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UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL
INFORME DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
“EXTRACCIÓN DE ADN DE UN PLÁTANO ”
DOCENTE: Blgo. Soto Gonzales, Hebert Hernan
CURSO: BIOTECNOLOGÍA
CICLO: VII
PRESENTADO POR:
Arocutipa Ticona, Miriam Elizabeth
Cuela Camacho Agustin Junior
Mamani Alvarez, Olenka Fiorella
Sosa Pino, Flavia Andreina
Távara Lira, Mayra Geraldine
10 de Julio del 2023
ILO - MOQUEGUA
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RESUMEN.
La extracción del ADN en muchos casos llega a ser compleja por su forma, metodología y
estructura, los métodos más sofisticados requieren de materiales de laboratorio complejos y de
alto estudio y análisis, pero también hay maneras más básicas y sencillas de poder analizar ADN
y reconocer el mismo de diferentes productos celulósicos. Es por eso, que en el presente informe
se elaborará la extracción del ADN del plátano utilizando materiales como alcohol, filtros, sal de
cocina, detergente, gasa, agua destilada y algunos recipientes como mortero, tubos de ensayo
entre otros, esto nos ayudará a obtener la estructura del ADN y poder visualizarlo en forma
ramificada.
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INDICE
RESUMEN...................................................................................................................................................2
INDICE.........................................................................................................................................................3
1. INTRODUCCIÓN...................................................................................................................................3
2. OBJETIVOS ...........................................................................................................................................4
2.1. Objetivo General ..........................................................................................................................4
2.2. Objetivo Especifico ......................................................................................................................4
3. MARCO TEORICO................................................................................................................................4
3.1. ¿Qué es el ADN?.........................................................................................................................4
3.2. Importancia del ADN ...................................................................................................................5
3.3. ADN de las frutas.........................................................................................................................5
3.3.1. ADN del plátano .................................................................................................................6
3.4. Método de Extracción del ADN de un plátano.........................................................................6
3.4.1. Elección del material vegetal............................................................................................6
3.4.2. Ruptura de tejidos, paredes y membranas celulares ...................................................7
3.4.3. Eliminación de proteínas y lípidos...................................................................................7
4. EQUIPOS Y MATERIALES .................................................................................................................8
5. PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................12
Paso 1: Preparación de solución salina- jabonosa.......................................................................12
Paso 2: Preparación de la fruta.......................................................................................................13
Paso 3: Adición de la solución de sal y detergente a la fruta .....................................................14
Paso 4: Separación del material sólido, proteínas y lípidos........................................................14
Paso 5: Precipitación del ADN por acción del alcohol.................................................................15
6. RESULTADOS.....................................................................................................................................15
7. DISCUSIÓN DE RESULTADOS.......................................................................................................15
8. CONCLUSIONES................................................................................................................................16
9. RECOMENDACIONES.......................................................................................................................17
10. CUESTIONARIO ...............................................................................................................................17
11. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ..............................................................................................18
12. ANEXOS.............................................................................................................................................18
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1. INTRODUCCIÓN.
El ADN es una molécula que almacena las “instrucciones” que dirigen el
desarrollo de cualquier ser vivo y que es portadora a su vez de la información hereditaria.
Se trata de una molécula de proporciones gigantescas comparada con el tamaño
celular y a su vez está formado por dos cadenas antiparalelas y complementarias
formadas por la sucesión de desoxirribonucleótidos.
Estos nucleótidos a su vez están compuestos cada uno por un monosacárido
(pentosa: desoxirribosa), una molécula de ácido fosfórico, y una basa nitrogenada que
puede ser: Guanina, citosina, adenina o timina. Las moléculas de ácido fosfórico y
desoxirribosa se unen y quedan hacia fuera formando el “esqueleto externo” de azúcar
fosfato, mientras que las bases quedarán enfrentadas internamente con las de la cadena
complementaria apareando A-T y C-G, lo que constituye realmente la información
genética; la sucesión o secuencia de bases nitrogenadas de una cadena.
2. OBJETIVOS.
2.1. Objetivo General.
● Demostrar el ADN del plátano por medio de un experimento
convencional.
2.2. Objetivos Específicos.
● Utilizar materiales convencionales para la extracción del ADN.
● Analizar la estructura del ADN del plátano.
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3. MARCO TEORICO.
3.1. ¿Qué es el ADN?
El ADN (ácido desoxirribonucleico), es aquella molécula la cual transporta la
información genética para el desarrollo y funcionamiento de un organismo . En el caso de
las personas el ADN se encuentra en el núcleo celular, pero también se puede encontrar
una pequeña parte en las mitocondrias. El ADN está compuesto por dos cadenas
complementarias que se enrollan entre sí y se adapta una forma tipo escalera de caracol,
esta forma es conocida como doble hélice. Cada hebra tiene una estructura principal que
está compuesta por grupos alternados de azúcar (desoxirribosa) y fosfato. Unida a cada
azúcar se encuentran cuatro bases químicas: adenina (A), guanina (G), citosina (C) y
timina (T). El orden en que se combinan una después de la otra, es lo que codifica la
información genética. El ADN se organiza estructuralmente en cromosomas. A nivel
funcional este se organiza en genes, los cuales son piezas de ADN que generan
características físicas específicas, estas características no vienen directamente del propio
ADN, sino de una molécula llamada ARN, formada a partir del ADN, y codifica una
proteína. Esto es lo que podemos llamar el punto esencial de la biología molecular: en el
ADN hay genes que generan ARNs mensajeros, y estos generan proteínas. Esta es la
razón de las diferentes características físicas que se observan en los individuos (color de
ojos, altura, etc).
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3.2. Importancia del ADN
El ADN es de suma importancia debido a las funciones que cumple como el hecho de que
ayuda a las células a producir proteínas, las cuales son necesarias para poder sobrevivir, y
también facilita la reproducción. La información que contiene el ADN es altamente
valiosa e importancia, ya que todos los seres vivos lo almacenan en el núcleo de las
células. El ADN se mantiene siempre dentro del núcleo y solo envía copias (ARN
mensajero) en forma de instrucciones individuales. La secuencia de letras que contiene es
importante y si esta es alterada de alguna manera puede generar mutaciones genéticas,
dando origen a proteínas no funcionales que conducen al desarrollo de enfermedades de
origen hereditario. Otra razón por la cual es importante el ADN es referente a la
reproducción celular, debido a que es capaz de reparar daños en el propio material
genético y se adapta a los organismo de su entorno, uniéndose a la expresión física que
los genes indican que debe tener cada especie.
3.3. ADN de las frutas.
El ADN que se encuentra tanto en frutas o verduras las cuales comemos a diario, es
utilizado para poder identificar inequívocamente la especie o variedad de qué se trata o
incluso identificar la decencia del individuo. En la industria alimentaria el ADN es de
vital importancia debido a que ayuda a detectar posibles fraudes en el caso de que se trate
de zumos o de mezclas de carnes o pescado.
3.3.1. ADN del plátano.
El plátano comenzó a domesticarse hace 7000 años en un país de Asia, no se sabe
cuál exactamente. En la actualidad más de la mitad de los plátanos que se comercializan
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no contienen semillas y no se reproducen de manera secual, lo cual hace que se vuelvan
más vulnerables a los hongos o diferentes parásitos. Es la razón por la cual, diferentes
investigadores consideran importancia desarrollar variedades de plátanos que sean
nuevos y más persistentes, algo que contribuirá al nuevo genoma. La secuenciación del
genoma del plátano permitirá, asimismo, identificar los genes responsables de las
características claves como la calidad de la fruta y la resistencia a los pesticidas.
3.4. Método de Extracción del ADN de un plátano.
Para poder realizar la extracción de ADN en un plátano (Musa) es necesario seguir una
secuencia rigurosamente para poder concretar con éxito la extracción del ADN del
plátano, a continuación se presenta los pasos a seguir:
3.4.1. Elección del material vegetal.
Como primer paso es elegir el material vegetal que se usara para la debida
extraccion de ADN, en este caso utilizamos el platano o Musa, fruta la cual
presenta diferentes cualidades que varian, como el tamaño, color y firmeza, de
forma alargada generalmente curvado y carnoso, rico en almidon se encuentra
cubierto con una cascara que puede variar su color entre verde, amarillo, marron,
etc. Casi todos los platanos en la actualidad son frutos estériles que no producen
semillas fructificantes y provienen de dos especies silvestres: Musa acuminata y
Musa balbisiana. El plátano o banana presenta 11 cromosomas y la mayoría es
triploide.
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3.4.2. Ruptura de tejidos, paredes y membranas celulares.
Como segundo paso tenemos la ruptura de tejidos esto se realizará mediante la
fricción con el mortero, donde se romperán las uniones entre las células y la pared
celular. Esta homogeneización va a facilitar el efecto de ruptura el cual ayuda a
liberar todo el material genético.
El detergente líquido ayuda a romper las membranas celular, que se encuentran
compuestas por lípidos. Las moléculas del detergente ayuda a romper las
membranas celulares y liberan el ADN del núcleo
3.4.3. Eliminación de proteínas y lípidos.
Tanto el material fibroso y las proteínas son separadas del ADN mediante la
filtración, una vez eliminados los lípidos y proteínas, los grupos fosfato del ADN
están cargados negativamente y son polares. El ADN es insoluble en alcohol.
La adición de alcohol y las altas concentración de iones de Na que se unen a los
grupos fosfato, reduce las fuerzas repulsivas entre las cadenas y permite que el
ADN se pliega sobre sí mismo haciéndolo insoluble. De esta manera precipita y
forma una malla filamentosa blanquecina donde se encuentran las proteínas y
otros materiales
4. EQUIPOS Y MATERIALES.
MATERIALES PARA LA PRÁCTICA
NOMBRE IMAGEN
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Balanza Analitica
5. PROCEDIMIENTO.
Paso 1: Preparación de solución salina- jabonosa.
- Preparamos una solución jabonosa compuesta con 100 ml de agua y 10 ml de
detergente.
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- Pesamos 13 gr de NaCl o sal de cocina
- Juntamos la sal pesada junto con la solución jabonosa
Paso 2: Preparación de la fruta.
- El plátano lo picamos y lo empezamos a triturar en el mortero.
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Paso 3: Adición de la solución de sal y detergente a la fruta.
- En el mortero con la fruta triturada, vertemos la solución jabonosa y continuamos
con el proceso de romper la fruta.
Paso 4: Separación del material sólido, proteínas y lípidos.
- Una vez triturado el plátano junto con la solución, pasamos a colar con ayuda de un
colador y papel filtro o gasa, para poder retirar lo grueso de la fruta, y hacemos esto para
obtener el líquido filtrado.
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Paso 5: Precipitación del ADN por acción del alcohol.
- Una vez obtenido el líquido filtrado, vertemos a un tubo de ensayo, donde echaremos el
alcohol previamente congelado, el cual tiene que verterse en las paredes del tubo.
Dejamos reportar y obtendremos una capa blanquecina gelatinosa.
6. RESULTADOS.
Es posible extraer el ADN de células vegetales, de la célula animal y dentro de ella hay
otras células de las cuales también se puede extraer ADN como las células epiteliales,
células óseas, células musculares, células bucales, células elitroides nucleadas.
El procedimiento para la obtención del ADN es sencillo pero de mucho cuidado ya que
por movimientos bruscos en el momento de macerar la fruta (plátano) se puede producir
una ruptura del ADN, de la misma manera se debe de tener cuidado cuando se adiciona el
líquido de extracción (mezcla de H2O, detergente y sal) de ADN (utilizado para realizar
la lisis). El detergente es utilizado para romper la membrana plástica y permitir llegar más
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fácil al núcleo donde se encuentra el ADN y extraerlo es un dato importante mientras se
realiza este procedimiento es recomendable no generar burbujas ya que si se produce
oxígeno causa daños en el ADN y limita la extracción, y la sal al ser un electrolito fuerte,
disminuye la solubilidad de las proteínas, debido a esto se emplea para romper las
cadenas de proteínas que unen los ácidos nucleicos liberando las cadenas de ADN.
El ADN es soluble en agua pero al ponerse en contacto con el alcohol, este polinucleótido
se intenta desenrollar y cae hasta encontrarse con el alcohol y el agua, estas dos
sustancias tienen densidades diferentes, si el alcohol está frío, aumenta más la
insolubilidad, además, el alcohol se utiliza para purificar el ADN.
Seguido a todo la metodología obtuvimos los siguientes resultados:
Imagen: Resultado de la muestra “1”. ADN nuclear del plátano con 11 cromosomas.
Fuente: Elaboración propia.
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Imagen: Resultado de la muestra “2”. ADN nuclear del plátano con 11 cromosomas.
Fuente: Elaboración propia.
Imagen: Resultado de la muestra “3”. ADN nuclear del plátano con 11 cromosomas.
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Fuente: Elaboración propia.
Imagen: Vista de las muestras realizadas.
Fuente: Elaboración propia.
7. DISCUSIÓN DE RESULTADOS.
Como se puede visualizar y entender por los párrafos anteriores se pudo realizar la
evaluación de extracción del ADN de una manera casera en el caso del plátano y de la
fresa, según lo que se puede observar en ambos casos hay precipitación del ADN lo que
es un indicador cualitativo de que si se pudo conseguir la extracción de manera adecuada,
sin embargo también se puede realizar otro tipo de acciones ante esta extracción como lo
es pasarlo por un proceso de electroforesis ,para que de esta manera se pueda repotenciar
los resultados obtenidos ya que la electroforesis es una técnica de laboratorio que se usa
para separar moléculas de ADN, ARN o proteínas en función de su tamaño y carga
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eléctrica. Se usa una corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel o de
otra matriz.
Así mismo podemos ver las interfases que se forman en el tubo a raíz del proceso
realizado el cual es que se separe lo que el ADN de lo que vendría a ser la proteína tal
como señalo en la imagen mostrada
8. CONCLUSIONES.
● Todas las plantas, animales e incluso los microorganismos tienen ADN, las frutas
también son organismos vivos, entonces usamos fruta como plátanos porque son
triploides, es decir que cada célula de plátano tiene tres conjuntos de ADN por lo que hay
mucho disponible para la extracción. El ADN contiene las instrucciones necesarias para
que un organismo se desarrolle, sobreviva y se reproduzca .
● En nuestro caso utilizamos maduro pero no demasiado al límite, ya que debido a que el
ADN se almacena en las células, la cantidad de ADN extraíble en la fruta disminuye a
medida que las células se destruyen en el proceso de maduración.
● El principal objetivo del detergente fue ayudar a liberar el ADN, es decir ayuda a separar
las membranas (la "piel" externa) que mantienen unidas a las células. Estas membranas
están hechas de un tipo de molécula llamada lípidos. Bien se sabe que los lípidos son
grasas y aceites,entonces el detergente "corta la grasa" porque en realidad separa esas
moléculas grasosas entre sí. Entonces, la membrana celular y los núcleos se rompen,
liberando el ADN. Luego la sal ayudará a que las hebras de ADN se adhieran entre sí en
grupos lo suficientemente grandes como para que podamos verlos.
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● Los grupos de ADN son solubles (se pueden disolver) en algunos líquidos. La adición
del alcohol tuvo como objetivo evitar que esta acción se logre. Entonces, ayuda a que se
formen grupos de ADN. De esta manera se puede extraer fácilmente el ADN de plátano.
9. RECOMENDACIONES.
● El procedimiento y lo que se realiza como la adición de alcohol y detergente permite la
precipitación del ADN
● Para hacer el ADN podemos utilizar cosas que tenemos en casa como plátano, sal,
detergente líquido , colador y alcohol
● El ´proceso que se realizó para la extracción del ADN es sencillo y fácil de realizar con
elementos que podemos tener en casa
● Es importante y muy útil aprender cómo se debe de realizar la extracción del ADN y
entender un poco más en relación al fundamento teórico que posee el mismo.
● Para el experimento se utilizó una solución de extracción el cual fue el jabón que ayuda a
disolver las membranas celulares y se añade la sal para romper las cadenas de proteínas
que unen los ácidos nucleicos liberando las cadenas de ADN. alcohol se utilizó porque el
ADN es insoluble y si está frío es mejor
10. CUESTIONARIO.
a) ¿Cuál es el papel de la trituración?
Con el triturado se produce una ruptura del ADN, y a ello la extracción del mismo. Ya
que el proceso consiste en romper las células y liberar el material genético existente en su
interior, como el ADN, entre otros.
b) ¿Cuál es el papel de la adición del detergente?
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Es utilizado para romper la membrana plasmática y permitir llegar más fácil al núcleo
donde se encuentra el ADN. También el romper las membranas plasmáticas es debido a
que están compuestas por lípidos.
c) Cuál es el papel de la sal (cloruro de sodio)?
La sal al ser un electrolito fuerte, disminuye la solubilidad de las proteínas, debido a esto
se emplea para romper las cadenas de las proteínas que unen los ácidos nucleicos
liberando las cadenas de ADN.
d) ¿Para qué sirve el alcohol en la extracción del ADN?
Sirve para precipitar el ADN, pues como se sabe el ADN es soluble en agua pero al
ponerse en contacto con el alcohol, este polinucleótidos se intenta desenrollar y cae hasta
encontrarse con el alcohol y el agua. Si el alcohol está frío aumenta más la insolubilidad.
11. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
● PRÁCTICA DE BIOLOGÍA: EXTRACCIÓN DEL ADN DE UN PLÁTANO. (2019,
febrero 18). Juntadeandalucia.es; IES Dra. Josefa de los Reyes.
https://blogsaverroes.juntadeandalucia.es/iesdoctorajosefadelosreyes/practica-de-biologia
-extraccion-del-adn-de-un-platano/
● Velázquez, L. P. A., Martínez, M. D. C. A., & Romero, A. C. (2014). Extracción y
purificación de ADN. Herramientas moleculares aplicadas en ecología: aspectos
teóricos y prácticos, 1.
● López, G. B., & Montaño, F. J. G. (2014). Propiedades funcionales del plátano (Musa sp).
Med UV, 2226.
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● Nadal-Medina, R., Manzo-Sánchez, G., Orozco-Romero, J., Orozco-Santos, M., &
Guzmán-González, S. (2009). Diversidad genética de bananos y plátanos (Musa spp.)
determinada mediante marcadores RAPD. Revista fitotecnia mexicana, 32(1), 01-07.
● PRACTICA DE LABORATORIO, Extracción del ADN (experimento casero), Hebert
Soto Gonzales
file:///C:/Users/Usuario/Downloads/Pr%C3%A1ctica%20de%20Laboratorio%20DNA%2
0PLATANO%20Prof.%20HEBERT%20(1)%20NOEMI.pdf
12. ANEXOS.
Anexo 1: Liquido filtrado de la extracción del plátano
Anexo 2: Se obtuvo una capa blanquecina gelatinosa