Este documento describe los procedimientos para determinar la presencia de Escherichia coli en muestras de agua como indicador de contaminación fecal. Se explica cómo recolectar las muestras en frascos esterilizados y se detalla el método de cultivo en caldo lactosado e incubación para detectar la presencia de coliformes a través de la producción de gas.

2. INTRODUCCIÓNINTRODUCCIÓN
 Para determinar la potabilidad del agua, los controles
microbiológicos rutinarios se basan en la búsqueda de
microorganismos indicadores cuya presencia nos aporte
información sobre la posibilidad de encontrar
microorganismos patógenos.
 Los microorganismos indicadores son microorganismos
que generalmente se encuentran en la materia fecal del
hombre y los animales, su presencia en el agua es una
evidencia de que está contaminada con materia fecal de
humanos u otros animales y por consiguiente con el
microorganismo patógeno.
 El microorganismo utilizado como indicador es
Escherichia coli y su detección se puede hacer mediante
pruebas sencillas como: cultivo en caldo lactosado.

3. Toma de la Muestra
 La muestra debe ser recogida en
un recipiente vidrio neutro con
tapón esmerilado o roscado,
muy limpio y esterilizado en
autoclave a 120ºC durante
treinta minutos.
 El tapón y el cuello del frasco se
protegerán con una cubierta de
papel, (aluminio)

4. PROCEDIMIENTOPROCEDIMIENTO: (Toma de muestra de grifo): (Toma de muestra de grifo)
Se procederá a una cuidadosa limpieza del grifo
con agua o alcohol.

5. Con el grifo cerrado se flameará el extremo del mismo,
mediante la llama obtenida con un poco de algodón
empapado de alcohol y sostenido con unas pinzas.

6. Después se abrirá el grifo para que el agua
fluya abundantemente y se renueve la
contenida en la tubería que la alimenta.

7. Se destapará el frasco esterilizado sin
tocar la boca del mismo ni el interior del
tapón

8. Determinación deDeterminación de
ColiformesColiformes

9. PRUEBA PRESUNTIVA:
 Para determinar estos Coliformes se va a
utilizar el medio de cultivo BGBB, que es un
medio selectivo y de enriquecimiento ya que
inhibe el crecimiento de microorganismos
distintos de los del grupo de los Coliformes.
 Se distribuye el medio en nueve tubos (tres
series de tres tubos) con diez mililitros cada
uno de medio de cultivo,
 y echando 10 ml de el agua a la primera serie
de tubos, 1 ml de agua a la segunda serie, y
0,1 ml a la tercera.

10.  Luego colocaremos en cada tubo
una campana Durham para
recoger el gas producido.
 Estos tubos se incuban a la
temperatura correspondiente
según se trate de Coliformes
Totales (37 ºC) ó Fecales (44 ºC)
durante 24 horas.
 La reacción será positiva cuando
se produce desprendimiento de
gas en la campana Durham por lo
menos en un 10% de su
capacidad, y el medio vira a color
amarillo debido a formación de
ácido.