Este estudio examinó 10 corneas excluidas para trasplante debido a serología positiva para citomegalovirus, virus herpes, rubeola y toxoplasma. Mediante análisis histológico e inmunohistoquímico en microarreglos de tejidos, el estudio encontró que las corneas estaban intactas en todas sus capas y no mostraron expresión de dichos microorganismos, lo que indica que no había replicación viral ni infestación parasitaria a pesar de los títulos serológicos positivos

1. ESTUDIO DE INMUNOHISTOQUIMICA E HISTOQUIMICA EN TEJIDO CORNEAL
PROCURADO CON SEROLOGÍA POSITIVA A TORCH
Karla Verdiguel-Sotelo1, Arturo Carrasco-Quiroz2, María de los Ángeles Hernández-Cueto3, Elvira
González-Bojórquez4
1. Oftalmóloga, subespecialidad en Córnea y Cirugía refractiva, adscrita al Centro Médico Nacional La Raza.
2.. Maestro en Ciencias, subespecialidad Córnea y Cirugía refractiva en el Centro Médico Nacional Siglo XXI
3. Doctora en Ciencias, Laboratorio Central de Epidemiología del Centro Médico Nacional La Raza.
4.- Médico Cirujano Oftalmólogo.
INTRODUCCIÓN
BIBLIOGRAFÍA
La transmisión de enfermedades infecto-contagiosas en trasplantes corneales
es un tema controversial.
En México no existe un consenso en materia de evaluación del tejido corneal
procurado. Existen diversos hospitales a nivel nacional que realizan
procuraciones y sus evaluaciones difieren uno del otro sobretodo en el panel
serológico a evaluar.
En el Centro Médico Nacional La Raza (CMNR) las corneas procuradas se
someten a panel serológico completo (VIH, VHC, VHB, CMV, sífilis, herpes,
toxoplasma y rubeola), considerándose no aptas para trasplante cualquier
paciente con serología positiva. En el CMNR anualmente se descartan 10% de
las corneas procuradas por panel viral positivo a pesar de ser aptas para
trasplante por microscopía especular
No existen estudios en la literatura que demuestren la presencia de
microorganismos TORCH (Toxoplasma, Rubeola, Citomegalovirus y herpes) en
el tejido corneal procurado con serología positiva por medio de técnicas de
microarreglos de tejidos
Estudio observacional, descriptivo, transversal y prospectivo en el Hospital
General del CMNR y en el Laboratorio Central de Epidemiología CMN “La
Raza”,
Se analizaron los tejidos corneales procurados y excluidos para fines de
trasplante por serología positiva a TORCH de mayo 2014 a mayo 2015.
Se ingresaron al estudio 10 corneas procedentes de 5 procuraciones
descartadas para trasplante por serología positiva a TORCH. El análisis
histológico demostró que todas las capas de las corneas se encontraron
íntegras. Figura 1.
El análisis morfométrico de los cortes de microarreglos (MAT) de tejidos
demostró una expresión nula y definitiva tanto en córnea avascular, como en
limbo esclero-corneal de ambos ojos por dichos microorganismos en núcleo y
citoplasma del epitelio, Bowman, estroma, Descemet y endotelio, cuando se
compararon con los tejidos de control positivo para citomegalovirus en pulmón,
virus herpes simple en mucosa oral, rubeola y toxoplasma en ganglio. Figura 2
y 3.
MATERIAL Y MÉTODOS
RESULTADOS
Figura 1. Tinciones de histoquímica en corneas rechazadas para trasplante, positivas a
TORCH, teñidas con hematoxilina-eosina (HE), ácido peryodico de Schiff (PAS) y tricrómico
de Masson (MASS), clasificados por paciente y ojo derecho (O. D.) – ojo izquierdo (O. I.). Las
características histológicas muestran que todas las córneas se encuentran íntegras en su
epitelio, Bowman, estroma, membrana de Descemet y endotelio (10X).
Figura 2. Expresión de las tinciones de inmunohistoquímica en MAT de corneas
rechazadas para trasplante clasificadas por paciente y la cual es nula para córnea
avascular y nula para limbo esclero-corneal vascular cuando se compara con el control
externo positivo para Citomegalovirus, Virus Herpes, Rubeola y Toxoplasma (40X)
Figura 3. Gráfica del análisis morfométrico de la expresión en MAT de córneas
rechazadas para trasplante por paciente, control interno (C. I.) y control externo (C.
E.) en núcleo y citoplasma. La expresión en córnea avascular y limbo esclero-corneal
vascular es nula al compararse con la expresión nuclear positiva para CMV, VH y
Rubeola, así como con la expresión en Citoplasma positiva para Toxoplasma.
FIGURA 1. HISTOQUÍMICA DE CORTES DE CORNEAS
EXCLUIDAS PARA TRASPLANTE
FIGURA 2. EXPRESIÒN DE INMUNOHISTOQUÌMICA EN MAT
DE CORTES DE CÓRNEAS EXCLUIDAS PARA TRASPLANTE
FIGURA 3. PORCENTAJE DE EXPRESIÒN DE CMV, HERPES VIRUS,
RUBEOLA Y TOXOPLASMA EN MAT DE CORTES DE CORNEAS
EXCLUIDAS PARA TRASPLANTE
Este estudio examinó el patrón de expresión de citomegalovirus, virus
herpes, rubeola y toxoplasma en tejidos de corneas excluidas para
trasplante, organizados en un microarreglo. El origen de éste trabajo se
basó en la integridad clínica y microscópica (Figura 4) de las corneas
que se rechazan para trasplante, por presentar serología positiva para
estos microorganismos. Sin embargo el análisis morfométrico demuestra
fehacientemente la expresión negativa (cero %) con anticuerpos
específicos contra CMV, VHS, rubeola y toxoplasma, tanto en la córnea
avascular, como en el limbo esclero-corneal vascularizado. Esto indica
que no hay replicación viral ni infestación parasitaria.
Los títulos identificados serológicamente deben ser cuidadosamente
evaluados, sobre todo cuando clínicamente y por microscopía especular
no hay datos que sustenten una afección de la córnea candidata a
trasplante.
CONCLUSIONES
FIGURA 4. MICROSCOPÌA ESPECULAR DE LAS CORNEAS EXCLUIDAS
PARA TRASPLANTE POR SEROLOGÌA POSITIVA A TORCH
Figura 4. Microscopía especular de las córneas excluidas para trasplante por serología
positiva a TORCH. Estas córneas analizadas demostraron ser aptas para trasplante
basados en el conteo endotelial, su hexagonalidad y coeficiente de variación.
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