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MANUAL DE PROCEDIMIENTO OPERATIVO
SERVICIO TRASFUSIONAL
VERSION 1
DETERMINACION DEL GRUPO ABO EN TUBO
1. OBJETO
El objeto del presente documento es describir el procedimiento para determinar
el grupo sanguíneo de los pacientes del CHV. Empleando para ello reactivos
específicos y potentes anti A, anti B, y anti AB que nos permitirán determinar
el grupo ABO eritrocitario.
Sin embargo la verificación ABO eritrocitario no es suficiente, también es
necesario realizar la prueba inversa, analizando el suero del donante con
glóbulos rojos A, B y O.
2. CAMPO DE APLICACIÓN
Aplicar este procedimiento para determinar grupo sanguíneo a todas las
muestras de sangre del receptor y las unidades de concentrado de
glóbulos rojos a transfundirse.
3. REFERENCIAS
CODIGO DE DOCUMENTO DOCUMENTO
CRN/PNS 2007 Publicación 3
Código de ética para los servicios de sangre de
Bolivia.
ETBS Edición 2004
Estándares de trabajo para servicios de
sangre.
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4. DEFINICIONES Y ABREVIACIONES
ABREVIACION DESCRIPCION
ABO Sistema de grupo “ABO”
ST Servicio Transfusional
CHV Complejo Hospitalario Viedma
STCHV Servicio Transfusional Complejo Hospitalario
Viedma
POE Procedimiento operativo estandarizado
5. REQUISITOS GENERALES
Aplicar procedimientos de seguridad descritos en el manual de bioseguridad
POE-BIO-001v001, específico para la unidad de Inmunohematología
6. EQUIPAMIENTO, LOCALES, MATERIAL, REACTIVOS.-
a) Locales.-
Ambiente con mesón de material apropiado para soportar y no corroerse por los
líquidos desinfectantes como el Hipoclorito de Sodio al 5%,debe contar con
iluminación natural, la luz artificial debe ser complementaria a la luz natural,
b) Equipos.-
- Centrífugas
- Lámpara de aglutinoscopio
- Baño María con termómetro
- Timer
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c) Material.-
- Gradillas para tubos de hemólisis.
- Tubos de hemólisis
- Pipetas Pasteur de plástico
- Pipetas Pasteur de vidrio
- Guantes descartables
- Sobre-bata
- Barbijo
- Lentes protectores
- Hoja de papel sábana
d) Reactivos.-
- Sueros hemoclasificadores anti-A, anti-B, anti AB (opcional)
- previamente controlados
- Solución Salina al 0,9 %
- Hipoclorito de Sodio al 5%
- Eritrocitos A al 2-5%
- Eritrocitos B al 2-5%
- Eritrocitos 0 al 2-5%
e) Muestra
• Suspensión celular al 3% en solución salina del donante en estudio. Preparado
de acuerdo a lo descrito en POE-PMPT-v001
• Suero del receptor en estudio.
8.- OPERACIONES PRELIMINARES.-
a) Preparar el área de trabajo con el material a utilizar para garantizar que la
unidad comience a trabajar a una hora determinada y en forma ordenada.
b) Cubrir con papel absorbente al área de trabajo.
c) Extraer los sueros hemoclasificadores del refrigerador para que tomen la
temperatura ambiente.
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d) Realizar el control de calidad de los sueros clasificadores mediante el uso de
suspensiones celulares al 3% de grupo sanguíneo conocido, si el resultado es
satisfactorio continuar con el análisis de muestras de lo contrario realizar el
reporte a la unidad de control de la calidad.
e) Realizar la inspección de las suspensiones celulares, descartar si encuentra
anormalidades.
f) Preparar las gradillas con las muestras en estudio convenientemente rotuladas.
g) Preparar los cuadernos de registro para los resultados obtenidos.
h) Verificar la temperatura del baño de agua y registrar en la planilla de control.
i) Verificar las condiciones de limpieza y funcionamiento de las centrifugas e
inspeccionar las fundas de los tubos en búsqueda de tubos, vidrios rotos o
residuos biológicos.
9.- PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO.-
La aglutinación de los glóbulos rojos con sueros tipificadores anti A y anti B
indica la presencia del correspondiente antígeno. La ausencia de aglutinación
indica la ausencia de este.
La aglutinación resulta de la fijación de los anticuerpos a los antígenos de
varios eritrocitos, que forma una red o trama que mantiene unidas a las células.
10.-PRUEBA DIRECTA PARA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUINEO.
Método Directo
a) Colocar en una gradilla 3 tubos de hemólisis rotulados con las letras A, B Y
AB y el código del donante
b) Colocar en cada uno de ellos una gota de los antisueros A, B y AB
respectivamente.
c) Agregar 1 gota de suspensión de glóbulos rojos al 3 % del donante a cada
tubo. Mezclar agitando el tubo.
d) Centrifugar a la velocidad y tiempo establecidos para cada centrífuga y
proceder a su lectura.
e) Consignar los resultados en el libro de registro en las casillas correspondientes
registrando la intensidad de reacción de 1 a 4 cruces.
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11.- PRUEBA INVERSA PARA DETERMINAR GRUPO SANGUINEO.
Método Indirecto
a) Rotular 3 tubos de hemólisis previamente identificados y marcados con las
letras alfa y beta y O
b) Colocar a cada uno de ellos una gota de suspensión celular A, B u O
respectivamente.
c) Agregar 2 gotas de suero del receptor a cada tubo. Mezclar agitando el
tubo.
d) Centrifugar a velocidad y tiempo establecido para cada centrífuga y
proceder a su lectura
e) Consignar los resultados en el libro de registro en las casillas
correspondientes registrando la intensidad de reacción de 1 a 4 cruces.
12.- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS.-
La interpretación de la lectura de las aglutinaciones es la siguiente:
Método directo
Reacciones de Células
con antisuero
Método inverso
Reacciones del suero
con células testigo
Interpretación
Anti A Anti B Células A Células B Grupo
o o + + O
+ o o + A
o + + o B
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+ + o o AB
LIMITACIONES:
Deben compararse los resultados obtenidos en el agrupamiento por ambos
métodos, los mismos deben coincidir si no lo hicieran, se debe resolver la
discrepancia antes de la liberación del componente.
Si la aglutinación en estudio fuese de baja intensidad realizar la determinación
ABO por el método en tarjeta
13.-REGISTRO
Cuando se ha realizado la interpretación final del resultado de grupo,
sanguíneo registrar en la casilla correspondiente del libro de registro.
14. – OBSERVACIONES.-
Los tubos con muestras serán guardados a 4 ºC durante 72 horas por cualquier
reclamo ó necesidad de repetir la prueba.
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