nunca han trabajado juntos, consiguieron descubrir cómo se producen las proteínas en las células. Lo consiguieron a través de la cristalografía de los rayos X, conociendo al estructura en tres dimensiones del ribosoma, la encargada de que en la célula se fabriquen las proteínas.  Como siempre, los premios Nobel premian a aquellas personas que han contribuido significativamente al bienestar de la sociedad, y gracias a los trabajos de estos tres científicos ahora se sabe cómo actúan los antibióticos en las células de las bacterias, lo que es un primer paso para luchar contra la preocupante resistencia bacteriana contra los fármacos.  Sus investigaciones han ayudado a conocer las diferencias entre los ribosomas de las células bacterianas y las humanas, por lo que gracias a este hallazgo ahora es posible diseñar nuevos antibióticos que atacan únicamente a los organismos peligrosos.
  • 41. Ribosomes and Polyribosomes - liver cell (TEM x173,400) www.DennisKunkel.com
  • 42. Rough Endoplasmic Reticulum with Ribosomes (TEM x61,560).
  • 43. The endoplasmic reticulum. Rough endoplasmic reticulum is on the left, smooth endoplasmic reticulum is on the right.
  • 44. Estructura del ARN de transferencia
  • 45.
  • 46. • Hay que hablar de la activación de los aminoácidos y su unión al ARNt (muy breve pero citar las aminoacil-ARNt sintetasas). El aminoácido se liga a su correspondiente ARNt por la acción de una enzima llamada aminoacil-ARNt sintetasa, que cataliza la unión Existen 20 amínoacil – ARNt sintetasas diferentes Por ejemplo, leucinil-ARNtLeu, lisinil-ARNtlys, fenilalanil-ARNtPhe. metionil-ARNtMet, etcétera. http://www.maph49.galeon.com/sinte/addaa.html
  • 47. Síntesis de proteinas http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120077/micro06.swf http://www2.uah.es/biomodel/biomodel-misc/anim/inicio.htm#transcri http://www.maph49.galeon.com/sinte/initani.html http://www.maph49.galeon.com/sinte/elongani.html
  • 48.
  • 49.
  • 50.
  • 51. • Se puede comentar que la acción antibacteriana de determinados antibióticos es debida a su inhibición de la traducción • Los antibióticos son sustancias, generalmente producidas por microorganismos, que tienen la capacidad de inhibir el crecimiento bacteriano (bacteriostáticos) o de matar a las bacterias (bactericidas) • Se conoce una gran variedad de antibióticos y se sabe que actúan mediante uno o más modos de acción: 1. Inhibiendo la síntesis de la pared celular (penicilina, bacitracina) 2. Interfiriendo la síntesis de ácidos nucleicos (actinomicina D, griseofluvina) 3. Deteriorando la membrana celular (polimixinas) 4. Inhibiendo la síntesis de proteinas (cloranfenicol, estreptomicina, eritromicina, tetraciclina) - se unen a la subunidad 30s - se unen a la subunidad 50s - interfieren a los factores de elongación http://pathmicro.med.sc.edu/Spanish/chapter6.htm
  • 52. En procariotas : • transcripción-traducción acopladas • ausencia de intrones • Expresión génica se regula principalmente en la transcripción

Notas del editor

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