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AFERESIS DE COMPONENTES SANGUINEOS

              T.M. Verónica Inaipil S.
 Banco de Sangre Hospital Dr. Hernán Henríquez A.
Hemaféresis

Procedimiento automatizado que involucra:

1. Extracción de sangre total

2. Colección de un componente específico.

3. Retorno del resto de componentes al donante o
paciente.
MODELOS DE SEPARADORES CELULARES
V-50 HAEMONETICS                    CS 3000 PLUS-Baxter
                   COBE -SPECTRA




 AS-104                    AMICUS
 FRESENIUS                 Baxter
Tipos de Aféresis
En función de los elementos sanguíneos extraídos:

        Plaquetoféresis

        Plasmaféresis

        Eritrocitaféresis

        Leucaféresis( granulocitos ,linfocitos)

        Recolección de células tallo
:
COMPONENTES DEL SEPARADOR                                ::

 Centrífuga (flujo continuo y discontinuo )
 Bombas peristálticas
 Sistema óptico
 Válvulas -sensores de presión y volúmen
 Panel monitor (operador)
 Cámaras/ campanas/cinturón de recolección y separación
ANEXO
 Equipo estéril DESECHABLE (tubuladuras, trampas de burbujas,
bolsas y soluciones)

ELEMENTOS QUE PERMITEN LA SEPARACIÓN
 Centrifugación
 Detector de Interfase (off -set)
 Combinación de Cámaras de separación y colección
COMBINACIÓN DE LAS CÁMARAS
      Procedimiento                           Separación       Colección

1. Recolección de Plaquetas                    TNX – 6       A 35 o PLT 30

2. Recolección de Granulocitos                 Granulo           A 35

3. Recolección de linfocitos                   Granulo           A 35

4. Intercambio Plasmático                    Granulo/PLT         A 35

5. Intercambio Plasmático Especial           Granulo/PLT         A 35

6. Intercambio Linfoplasmático                 Granulo           A 35

7. Plaquetaferesis con un solo acceso           TNX - 6          A 35

8. Recolección de células de linea base   ( Granulo, TNX 6      SVCC
1 a 8 Especial ).                            SVSCH, ISO
9. Recambio Eritrocitario                   Granulo, PLT,        Shunt
                                                TNX 6
EQUIPO ESTANDAR CS –3000 PLUS
FLUJO DEL SISTEMA
CAMARA DE SEPARACIÓN
     PRP    ST                 PRP
CE




                                            Eritrocitos
                                            Plaquetas
                                            Leucocitos


                                     Fuerza centrifuga
 TNX 6     Fuerza centrifuga         alta “G”
            suave “g”
HEMAFERESIS

•   Donación : plaquetas, plasma, leucocitos y células tallo.

•   Terapéuticas
    - Recambio plasmático (sustancias toxicas,anticuerpos)
    - Citoreducciones (plaquetas, leucocitos o eritrocitos)
PLAQUETOFERESIS
   REQUISITOS PARA SER DONANTE
     DE PLAQUETOFERESIS

    Mismos que un donante habitual
    Buenos accesos venosos
    Sin ingesta de anti-inflamatorios
    Tiempo (disponibilidad 2 horas)
    Serología no reactiva , clasif sanguínea
    Hemograma normal (200.000plq/uL)
    No haber donado sangre recientemente
    No haber consumido alimentos grasosos
Protocolo
  Entrevista-revisión sitios de punción
  Toma de exámenes- recomendaciones -citación
  Instalación de equipo,consentimiento informado
  Conexión del equipo al donante
  Se ingresan datos a la máquina
  Registro de datos cada 10 minutos
  Reinfusión
  Reposo y colación
  Resuspensión plaquetas
  Etiquetaje y almacenamiento
  Recuento de plaquetas en el laboratorio


FRECUENCIA:   1 proced. a la semana y 24 en total en el año
USUARIOS DE PLAQUETOFERESIS

PACIENTES :

• CON RECUENTO < 10.000/uL
• FIEBRE   o infección y recuento < 20.000/uL

• QUE VAN A SER SOMETIDOS PROCEDIMEINTOS
invasivos o cirugías con plaq < 50.000/uL

•CON APLASIA MEDULAR          Y / O OTRAS FALLAS MEDULARES
con plaq < 50.000/uL
CONTROL DE CALIDAD DE UNA PLAQUETOFERSIS
    De acuerdo a estandares internacionales AABB –ASFA-Consenso Europeo


  RECUENTO DE PLAQUETAS EN CELDYN al menos el 75%de los
productos, mínimo 3.3X1011= 6 U plaq.

  RECUENTO LEUCOCITOS RESIDUALES EN CÁMARA DE NAGEOTTE, POR
CITOMETRIA DE FLUJO (<1x107), productos filtrados <5x106(leucoreducidos)


  pH minimo de 6.0   al quinto día

  Frecuencia: 1% mínimo o bien 10 unidades /mes
VENTAJAS DE LA PLAQUETOFERESIS

1.-Obtención de 6-10 unidades plaquetas en un solo donante

2.-Disminución de aloinmunización y refractariedad plaquetaria (52 % vs 15%)
     GMUR et al 1996 *Delayed alloinmunization using random single donor platelet transfusions:
     A prospective study in trombocytopenic patients with leukemia .Blood ; 1996,62:473-9.



3.- Disminución de transmisión de infecciones virales( riesgo total 1:4.200 vs 1:34.000
       G. SCHREIBER y col, The risk of transfusion-transmitted viral infections.
       New England Journal of Medicine, 1999.Vol 334, 26, 1685-1690.

4.-Aumento de la viabilidad de las plaquetas ( por ↓leucoc)
     ANDREU G, DEWAILLY J.Prevention of HLA alloinmunization by
     using leukocyte-depleted components.Curr Stud Hematol .Blood Transfu.1994; 60.29-40


5.-Mejoría de la respuesta transfusional en cantidad y calidad ( dosis)
     J.H. HERMMAN et al. The effect of platelet dose on the outcome of prophylactic platelet transfusion.
      Transfusion 1995; 35 (Suppl.): S181.
REACCIONES ADVERSAS

                        Acción correctiva
• HEMATOMA              Reacomodar la vía
                        Detener el procedimiento
                        Puncionar nuevamente

                        Disminuir la velocidad de flujo sanguíneo
• REACCION AL CITRATO   Suministar calcio oral


                        (Halt irrigate) Detener –infusión con SF
•MAREOS   HIPOTENSION
                        Detener –infusión SF (Halt Irrigate)
                        Aflojar la ropa, P.Trendelemburg
SALA DE AFERESIS




DONANTES DE PLAQUETOFERESIS
REQUERIMIENTOS PARA TRANSPLANTE


• Estrictos protocolos de extracción ,manipulación y
almacenamiento( equipo de criopreservación)
• Espacios fisicos y recurso humano especializado en transplante
(Hemato-oncologos, infectologos,médico transfusionista,enfermeras,
etc).
• Experto Aferesista
• Personal capacitados estudios de HLA ( alogénico),
especialistas en biología celular y molec.
• Utilización de inmunosupresores potentes
• Acondicionamiento del paciente (quimio-radioterapia)
• Irradiación de hemocomponentes
Plasmaféresis o recambio plasmático
   Procedimiento que sirve para remover moléculas contenidas en el
   plasma que tienen alto peso molecular.




70.1% de procedimientos realizados son recambio plasmático
Plasmaféresis
        Sustancias Patológicas a Remover
Sustancia patológica a remover   Patología

• Inmunoglobulinas               Sidrome de hiperviscosidad
                                 - Macroglobulinemia de waldestroom
                                 - Mieloma multiple


                                 - Miastenia gravis
• Autoanticuerpos                - GUILLIAM BARRE
                                 - LES
                                 - vasculitis sistémica



• Lipoporoteinas                 -Hipercolesterolemia (LDL)

                                 - LES
                                 - Glomerulonefritis por complejos inmunes
 Complejos inmunes               - Rechazo agudo a injerto

                                 - Fármacos (digital), antidepresivos
 Sustancias toxicas              - Monoxido de carbono
                                 - Arsenico , cianuro
Fracción removida vs volumen plasmático
             reemplazado
Disminución de componentes del
plasma en un recambio plasmático
Requisitos
Estabilidad hemodinámica
Chequeo de PT y TTPa
Hemograma con recuento de plaquetas
Calcemia
Hora de medicación
Acceso vascular
Aplicación Clínica de Recambio Plasmático
                  Categoría I
        Terapia standard aceptada como de primera elección


  Sindrome Guillain Barré
Polineuropatía crónica inflamatoria desmielinizante
  Miastenia Gravis
  Sd Hiperviscosidad
  Crioglobulinemia
  Púrpura Trombótico trombocitopénico
   Hipercolesterolemia familiar
Aplicación Clínica de Recambio Plasmático
                Categoría II
     Terapia aceptada como segunda opción
-Sobredosis de drogas
-SHU
-Glomerulonefritis rapidamente progresiva
-LES
-Vasculitis sistemica
Cuantas veces repetir el
          procedimiento

AABB recomienda realizar un procedimiento
el recambio cada 24 a 48 hrs
Total 3 a 5 recambios
En algunas patologías hasta obtener respuesta
clínica
Acceso vascular central
       subclavia, yugular interna o femoral)
       Catéter de doble lumen
       5 – 7 días


                       ¿Con qué reponer volumen ?
  Albúmina y cristaloides                        PFC
Ventajas                               Ventajas
  < reacciones alérgicas                 < riesgo coagulopatía dilucional
  < hipocalcemia                         < riesgo de trombosis
  < riesgo de infecciones post-
  transfusionales                      Desventajas
                                         > reacciones alérgicas
Desventajas                              > hipocalcemia
  Coagulopatía dilucional                > riesgo de infecciones post-
  Riesgo de trombosis                    transfusionales
Experiencia en procedimientos de aféresis
HHHA
Año        PQA      PLasmaféresis                 total

2005        74      8                              82

2006       110      20                            130

2007       100      59                            159

Total      284      87                            371


                                            PROC Recambios plasmaticos 2007
                                       12
                    n° PROCEDIMIEMTO




                                       10
                                       8                                      n° PROC
                                       6
                                       4
                                       2
                                       0

                                                          MES
RECOLECCION DE CELULAS TALLO




                     Características
                   •células CD34+
                   •Capaces de diferenciarse en
                   cualquier célula
RECOLECCION DE CELULAS TALLO

1.- MEDULA OSEA


2.- SANGRE PERIFERICA (aferesis AUTOLOGA / ALOGENICA)



3.- SANGRE DE CORDON UMBILICAL
100ml




   UTILIDAD
  - Cada año se transplantan más de 30.000 personas con
enfermedades hematológicas, tumores sólidos y enfermedades
inmunológicas en el mundo
  - Se usan CHSP como transplante alogénico en más 95% de
adultos y 80% en niños. De estos aprox. 50% HLA idénticos
RECOLECCION DE CELULAS PROGENITORAS
          EN SANGRE PERIFERICA( CHPS)
 REQUISITOS DE UN DONANTE alogenico ( relacionado, no relac, singenico)
 HB ≥ 11 g/dL/ HCTO (normal)
 Recuento Plaquetario ≥ 150 x109/L
 Serología negativa (HCV, HBsAg y VIH, RPR)
 Estudios compatibilidad HLA

 MOViLIZACIÓN : FEC-G, FEC –GM ( Filgrastim-Leupogen) por 4-5 días
 previos a la recolección.

   CARACTERISTICAS DEL PROCEDIMIENTO
• 20 L en un adulto ó 2 –4 Vol.S.T en niño, duración 4-6 horas
• Buen Acceso vascular (cateter doble lumen paciente)
• Uso cámaras específicas- separador flujo contínuo
• Sedación y purga con GR radiados y filtrados ( pacientes pediátricos)
• Colección requerida 4-6x 108 células nucleadas por kg de peso del receptor
• Dosis requerida, mínimo de células CD34+ > 2 x106/ Kg del receptor( tx autólogo)
                                             > 4-7x106 / Kg           ( txAlogénico)
   Revista Cubana Hematología 2004; 20(2)
REACCIONES ADVERSAS
• Mialgias, cefaleas, dolor óseo asociadas a FEC –G /FEC- GM


    VENTAJAS DE OBTENCION CPH POR AFERESIS VS MO
•   No hay necesidad de pabellón
•   Mayor cantidad de células CD34+ cosechadas
•   Rápida recuperación hematológica
•   Menor riesgo de infección

  DESVENTAJAS
• Necesidad de FEC
TRANSPLANTE ALOGENICO                      TRANSPLANE AUTOLOGO
Ventajas                                    Ventajas
• Se transplantan células progenitoras sanas• Mayor posibilidad de donante
• Efecto injerto contra tumor               • Menor toxicidad
                                            • Uso pacientes de mayor edad
                                            • No hay EICH

Desventajas                               Desventajas
• Baja Disponibilidad                     •Contaminación con cèlulas tumorales
• Mayor posibilidad EICH                  •Menor frecuencia en recuperación medular
• Necesidad de inmunodepresión severa     •Menor efecto de injerto contra leucemia
                                          • Menor cantidad de cèlulas cosechadas
Gracias

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Aferesis de componentes sanguineos

  • 1. AFERESIS DE COMPONENTES SANGUINEOS T.M. Verónica Inaipil S. Banco de Sangre Hospital Dr. Hernán Henríquez A.
  • 2. Hemaféresis Procedimiento automatizado que involucra: 1. Extracción de sangre total 2. Colección de un componente específico. 3. Retorno del resto de componentes al donante o paciente.
  • 3. MODELOS DE SEPARADORES CELULARES V-50 HAEMONETICS CS 3000 PLUS-Baxter COBE -SPECTRA AS-104 AMICUS FRESENIUS Baxter
  • 4. Tipos de Aféresis En función de los elementos sanguíneos extraídos: Plaquetoféresis Plasmaféresis Eritrocitaféresis Leucaféresis( granulocitos ,linfocitos) Recolección de células tallo
  • 5. : COMPONENTES DEL SEPARADOR :: Centrífuga (flujo continuo y discontinuo ) Bombas peristálticas Sistema óptico Válvulas -sensores de presión y volúmen Panel monitor (operador) Cámaras/ campanas/cinturón de recolección y separación ANEXO Equipo estéril DESECHABLE (tubuladuras, trampas de burbujas, bolsas y soluciones) ELEMENTOS QUE PERMITEN LA SEPARACIÓN Centrifugación Detector de Interfase (off -set) Combinación de Cámaras de separación y colección
  • 6. COMBINACIÓN DE LAS CÁMARAS Procedimiento Separación Colección 1. Recolección de Plaquetas TNX – 6 A 35 o PLT 30 2. Recolección de Granulocitos Granulo A 35 3. Recolección de linfocitos Granulo A 35 4. Intercambio Plasmático Granulo/PLT A 35 5. Intercambio Plasmático Especial Granulo/PLT A 35 6. Intercambio Linfoplasmático Granulo A 35 7. Plaquetaferesis con un solo acceso TNX - 6 A 35 8. Recolección de células de linea base ( Granulo, TNX 6 SVCC 1 a 8 Especial ). SVSCH, ISO 9. Recambio Eritrocitario Granulo, PLT, Shunt TNX 6
  • 7. EQUIPO ESTANDAR CS –3000 PLUS
  • 9. CAMARA DE SEPARACIÓN PRP ST PRP CE Eritrocitos Plaquetas Leucocitos Fuerza centrifuga TNX 6 Fuerza centrifuga alta “G” suave “g”
  • 10. HEMAFERESIS • Donación : plaquetas, plasma, leucocitos y células tallo. • Terapéuticas - Recambio plasmático (sustancias toxicas,anticuerpos) - Citoreducciones (plaquetas, leucocitos o eritrocitos)
  • 11. PLAQUETOFERESIS REQUISITOS PARA SER DONANTE DE PLAQUETOFERESIS Mismos que un donante habitual Buenos accesos venosos Sin ingesta de anti-inflamatorios Tiempo (disponibilidad 2 horas) Serología no reactiva , clasif sanguínea Hemograma normal (200.000plq/uL) No haber donado sangre recientemente No haber consumido alimentos grasosos
  • 12. Protocolo Entrevista-revisión sitios de punción Toma de exámenes- recomendaciones -citación Instalación de equipo,consentimiento informado Conexión del equipo al donante Se ingresan datos a la máquina Registro de datos cada 10 minutos Reinfusión Reposo y colación Resuspensión plaquetas Etiquetaje y almacenamiento Recuento de plaquetas en el laboratorio FRECUENCIA: 1 proced. a la semana y 24 en total en el año
  • 13. USUARIOS DE PLAQUETOFERESIS PACIENTES : • CON RECUENTO < 10.000/uL • FIEBRE o infección y recuento < 20.000/uL • QUE VAN A SER SOMETIDOS PROCEDIMEINTOS invasivos o cirugías con plaq < 50.000/uL •CON APLASIA MEDULAR Y / O OTRAS FALLAS MEDULARES con plaq < 50.000/uL
  • 14. CONTROL DE CALIDAD DE UNA PLAQUETOFERSIS De acuerdo a estandares internacionales AABB –ASFA-Consenso Europeo RECUENTO DE PLAQUETAS EN CELDYN al menos el 75%de los productos, mínimo 3.3X1011= 6 U plaq. RECUENTO LEUCOCITOS RESIDUALES EN CÁMARA DE NAGEOTTE, POR CITOMETRIA DE FLUJO (<1x107), productos filtrados <5x106(leucoreducidos) pH minimo de 6.0 al quinto día Frecuencia: 1% mínimo o bien 10 unidades /mes
  • 15. VENTAJAS DE LA PLAQUETOFERESIS 1.-Obtención de 6-10 unidades plaquetas en un solo donante 2.-Disminución de aloinmunización y refractariedad plaquetaria (52 % vs 15%) GMUR et al 1996 *Delayed alloinmunization using random single donor platelet transfusions: A prospective study in trombocytopenic patients with leukemia .Blood ; 1996,62:473-9. 3.- Disminución de transmisión de infecciones virales( riesgo total 1:4.200 vs 1:34.000 G. SCHREIBER y col, The risk of transfusion-transmitted viral infections. New England Journal of Medicine, 1999.Vol 334, 26, 1685-1690. 4.-Aumento de la viabilidad de las plaquetas ( por ↓leucoc) ANDREU G, DEWAILLY J.Prevention of HLA alloinmunization by using leukocyte-depleted components.Curr Stud Hematol .Blood Transfu.1994; 60.29-40 5.-Mejoría de la respuesta transfusional en cantidad y calidad ( dosis) J.H. HERMMAN et al. The effect of platelet dose on the outcome of prophylactic platelet transfusion. Transfusion 1995; 35 (Suppl.): S181.
  • 16. REACCIONES ADVERSAS Acción correctiva • HEMATOMA Reacomodar la vía Detener el procedimiento Puncionar nuevamente Disminuir la velocidad de flujo sanguíneo • REACCION AL CITRATO Suministar calcio oral (Halt irrigate) Detener –infusión con SF •MAREOS HIPOTENSION Detener –infusión SF (Halt Irrigate) Aflojar la ropa, P.Trendelemburg
  • 17. SALA DE AFERESIS DONANTES DE PLAQUETOFERESIS
  • 18. REQUERIMIENTOS PARA TRANSPLANTE • Estrictos protocolos de extracción ,manipulación y almacenamiento( equipo de criopreservación) • Espacios fisicos y recurso humano especializado en transplante (Hemato-oncologos, infectologos,médico transfusionista,enfermeras, etc). • Experto Aferesista • Personal capacitados estudios de HLA ( alogénico), especialistas en biología celular y molec. • Utilización de inmunosupresores potentes • Acondicionamiento del paciente (quimio-radioterapia) • Irradiación de hemocomponentes
  • 19. Plasmaféresis o recambio plasmático Procedimiento que sirve para remover moléculas contenidas en el plasma que tienen alto peso molecular. 70.1% de procedimientos realizados son recambio plasmático
  • 20. Plasmaféresis Sustancias Patológicas a Remover Sustancia patológica a remover Patología • Inmunoglobulinas Sidrome de hiperviscosidad - Macroglobulinemia de waldestroom - Mieloma multiple - Miastenia gravis • Autoanticuerpos - GUILLIAM BARRE - LES - vasculitis sistémica • Lipoporoteinas -Hipercolesterolemia (LDL) - LES - Glomerulonefritis por complejos inmunes Complejos inmunes - Rechazo agudo a injerto - Fármacos (digital), antidepresivos Sustancias toxicas - Monoxido de carbono - Arsenico , cianuro
  • 21. Fracción removida vs volumen plasmático reemplazado
  • 22. Disminución de componentes del plasma en un recambio plasmático
  • 23. Requisitos Estabilidad hemodinámica Chequeo de PT y TTPa Hemograma con recuento de plaquetas Calcemia Hora de medicación Acceso vascular
  • 24. Aplicación Clínica de Recambio Plasmático Categoría I Terapia standard aceptada como de primera elección Sindrome Guillain Barré Polineuropatía crónica inflamatoria desmielinizante Miastenia Gravis Sd Hiperviscosidad Crioglobulinemia Púrpura Trombótico trombocitopénico Hipercolesterolemia familiar
  • 25. Aplicación Clínica de Recambio Plasmático Categoría II Terapia aceptada como segunda opción -Sobredosis de drogas -SHU -Glomerulonefritis rapidamente progresiva -LES -Vasculitis sistemica
  • 26. Cuantas veces repetir el procedimiento AABB recomienda realizar un procedimiento el recambio cada 24 a 48 hrs Total 3 a 5 recambios En algunas patologías hasta obtener respuesta clínica
  • 27. Acceso vascular central subclavia, yugular interna o femoral) Catéter de doble lumen 5 – 7 días ¿Con qué reponer volumen ? Albúmina y cristaloides PFC Ventajas Ventajas < reacciones alérgicas < riesgo coagulopatía dilucional < hipocalcemia < riesgo de trombosis < riesgo de infecciones post- transfusionales Desventajas > reacciones alérgicas Desventajas > hipocalcemia Coagulopatía dilucional > riesgo de infecciones post- Riesgo de trombosis transfusionales
  • 28. Experiencia en procedimientos de aféresis HHHA Año PQA PLasmaféresis total 2005 74 8 82 2006 110 20 130 2007 100 59 159 Total 284 87 371 PROC Recambios plasmaticos 2007 12 n° PROCEDIMIEMTO 10 8 n° PROC 6 4 2 0 MES
  • 29. RECOLECCION DE CELULAS TALLO Características •células CD34+ •Capaces de diferenciarse en cualquier célula
  • 30. RECOLECCION DE CELULAS TALLO 1.- MEDULA OSEA 2.- SANGRE PERIFERICA (aferesis AUTOLOGA / ALOGENICA) 3.- SANGRE DE CORDON UMBILICAL 100ml UTILIDAD - Cada año se transplantan más de 30.000 personas con enfermedades hematológicas, tumores sólidos y enfermedades inmunológicas en el mundo - Se usan CHSP como transplante alogénico en más 95% de adultos y 80% en niños. De estos aprox. 50% HLA idénticos
  • 31. RECOLECCION DE CELULAS PROGENITORAS EN SANGRE PERIFERICA( CHPS) REQUISITOS DE UN DONANTE alogenico ( relacionado, no relac, singenico) HB ≥ 11 g/dL/ HCTO (normal) Recuento Plaquetario ≥ 150 x109/L Serología negativa (HCV, HBsAg y VIH, RPR) Estudios compatibilidad HLA MOViLIZACIÓN : FEC-G, FEC –GM ( Filgrastim-Leupogen) por 4-5 días previos a la recolección. CARACTERISTICAS DEL PROCEDIMIENTO • 20 L en un adulto ó 2 –4 Vol.S.T en niño, duración 4-6 horas • Buen Acceso vascular (cateter doble lumen paciente) • Uso cámaras específicas- separador flujo contínuo • Sedación y purga con GR radiados y filtrados ( pacientes pediátricos) • Colección requerida 4-6x 108 células nucleadas por kg de peso del receptor • Dosis requerida, mínimo de células CD34+ > 2 x106/ Kg del receptor( tx autólogo) > 4-7x106 / Kg ( txAlogénico) Revista Cubana Hematología 2004; 20(2)
  • 32. REACCIONES ADVERSAS • Mialgias, cefaleas, dolor óseo asociadas a FEC –G /FEC- GM VENTAJAS DE OBTENCION CPH POR AFERESIS VS MO • No hay necesidad de pabellón • Mayor cantidad de células CD34+ cosechadas • Rápida recuperación hematológica • Menor riesgo de infección DESVENTAJAS • Necesidad de FEC
  • 33. TRANSPLANTE ALOGENICO TRANSPLANE AUTOLOGO Ventajas Ventajas • Se transplantan células progenitoras sanas• Mayor posibilidad de donante • Efecto injerto contra tumor • Menor toxicidad • Uso pacientes de mayor edad • No hay EICH Desventajas Desventajas • Baja Disponibilidad •Contaminación con cèlulas tumorales • Mayor posibilidad EICH •Menor frecuencia en recuperación medular • Necesidad de inmunodepresión severa •Menor efecto de injerto contra leucemia • Menor cantidad de cèlulas cosechadas