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LEISHMANIASIS CANINA
        CASO CLÌNICO




 ALEJANDRO DÌAZ CORREA


      MEDICO VETERINARIO
     UNIVERSIDAD LA SALLE
CLINICA VETERINARIA EL POBLADO




     MEDELLÌN – ANTIOQUIA

          23/08/2012
DESCRIPCIÓN DE CASO CLÍNICO


RESEÑA

Se presenta a consulta diurna a la Clínica Veterinaria El Poblado, paciente de nombre
Killer, macho de 4 años de edad, raza Labrador Retriever. Peso de 33.5 kilogramos,
procedente de la zona urbana de la ciudad de Medellín. El paciente tiene antecedentes de
pertenecer al Ejército Nacional de acuerdo apreciaciones de la persona que llevó la
mascota a la clínica veterinaria.

Anamnesis

No tenía historia previa de enfermedad aparente, en el sistema de registro de los
pacientes del centro. No existía registro evidente de programa de vacunación y
desparasitación completo. El paciente manifiesta una excoriación y ulceración de la
porción nasal craneal y alteración dermatológica focalizada en escroto. Paciente con
demasiada producción de orina y aumento exagerado del consumo de agua, de acuerdo
apreciaciones de los médicos tratantes de la Clínica Veterinaria El Poblado.

Examen Clínico

Frecuencia cardiaca de 110 latidos por minuto, 30 ciclos/minuto de frecuencia respiratoria,
temperatura 39.8ºC. Ligera distensión abdominal, con apreciación positiva a la palpación
abdominal de bazo, en cuadrante cráneo-ventral izquierdo. Mucosas rosadas pálidas.
Presión arterial normal y auscultación normal, sin soplo aparente en ninguna de las zonas
cardiacas intercostales de auscultación. Examen oftalmológico y otoscópico sin cambios
anormales aparentes.

    Se ha sugerido una ecografía abdominal, donde se revela esplenomegalia a partir de
la amplia envergadura de la silueta esplénica, al paso del transductor en el cuadrante
medial izquierdo del plano longitudinal medio. Los aspectos más relevantes que
incluyeron el examen clínico, corresponden a la excoriación de la porción nasal de la trufa
y la herida escrotal de gran tamaño.

Signología

Ulceración de herida en la región nasal craneodorsal, de aspecto simétrico y localizado. El
paciente además evidencia una herida extensiva, de aspecto rugoso, en saco escrotal
(Figura 1). Leve secreción conjuntival bilateral, esplenomegalia y congestión hepática con
cambio ecogénico no variable de morfología orgánica; hallazgos manifiestos por ecografía
abdominal. Ningún otro signo adicional, se presentaba en el paciente, relacionado con la
signología anteriormente descrita.




Figura 1. Aspecto de lesiones dermatológicas del caso clínico. A. Lesión en porción nasal
craneal o en trufa. Las ulceraciones comunes de pacientes con Leishmaniasis, provocan
deshidratación e hiperqueratosis en orejas y región nasal. B. Lesión asimétrica y
extensiva en región escrotal.
Adaptado de: Clínica Veterinaria El Poblado.

Hay que tener en cuenta, que no todas las lesiones dermatológicas en región nasal y
orejas son indicativas de pacientes con Leishmaniasis. Únicamente, la confirmación del
diagnóstico se realiza mediante la visualización directa del parásito a través de aspirados
y extensiones teñidas de médula ósea y ganglio linfático; o de métodos serológicos más
sensibles como PCR (Reacción en cadena de la polimerasa), IFI (Inmunofluorescencia),
entre otras.. Los pacientes de regiones endémicas, o que provienen de éstas, de los
cuales sospechamos que existe infección por Leishmaniasp., pero que no ha sido
confirmada por visualización en extensiones; deben remitirse de ellos muestras para
exámenes serológicos más específicos.

Diagnóstico

Se plantean diagnósticos diferenciales con respecto a la anamnesis, examen clínico y
signología del paciente: Erlichiosis, Leishmaniasis, dermatitis asociada a algún proceso
alérgico, neoplasia (Carcinoma de células escamosas),pioderma,dermatopatía
autoinmune (pénfigo, lupus eritematoso, etc). Se procedió a realizar análisis y exámenes
de laboratorio, que consistían en hemograma completo, bioquímica sérica con medición
de albúmina, creatinina, BUN, urianálisis. De acuerdo a la manifestación clínica debida a
la esplenomegalia evidente en ecografía abdominal (Figura 2), alteraciones
dermatológicas y por los antecedentes de ser de un paciente que estuvo vinculado al
Ejército Nacional que desempeñaba la función de desactivación de bombas en zonas
rurales, se recomendó inicialmente realizar la punción de médula ósea para descartar
proceso parasitario o neoplásico.



Figura 2. Esplenomegalia evidente, debido a que la envergadura esplénica alcanza el lado
derecho del plano longitudinal medio.
Tomado de: Clínica Veterinaria El Poblado.




Es importante resaltar, que la esplenomegalia es el resultado de la respuesta
inmunológica normal del organismo, ante los eventos de infección por Erlichia,
Trypanosoma, Leishmania, Hepatozoon, procesos de linfoma, anemia hemolítica
autoinmune, entre otros. La esplenomegalia, es por lo tanto la manifestación morfológica
del sistema hemolinfático como respuesta algún proceso que derive en formación de
inmunocomplejos o activación del complemento en cualquiera de sus formas.

En las tablas 1, 2 y 3, se evidencian los resultados de las pruebas de hemograma,
bioquímica sérica y urianálisis. Debido a las amplias alteraciones relacionadas con la
funcionalidad orgánica, es posible pensar que la Leishmaniasis visceral canina, sea una
enfermedad de afección multisistémica.

En la tabla 1, se evidencia un ligero aumento de los glóbulos blancos, aunque esta línea
celular puede estar normal o disminuida en pacientes con Leishmaniasis visceral canina.
El planteamiento de posibles enfermedades de origen parasitario que nos puede orientar
el hemograma, es la disminución exagerada de plaquetas, en combinación con anemia.
Los casos en los cuales se determina el hallazgo de pancitopenia, ocurre cuando el
sistema inmune no es capaz de producir anticuerpos y los linfocitos T, no reaccionan a la
presencia parasitaria (Greene, 2006). Estos casos son de pronóstico muy reservado y el
paciente por lo general es sintomático de la Leishmaniasis visceral, con
comprometimiento multisistemico grave.
Tabla 1. Hemograma de Killer.
                       Serie                             Urko                  Valor normal
                                                                6
                   Glóbulos Rojos                     6.51 x 10              5.5-8.5 x 10 6/ᶙ l
                    Hematocrito                         45.5%                    37-55 %
                    Hemoglobina                          14.8                   12-18 gr/dl
                       MCV                                70                     60-76 Fl
                  Glóbulos Blancos                      17200                 6-17 x 10 3/ᶙ l
                     Plaquetas                         262000                200-500 x 10 3/ᶙ   l


                              Tomado de: Clínica veterinaria El Poblado.

    En la tabla 2, se anexan los resultados del análisis de orina de Killer. Los cambios
relevantes asociados a la orina, son presencia de leucocitos, cuya manifestación indica
infección del tracto urinario concomitante. El aumento en la densidad suele verse en
pacientes con Leishmaniasis Visceral con indicios de proteinuria o microalbuminuria;
hallazgos sugestivos de enfermedad renal precoz. Cuando la enfermedad renal suele
prolongarse a través del tiempo, se detenta falla renal crónica con las complicaciones que
esta alteración provoca como aumento de urea/BUN, desequlibrio electrolítico, pérdida de
proteínas, hiporexia, adelgazamiento progresivo, respuesta inflamatoria local (formación
de inmunocomplejos) y sistémica (esplenomegalia) y muerte.

Tabla 2. Citoquímico de Orina.
                Variable          Valor           Unidades          Rango de referencia
                  Color          Amarillo                           Amarillo/transparente
                 Aspecto       Ligero turbio                                Claro
                Densidad           1048              Mg/dl              1010-1030
                    PH              7                                     Variable
               Leucocitos          100              Leu/uL                Negativo
                 Nitritos          Neg               Mg/dl                Negativo
                Proteínas          Neg               Mg/dl                Negativo
                 Glucosa          Normal             Mg/dl               <50mg/dl
                 Cuerpo            Neg               Mg/dl                Negativo
                cetónicos
              Urobilinógeno           4                                    Normal
               Bilirrubina            1              Mg/dl                 Negativo
               Eritrocitos           Neg             Er/dl                 Negativo
                              Tomado de: Clínica veterinaria El Poblado.

De acuerdo a los hallazgos vistos en el citoquímico de orina de Killer, es posible que la
presencia de leucocitos sea el resultado de una infección del tracto urinario bajo
concomitante. La orina fue recolectada por cistocentesis, con previa desinfección de la
piel, en el lugar de la punción. Las proteínas están normales, lo cual indica que no existe
compromiso renal glomerular. Sin embargo la microalbuminuria, es indicativa de
compromiso renal glomerular precoz en pacientes con Leishmaniasis Visceral. Por tanto,
en estos pacientes, realizar exámenes de Creatinina séricos seriados es importante para
monitorear la capacidad renal. Por último, la presencia de Urobilinógeno y bilirrubina
pueden deberse a destrucción eritrocitaria, causada por la reacción inmune.

   En relación a que la Leishmanisis Visceral provoca alteraciones relacionadas con las
proteínas, se decidió realizar un proteinograma con el fin de confirmar los hallazgos que
paraclínicamente también se observan en pacientes convalecientes por ésta enfermedad.
La hipoalbuminemia es consistente en pacientes sintomáticos con Leishmaniasis, aunque
las proteínas totales puedan estar en el rango normal. De hecho, el aumento de las
gammaglobulinas pueden relacionarse con que las proteínas totales estén en rango.



Tabla 3. Proteinograma de Killer

               Fracción            Resultado                Unidades          V. normales
               Albúmina              19.8                     Gr/dl          Adultos: 25-35
                                                                            Cachorros: 22-29
           Proteínas Totales            72                     Gr/dl              55-78

                               Tomado de: Clínica veterinaria El Poblado.

   A partir de la sintomatología, los hallazgos clínicos y físicos, y la anamnesis del
paciente; se decide realizar una citología por aspiración con aguja fina de médula ósea,
con el objetivo de visualizar posibles formas amastigotes de Leishmania en el interior de
monocitos y macrófagos. La visualización directa de las formas amastigotes del parásito,
fue suficiente para determinar el diagnóstico clínico. En la figura 3, se muestra la manera
de extraer la muestra de médula ósea, a través del cartílago costocondral de la octava
costilla del lado izquierdo de Killer.

Figura 3. Extracción de muestra de médula ósea.




                               Tomado de: Centro Veterinario El Poblado.

    En animales de raza grande, como en éste caso el Labrador Retriever, la muestra de
médula ósea para valoración de celularidad y hallazgos oportunos de parásitos
intracelulares, se puede obtener de las costillas, bajo técnicas de extracción anteriormente
ensayadas. El riesgo de perforar un pulmón con la aguja, y consecuentemente provocar
un neumotórax de tensión, es posible si la técnica no se realiza de la forma adecuada.
Otro riesgo que puede presentarse a la hora de extraer la muestra, es la ruptura de la
aguja dentro del tejido; una posibilidad si el paciente temperamentalmente no permite
extraer la muestra y por lo tanto debemos sedarlo.
Posteriormente a la extracción, se realizó un extendido de la muestra en portaobjetos y
se realizó tinción de Giemsa, para determinación de la celularidad y presencia de
amastigotes de Leishmaniainfantum. En la figura 4, se evidencian las formas encontradas
del parásito dentro de un monocito del paciente del actual caso. Un solo monocito
infectado, es considerado como diagnóstico de la enfermedad. Cuando no se evidencian
formas amastigotes del parásito, pero hay sospecha de la enfermedad por región de
procedencia, signología y alteraciones dermatológicas que no responden al tratamiento;
se procede a enviar exámenes específicos serológicos a laboratorios especializados.

   La elección del diagnóstico es importante. Pueden existir falsos negativos, siendo
portadores los pacientes de la infección. Por dicha razón es esencial hacer exámenes
seriados y contínuos. Tanto en Colombia como en el mundo, se requieren de esfuerzos
en la investigación animal, relacionados a estandarizar los métodos de diagnóstico de la
Leishmaniasis visceral canina.

Figura 4. Amastigotes de Leishmaniainfantum encontrados en monocito de Killer.
Delimitación: Indicación de formas parasitarias (amastigotes), en un monocito, del
paciente estudiado. Tinción de Giemsa, x 100.




                             Adaptado de: Centro Veterinario El Poblado.

    A través de la visualización directa de las formas amastigotes de Leishmaniainfantum,
se permitió definir el diagnóstico definitivo, Leishmaniasis Visceral Canina. Según Greene
(2006), los amastigotes viajan a lo largo del cuerpo, primariamente en los órganos del
sistema hemolinfático y áreas remotas de la piel hasta crear una infección generalizada.
Sin embargo, cuando la infección es latente y diseminada por todo el organismo, los
pacientes pueden ser asintomáticos.

    El paciente es hospitalizado por varios días bajo monitoreo clínico y se explica a los
dueños la importancia de la enfermedad. El pronóstico de los médicos veterinarios de la
Clínica Veterinaria El Poblado, en relación al caso de Killer era reservado. Los pacientes
con Leishmaniasis sintomáticos representan en Colombia un riesgo para la salud pública.
Sin embargo existen en el mundo alternativas terapéuticas que a nuestro criterio pueden
utilizarse en éstos pacientes como las que explicaremos a continuación.
Tratamiento

Se decidió trabajar la terapéutica del caso de forma localizada (es decir en las regiones
donde la Leishmaniasis manifestaba su presencia de manera cutánea). Aunque es
importante evaluar el seguimiento de las afecciones dermatológicas, también lo es
monitorear tanto la función renal como hepática (hallazgos incluidos en el complejo de la
Leishmaniasis Visceral). La lesión del escroto se trato con anfotericina B; utilizado en
lesiones por Leishmaniasis. Su mecanismo de acción se basa en la fijación a la
membrana plasmática de las células, alterando la permeabilidad celular de la Leishmania
presente. Sin embargo, la anfotericina en tratamientos prolongados, puede desencadenar
insuficiencia renal y seguidamente falla renal. Por lo tanto es indispensable el monitorero
de éstos pacientes conforme pasa el tiempo. La aplicación del producto se realizó cada 12
horas durante 1 mes aproximadamente.

En cuanto a la lesión de la trufa, se programaron inyectologías de antimoniato de
meglumineperilesional cada 7 dias durante tres sesiones. Los antimoniatos pentavalentes,
son transformados en trivalentes por los macrófagos para ejercer su acción contra la
Leishmaniasp. El mecanismo de acción de éste compuesto esta mediado por la
interferencia de los amastigotes de Leishmania, inhibiendo la glucólisis y oxidación β de
los ácidos grasos, provocando una importante reducción de ATP y Glutamil-
Fosfotransferasa (GPT). Se inyectó 1 cm de glucantime por centímetro cuadrado de la
lesión de la trufa de Killer. Inicialmente la lesión era húmeda, cavitaria y profunda; y con el
tratamiento la lesión se volvió de característica costrosa, irregular y más superficial
(Figura 5).

Figura 5. A, B y C. Lesiones de Trufa de Killer a los 5, 10 y 15 días respectivamente post
tratamiento con inyección de Glucantimeperilesional. D y E. Lesiones de escroto a los 5 y
10 días post tratamiento con emulsión grasa de Anfotericina B.




                               Tomado de: Clínica Veterinaria El Poblado.
Se realizaron mediciones de las lesiones cutáneas cada 5 días con buenos resultados
en cuanto a la evolución favorable de las alteraciones dermatológicas. En cuanto a la
lesión de la nariz, la inyectologíaperilesional promovió la cicatrización por segunda
intención, debido a la formación costrosa, respecto del aspecto húmedo que manifestaba
al principio. Se observó disminución del tamaño de la lesión tanto a lo ancho como a lo
largo. En cuanto a la lesión escrotal, la disminución del tamaño de la lesión fue
considerable. El aspecto de la lesión escrotal de Killer al darse de alta, manifiesta bordes
reactivos y reducción en el tamaño.

Discusión del caso

De acuerdo a las lesiones dermatológicas que Killer manifestaba en la trufa y a su estado
clínico, relacionado a la concurrencia a sitios rurales aledaños, y a su antecedente laboral
en el Ejército Nacional; es probableque haya contraído la enfermedad desde hace mucho
tiempo atrás. Debido a la respuesta inmunológica mediada por la línea celular Th1 y
linfocitos CD8, a través de la actividad citolítica directa y producción de interleuquinas
protectoras, el paciente era portador asintomático (Barbieri, 2006). Sin embargo, las
condiciones ambientales, vejez, estrés, o infecciones subclínicas provocaron una
inmunodepresión y el desarrollo de la forma clínica de la infección, convirtiendo al
paciente en un portador sintomático.

    De acuerdo a Greene (2006), la anemia usualmente se desarrolla como secuela de
una eritropoyesis reducida, consecuencia de una infección crónica o de una falla renal
crónica; aunque también puede deberse a pérdida sanguínea en procesos hemorrágicos y
destrucción eritrocitaria provocada por el sistema inmune. Si bien, Killer es un paciente
sinhiporexia, la disminución progresiva de peso no solamente es producida por la
infección parasitaria; sino por una falla renal que se manifiesta a través del tiempo. De
hecho, en el citoquimico de orina, la presencia de bilirrubina y Urobilinógeno puede
deberse a la destrucción eritrocitaria concomitante.

   Aunque los hallazgos clínicos en pacientes con Leishmaniasis visceral canina suelen
ser inespecíficos, la determinación sérica de proteínas a través de proteinogramas es muy
importante. De acuerdo a Sousa y Ferreira (2008), un predominio de caninos infectados
de Leishmaniasis visceral, manifiestan anemia normocíticanormocrómica y aumento de
proteínas plasmáticas totales. La hiperproteinemia en casos infectados, se da como
resultado de un aumento de las gammaglobulinas, a partir de una respuesta inmune
humoral policlonal. Es así, como es común observarse una disminución de albúmina e
inversión de la relación albúmina-globulinas. Estos hallazgos fueron encontrados en la
determinación sérica de albúmina de Killer. De hecho, las proteínas totales en el rango es
compatible     con      el   aumento      de     gammaglobulinas       totales;  hallazgos
paraclínicoscaracterísticos de la Leishmaniasis Visceral Canina.

   De acuerdo a la manera de tomar las muestras de médula ósea, Grindem et al. (2002),
mencionan que las costillas y el esternón son usados frecuentemente para tomar las
muestras en animales grandes. Sin embargo, dichos sitios no deben ser usados para
extraerlas en animales pequeños o gatos. Los sitios para la aspiración citológica de
médula ósea en animales pequeños incluyen la cresta iliaca, el trocánter mayor del fémur
y el tubérculo mayor del húmero. Pueden observarse agentes etiológicos incluyendo
Hemobartonella, Babesia, Cytauxzoon, mórulas de Erlichia, inclusiones del virus del
Distemper canino, Mycobacterium, Leishmania y Toxoplasma; mediante dicha aspiración.
Aunque no hay una técnica diagnóstica que sea 100% específica y sensible, la
directa observación del parásito en muestras de tejido teñidas, son concluyentes (Coura
et al., 2006). Si bien en el caso de Killer se distinguió el parásito en los monocitos de la
muestra obtenida, el hecho de que no hubiesen existido, no indica que el paciente no sea
positivo de Leishmaniasis. Por ésta razón, es muy importante apoyar los casos
sospechosos de infección, con métodos serológicos más específicos. La muestra se
obtuvo de la médula ósea, porque los aspirados a partir de nódulos linfáticos tienen mayor
probabilidad de dar falsos negativos (Corrales, 2007).

   El paciente del caso expuesto, fue diagnosticado de Leishmaniasis visceral de acuerdo
a las observaciones de las formas amastigotes de los parásitos de Leishmaniainfantum.
De hecho, es importante recordar que de acuerdo a Greene (2006), un animal que
manifiesta lesiones cutáneas de Leishmaniasis, debe asociarse a un involucramiento
visceral, porque los parásitos se diseminan a lo largo del cuerpo, antes de desarrollar
lesiones dermatológicas generalizadas.

   Según Greene (2006), la falla renal progresiva puede acompañarse de anorexia,
depresión mental, poliuria, polidipsia y vómito. La falla renal puede ser la única
anormalidad en perros con Leishmaniasis visceral, y los perros con ésta condición deben
ser evaluados en áreas endémicas de Leishmaniasis.

Los factores de riesgo asociados a la enfermedad del paciente, son la exposición de éste
último al vector, encargado de la transmisión de Leishmania en regiones endémicas de
Colombia, la cuenca del Río Magdalena y la Costa Atlántica. Factores de riesgo en
caninos relacionados a estrés y cambio climático, pueden considerarse aspectos
importantes para el desarrollo de la enfermedad, en pacientes asintomáticos (Greene
2006).

   El antimoniato de meglumine es un medicamento de uso restringido, debido a que la
Leishmaniasis es una enfermedad que se relaciona con el conflicto social actual de
Colombia. Los caninos portadores sintomáticos que son afectados y que son
diagnosticados son sacrificados en Colombia. Aunque existen alternativas terapéuticas
para el control de la Leishmaniasis, un estudio realizado por Vercosa et al., (2008),
realizado en Brasil, demuestra la transmisión potencial del agente infeccioso hacia el
vector, de perros sintomáticos en relación a aquellos asintomáticos, diagnosticados con
Leishmaniasis visceral. A partir del xenodiagnóstico de la enfermedad, se logró determinar
que los perros sintomáticos tienen una alta probabilidad de transmisión de la enfermedad
a los vectores; mientras que aquellos que no manifestaron síntomas, no tuvieron ninguna
transmisión hacia el vector Lutzomialongipalpis. Esto quizás, pueda corroborar de alguna
manera la posibilidad de detener la progresión de la enfermedad a través del tratamiento
de la enfermedad de perros diagnosticados con Leishmaniasis visceral.

    La urbanización, unida a la entrada de animales a Colombia, representa otro
importante punto de control a tener en cuenta. Los animales, específicamente mascotas
que ingresan al país, deben en su totalidad tener controles serológicos de ELISA o PCR
de Leishmania estandarizados previamente por el Instituto Colombiano Agropecuario
(ICA). El ingreso de animales desde regiones endémicas, representa un riesgo de
infección importante, aún cuando los portadores pueden llegar a ser los equinos y
pequeños mamíferos, incluyendo roedores (Greene, 2006). La urbanización en Colombia,
por expansión urbana, o en el caso crítico real por desplazamiento forzado, es otro
aspecto de complicada solución; pero que representan un desafío por el esfuerzo de
diagnóstico, control y prevención, que estamos en responsabilidad de observar.
Conclusiones



   La Leishmaniasis visceral canina es un complejo que involucra varias alteraciones
orgánicas, tanto dermatológicas como viscerales. Realizar un monitoreo prolongado de
las funciones tanto hepáticas como renales es importante en pacientes sintomáticos.
Tener en cuenta alternativas terapéuticas en éstos pacientes contribuye al bienestar
animal, lo cual corresponde al objeto de nuestra profesión.

    La evaluación de anfotericina B en su forma emulsificanteliposomal y la inyección de
Glucantimeperilesional tuvieron buenos resultados en éste caso. De hecho, en humanos
la inyección de glucantimeperilesional corresponde a una alternativa terapéutica rutinaria,
en lesiones focalizadas de Leishmaniasis cutánea. Hacen falta aun esfuerzos para
detectar estados latentes de infección en Colombia, para tratar a pacientes convalecientes
tanto sintomáticos como asintomáticos y reducir de ésta forma la capacidad de
transmisión vectorial.
Bibliografía

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623.

Corrales M.G. (2007). Leishmaniosis canina: situación actual en Europa, diagnóstico y
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Coura S.X., DeAndrade M.H., Hadad S.J., Chiarelli I.M., Lima W.G., Marques M.S., Tafuri
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anatomical regions as samplings methods for detection of Leishmania infection in dogs
using histological, inmunohistochemical and PCR methods. Biomed Central, 2,17, 1-7.

Greene C.E. (2006). Leishmaniasis in dogs and cats.En Craig. E.G. (ed.). Infectious
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Sousa F.R.V., Ferreira P.A. (2008). Co-infeccao entre Leishmaniose visceral e
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Vercosa B., Lemos C., Mendoca I., Silva S., Carvalho S., Goto H., Costa F. (2008).
Transmission potential, skin inflammatory response, and parasitism of symptomatic and
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Caso killer final

  • 1. LEISHMANIASIS CANINA CASO CLÌNICO ALEJANDRO DÌAZ CORREA MEDICO VETERINARIO UNIVERSIDAD LA SALLE CLINICA VETERINARIA EL POBLADO MEDELLÌN – ANTIOQUIA 23/08/2012
  • 2. DESCRIPCIÓN DE CASO CLÍNICO RESEÑA Se presenta a consulta diurna a la Clínica Veterinaria El Poblado, paciente de nombre Killer, macho de 4 años de edad, raza Labrador Retriever. Peso de 33.5 kilogramos, procedente de la zona urbana de la ciudad de Medellín. El paciente tiene antecedentes de pertenecer al Ejército Nacional de acuerdo apreciaciones de la persona que llevó la mascota a la clínica veterinaria. Anamnesis No tenía historia previa de enfermedad aparente, en el sistema de registro de los pacientes del centro. No existía registro evidente de programa de vacunación y desparasitación completo. El paciente manifiesta una excoriación y ulceración de la porción nasal craneal y alteración dermatológica focalizada en escroto. Paciente con demasiada producción de orina y aumento exagerado del consumo de agua, de acuerdo apreciaciones de los médicos tratantes de la Clínica Veterinaria El Poblado. Examen Clínico Frecuencia cardiaca de 110 latidos por minuto, 30 ciclos/minuto de frecuencia respiratoria, temperatura 39.8ºC. Ligera distensión abdominal, con apreciación positiva a la palpación abdominal de bazo, en cuadrante cráneo-ventral izquierdo. Mucosas rosadas pálidas. Presión arterial normal y auscultación normal, sin soplo aparente en ninguna de las zonas cardiacas intercostales de auscultación. Examen oftalmológico y otoscópico sin cambios anormales aparentes. Se ha sugerido una ecografía abdominal, donde se revela esplenomegalia a partir de la amplia envergadura de la silueta esplénica, al paso del transductor en el cuadrante medial izquierdo del plano longitudinal medio. Los aspectos más relevantes que incluyeron el examen clínico, corresponden a la excoriación de la porción nasal de la trufa y la herida escrotal de gran tamaño. Signología Ulceración de herida en la región nasal craneodorsal, de aspecto simétrico y localizado. El paciente además evidencia una herida extensiva, de aspecto rugoso, en saco escrotal (Figura 1). Leve secreción conjuntival bilateral, esplenomegalia y congestión hepática con cambio ecogénico no variable de morfología orgánica; hallazgos manifiestos por ecografía abdominal. Ningún otro signo adicional, se presentaba en el paciente, relacionado con la signología anteriormente descrita. Figura 1. Aspecto de lesiones dermatológicas del caso clínico. A. Lesión en porción nasal craneal o en trufa. Las ulceraciones comunes de pacientes con Leishmaniasis, provocan deshidratación e hiperqueratosis en orejas y región nasal. B. Lesión asimétrica y extensiva en región escrotal.
  • 3. Adaptado de: Clínica Veterinaria El Poblado. Hay que tener en cuenta, que no todas las lesiones dermatológicas en región nasal y orejas son indicativas de pacientes con Leishmaniasis. Únicamente, la confirmación del diagnóstico se realiza mediante la visualización directa del parásito a través de aspirados y extensiones teñidas de médula ósea y ganglio linfático; o de métodos serológicos más sensibles como PCR (Reacción en cadena de la polimerasa), IFI (Inmunofluorescencia), entre otras.. Los pacientes de regiones endémicas, o que provienen de éstas, de los cuales sospechamos que existe infección por Leishmaniasp., pero que no ha sido confirmada por visualización en extensiones; deben remitirse de ellos muestras para exámenes serológicos más específicos. Diagnóstico Se plantean diagnósticos diferenciales con respecto a la anamnesis, examen clínico y signología del paciente: Erlichiosis, Leishmaniasis, dermatitis asociada a algún proceso alérgico, neoplasia (Carcinoma de células escamosas),pioderma,dermatopatía autoinmune (pénfigo, lupus eritematoso, etc). Se procedió a realizar análisis y exámenes de laboratorio, que consistían en hemograma completo, bioquímica sérica con medición de albúmina, creatinina, BUN, urianálisis. De acuerdo a la manifestación clínica debida a la esplenomegalia evidente en ecografía abdominal (Figura 2), alteraciones dermatológicas y por los antecedentes de ser de un paciente que estuvo vinculado al Ejército Nacional que desempeñaba la función de desactivación de bombas en zonas rurales, se recomendó inicialmente realizar la punción de médula ósea para descartar proceso parasitario o neoplásico. Figura 2. Esplenomegalia evidente, debido a que la envergadura esplénica alcanza el lado derecho del plano longitudinal medio.
  • 4. Tomado de: Clínica Veterinaria El Poblado. Es importante resaltar, que la esplenomegalia es el resultado de la respuesta inmunológica normal del organismo, ante los eventos de infección por Erlichia, Trypanosoma, Leishmania, Hepatozoon, procesos de linfoma, anemia hemolítica autoinmune, entre otros. La esplenomegalia, es por lo tanto la manifestación morfológica del sistema hemolinfático como respuesta algún proceso que derive en formación de inmunocomplejos o activación del complemento en cualquiera de sus formas. En las tablas 1, 2 y 3, se evidencian los resultados de las pruebas de hemograma, bioquímica sérica y urianálisis. Debido a las amplias alteraciones relacionadas con la funcionalidad orgánica, es posible pensar que la Leishmaniasis visceral canina, sea una enfermedad de afección multisistémica. En la tabla 1, se evidencia un ligero aumento de los glóbulos blancos, aunque esta línea celular puede estar normal o disminuida en pacientes con Leishmaniasis visceral canina. El planteamiento de posibles enfermedades de origen parasitario que nos puede orientar el hemograma, es la disminución exagerada de plaquetas, en combinación con anemia. Los casos en los cuales se determina el hallazgo de pancitopenia, ocurre cuando el sistema inmune no es capaz de producir anticuerpos y los linfocitos T, no reaccionan a la presencia parasitaria (Greene, 2006). Estos casos son de pronóstico muy reservado y el paciente por lo general es sintomático de la Leishmaniasis visceral, con comprometimiento multisistemico grave.
  • 5. Tabla 1. Hemograma de Killer. Serie Urko Valor normal 6 Glóbulos Rojos 6.51 x 10 5.5-8.5 x 10 6/ᶙ l Hematocrito 45.5% 37-55 % Hemoglobina 14.8 12-18 gr/dl MCV 70 60-76 Fl Glóbulos Blancos 17200 6-17 x 10 3/ᶙ l Plaquetas 262000 200-500 x 10 3/ᶙ l Tomado de: Clínica veterinaria El Poblado. En la tabla 2, se anexan los resultados del análisis de orina de Killer. Los cambios relevantes asociados a la orina, son presencia de leucocitos, cuya manifestación indica infección del tracto urinario concomitante. El aumento en la densidad suele verse en pacientes con Leishmaniasis Visceral con indicios de proteinuria o microalbuminuria; hallazgos sugestivos de enfermedad renal precoz. Cuando la enfermedad renal suele prolongarse a través del tiempo, se detenta falla renal crónica con las complicaciones que esta alteración provoca como aumento de urea/BUN, desequlibrio electrolítico, pérdida de proteínas, hiporexia, adelgazamiento progresivo, respuesta inflamatoria local (formación de inmunocomplejos) y sistémica (esplenomegalia) y muerte. Tabla 2. Citoquímico de Orina. Variable Valor Unidades Rango de referencia Color Amarillo Amarillo/transparente Aspecto Ligero turbio Claro Densidad 1048 Mg/dl 1010-1030 PH 7 Variable Leucocitos 100 Leu/uL Negativo Nitritos Neg Mg/dl Negativo Proteínas Neg Mg/dl Negativo Glucosa Normal Mg/dl <50mg/dl Cuerpo Neg Mg/dl Negativo cetónicos Urobilinógeno 4 Normal Bilirrubina 1 Mg/dl Negativo Eritrocitos Neg Er/dl Negativo Tomado de: Clínica veterinaria El Poblado. De acuerdo a los hallazgos vistos en el citoquímico de orina de Killer, es posible que la presencia de leucocitos sea el resultado de una infección del tracto urinario bajo concomitante. La orina fue recolectada por cistocentesis, con previa desinfección de la piel, en el lugar de la punción. Las proteínas están normales, lo cual indica que no existe compromiso renal glomerular. Sin embargo la microalbuminuria, es indicativa de compromiso renal glomerular precoz en pacientes con Leishmaniasis Visceral. Por tanto, en estos pacientes, realizar exámenes de Creatinina séricos seriados es importante para monitorear la capacidad renal. Por último, la presencia de Urobilinógeno y bilirrubina pueden deberse a destrucción eritrocitaria, causada por la reacción inmune. En relación a que la Leishmanisis Visceral provoca alteraciones relacionadas con las proteínas, se decidió realizar un proteinograma con el fin de confirmar los hallazgos que paraclínicamente también se observan en pacientes convalecientes por ésta enfermedad. La hipoalbuminemia es consistente en pacientes sintomáticos con Leishmaniasis, aunque
  • 6. las proteínas totales puedan estar en el rango normal. De hecho, el aumento de las gammaglobulinas pueden relacionarse con que las proteínas totales estén en rango. Tabla 3. Proteinograma de Killer Fracción Resultado Unidades V. normales Albúmina 19.8 Gr/dl Adultos: 25-35 Cachorros: 22-29 Proteínas Totales 72 Gr/dl 55-78 Tomado de: Clínica veterinaria El Poblado. A partir de la sintomatología, los hallazgos clínicos y físicos, y la anamnesis del paciente; se decide realizar una citología por aspiración con aguja fina de médula ósea, con el objetivo de visualizar posibles formas amastigotes de Leishmania en el interior de monocitos y macrófagos. La visualización directa de las formas amastigotes del parásito, fue suficiente para determinar el diagnóstico clínico. En la figura 3, se muestra la manera de extraer la muestra de médula ósea, a través del cartílago costocondral de la octava costilla del lado izquierdo de Killer. Figura 3. Extracción de muestra de médula ósea. Tomado de: Centro Veterinario El Poblado. En animales de raza grande, como en éste caso el Labrador Retriever, la muestra de médula ósea para valoración de celularidad y hallazgos oportunos de parásitos intracelulares, se puede obtener de las costillas, bajo técnicas de extracción anteriormente ensayadas. El riesgo de perforar un pulmón con la aguja, y consecuentemente provocar un neumotórax de tensión, es posible si la técnica no se realiza de la forma adecuada. Otro riesgo que puede presentarse a la hora de extraer la muestra, es la ruptura de la aguja dentro del tejido; una posibilidad si el paciente temperamentalmente no permite extraer la muestra y por lo tanto debemos sedarlo.
  • 7. Posteriormente a la extracción, se realizó un extendido de la muestra en portaobjetos y se realizó tinción de Giemsa, para determinación de la celularidad y presencia de amastigotes de Leishmaniainfantum. En la figura 4, se evidencian las formas encontradas del parásito dentro de un monocito del paciente del actual caso. Un solo monocito infectado, es considerado como diagnóstico de la enfermedad. Cuando no se evidencian formas amastigotes del parásito, pero hay sospecha de la enfermedad por región de procedencia, signología y alteraciones dermatológicas que no responden al tratamiento; se procede a enviar exámenes específicos serológicos a laboratorios especializados. La elección del diagnóstico es importante. Pueden existir falsos negativos, siendo portadores los pacientes de la infección. Por dicha razón es esencial hacer exámenes seriados y contínuos. Tanto en Colombia como en el mundo, se requieren de esfuerzos en la investigación animal, relacionados a estandarizar los métodos de diagnóstico de la Leishmaniasis visceral canina. Figura 4. Amastigotes de Leishmaniainfantum encontrados en monocito de Killer. Delimitación: Indicación de formas parasitarias (amastigotes), en un monocito, del paciente estudiado. Tinción de Giemsa, x 100. Adaptado de: Centro Veterinario El Poblado. A través de la visualización directa de las formas amastigotes de Leishmaniainfantum, se permitió definir el diagnóstico definitivo, Leishmaniasis Visceral Canina. Según Greene (2006), los amastigotes viajan a lo largo del cuerpo, primariamente en los órganos del sistema hemolinfático y áreas remotas de la piel hasta crear una infección generalizada. Sin embargo, cuando la infección es latente y diseminada por todo el organismo, los pacientes pueden ser asintomáticos. El paciente es hospitalizado por varios días bajo monitoreo clínico y se explica a los dueños la importancia de la enfermedad. El pronóstico de los médicos veterinarios de la Clínica Veterinaria El Poblado, en relación al caso de Killer era reservado. Los pacientes con Leishmaniasis sintomáticos representan en Colombia un riesgo para la salud pública. Sin embargo existen en el mundo alternativas terapéuticas que a nuestro criterio pueden utilizarse en éstos pacientes como las que explicaremos a continuación.
  • 8. Tratamiento Se decidió trabajar la terapéutica del caso de forma localizada (es decir en las regiones donde la Leishmaniasis manifestaba su presencia de manera cutánea). Aunque es importante evaluar el seguimiento de las afecciones dermatológicas, también lo es monitorear tanto la función renal como hepática (hallazgos incluidos en el complejo de la Leishmaniasis Visceral). La lesión del escroto se trato con anfotericina B; utilizado en lesiones por Leishmaniasis. Su mecanismo de acción se basa en la fijación a la membrana plasmática de las células, alterando la permeabilidad celular de la Leishmania presente. Sin embargo, la anfotericina en tratamientos prolongados, puede desencadenar insuficiencia renal y seguidamente falla renal. Por lo tanto es indispensable el monitorero de éstos pacientes conforme pasa el tiempo. La aplicación del producto se realizó cada 12 horas durante 1 mes aproximadamente. En cuanto a la lesión de la trufa, se programaron inyectologías de antimoniato de meglumineperilesional cada 7 dias durante tres sesiones. Los antimoniatos pentavalentes, son transformados en trivalentes por los macrófagos para ejercer su acción contra la Leishmaniasp. El mecanismo de acción de éste compuesto esta mediado por la interferencia de los amastigotes de Leishmania, inhibiendo la glucólisis y oxidación β de los ácidos grasos, provocando una importante reducción de ATP y Glutamil- Fosfotransferasa (GPT). Se inyectó 1 cm de glucantime por centímetro cuadrado de la lesión de la trufa de Killer. Inicialmente la lesión era húmeda, cavitaria y profunda; y con el tratamiento la lesión se volvió de característica costrosa, irregular y más superficial (Figura 5). Figura 5. A, B y C. Lesiones de Trufa de Killer a los 5, 10 y 15 días respectivamente post tratamiento con inyección de Glucantimeperilesional. D y E. Lesiones de escroto a los 5 y 10 días post tratamiento con emulsión grasa de Anfotericina B. Tomado de: Clínica Veterinaria El Poblado.
  • 9. Se realizaron mediciones de las lesiones cutáneas cada 5 días con buenos resultados en cuanto a la evolución favorable de las alteraciones dermatológicas. En cuanto a la lesión de la nariz, la inyectologíaperilesional promovió la cicatrización por segunda intención, debido a la formación costrosa, respecto del aspecto húmedo que manifestaba al principio. Se observó disminución del tamaño de la lesión tanto a lo ancho como a lo largo. En cuanto a la lesión escrotal, la disminución del tamaño de la lesión fue considerable. El aspecto de la lesión escrotal de Killer al darse de alta, manifiesta bordes reactivos y reducción en el tamaño. Discusión del caso De acuerdo a las lesiones dermatológicas que Killer manifestaba en la trufa y a su estado clínico, relacionado a la concurrencia a sitios rurales aledaños, y a su antecedente laboral en el Ejército Nacional; es probableque haya contraído la enfermedad desde hace mucho tiempo atrás. Debido a la respuesta inmunológica mediada por la línea celular Th1 y linfocitos CD8, a través de la actividad citolítica directa y producción de interleuquinas protectoras, el paciente era portador asintomático (Barbieri, 2006). Sin embargo, las condiciones ambientales, vejez, estrés, o infecciones subclínicas provocaron una inmunodepresión y el desarrollo de la forma clínica de la infección, convirtiendo al paciente en un portador sintomático. De acuerdo a Greene (2006), la anemia usualmente se desarrolla como secuela de una eritropoyesis reducida, consecuencia de una infección crónica o de una falla renal crónica; aunque también puede deberse a pérdida sanguínea en procesos hemorrágicos y destrucción eritrocitaria provocada por el sistema inmune. Si bien, Killer es un paciente sinhiporexia, la disminución progresiva de peso no solamente es producida por la infección parasitaria; sino por una falla renal que se manifiesta a través del tiempo. De hecho, en el citoquimico de orina, la presencia de bilirrubina y Urobilinógeno puede deberse a la destrucción eritrocitaria concomitante. Aunque los hallazgos clínicos en pacientes con Leishmaniasis visceral canina suelen ser inespecíficos, la determinación sérica de proteínas a través de proteinogramas es muy importante. De acuerdo a Sousa y Ferreira (2008), un predominio de caninos infectados de Leishmaniasis visceral, manifiestan anemia normocíticanormocrómica y aumento de proteínas plasmáticas totales. La hiperproteinemia en casos infectados, se da como resultado de un aumento de las gammaglobulinas, a partir de una respuesta inmune humoral policlonal. Es así, como es común observarse una disminución de albúmina e inversión de la relación albúmina-globulinas. Estos hallazgos fueron encontrados en la determinación sérica de albúmina de Killer. De hecho, las proteínas totales en el rango es compatible con el aumento de gammaglobulinas totales; hallazgos paraclínicoscaracterísticos de la Leishmaniasis Visceral Canina. De acuerdo a la manera de tomar las muestras de médula ósea, Grindem et al. (2002), mencionan que las costillas y el esternón son usados frecuentemente para tomar las muestras en animales grandes. Sin embargo, dichos sitios no deben ser usados para extraerlas en animales pequeños o gatos. Los sitios para la aspiración citológica de médula ósea en animales pequeños incluyen la cresta iliaca, el trocánter mayor del fémur y el tubérculo mayor del húmero. Pueden observarse agentes etiológicos incluyendo Hemobartonella, Babesia, Cytauxzoon, mórulas de Erlichia, inclusiones del virus del Distemper canino, Mycobacterium, Leishmania y Toxoplasma; mediante dicha aspiración.
  • 10. Aunque no hay una técnica diagnóstica que sea 100% específica y sensible, la directa observación del parásito en muestras de tejido teñidas, son concluyentes (Coura et al., 2006). Si bien en el caso de Killer se distinguió el parásito en los monocitos de la muestra obtenida, el hecho de que no hubiesen existido, no indica que el paciente no sea positivo de Leishmaniasis. Por ésta razón, es muy importante apoyar los casos sospechosos de infección, con métodos serológicos más específicos. La muestra se obtuvo de la médula ósea, porque los aspirados a partir de nódulos linfáticos tienen mayor probabilidad de dar falsos negativos (Corrales, 2007). El paciente del caso expuesto, fue diagnosticado de Leishmaniasis visceral de acuerdo a las observaciones de las formas amastigotes de los parásitos de Leishmaniainfantum. De hecho, es importante recordar que de acuerdo a Greene (2006), un animal que manifiesta lesiones cutáneas de Leishmaniasis, debe asociarse a un involucramiento visceral, porque los parásitos se diseminan a lo largo del cuerpo, antes de desarrollar lesiones dermatológicas generalizadas. Según Greene (2006), la falla renal progresiva puede acompañarse de anorexia, depresión mental, poliuria, polidipsia y vómito. La falla renal puede ser la única anormalidad en perros con Leishmaniasis visceral, y los perros con ésta condición deben ser evaluados en áreas endémicas de Leishmaniasis. Los factores de riesgo asociados a la enfermedad del paciente, son la exposición de éste último al vector, encargado de la transmisión de Leishmania en regiones endémicas de Colombia, la cuenca del Río Magdalena y la Costa Atlántica. Factores de riesgo en caninos relacionados a estrés y cambio climático, pueden considerarse aspectos importantes para el desarrollo de la enfermedad, en pacientes asintomáticos (Greene 2006). El antimoniato de meglumine es un medicamento de uso restringido, debido a que la Leishmaniasis es una enfermedad que se relaciona con el conflicto social actual de Colombia. Los caninos portadores sintomáticos que son afectados y que son diagnosticados son sacrificados en Colombia. Aunque existen alternativas terapéuticas para el control de la Leishmaniasis, un estudio realizado por Vercosa et al., (2008), realizado en Brasil, demuestra la transmisión potencial del agente infeccioso hacia el vector, de perros sintomáticos en relación a aquellos asintomáticos, diagnosticados con Leishmaniasis visceral. A partir del xenodiagnóstico de la enfermedad, se logró determinar que los perros sintomáticos tienen una alta probabilidad de transmisión de la enfermedad a los vectores; mientras que aquellos que no manifestaron síntomas, no tuvieron ninguna transmisión hacia el vector Lutzomialongipalpis. Esto quizás, pueda corroborar de alguna manera la posibilidad de detener la progresión de la enfermedad a través del tratamiento de la enfermedad de perros diagnosticados con Leishmaniasis visceral. La urbanización, unida a la entrada de animales a Colombia, representa otro importante punto de control a tener en cuenta. Los animales, específicamente mascotas que ingresan al país, deben en su totalidad tener controles serológicos de ELISA o PCR de Leishmania estandarizados previamente por el Instituto Colombiano Agropecuario (ICA). El ingreso de animales desde regiones endémicas, representa un riesgo de infección importante, aún cuando los portadores pueden llegar a ser los equinos y pequeños mamíferos, incluyendo roedores (Greene, 2006). La urbanización en Colombia, por expansión urbana, o en el caso crítico real por desplazamiento forzado, es otro aspecto de complicada solución; pero que representan un desafío por el esfuerzo de diagnóstico, control y prevención, que estamos en responsabilidad de observar.
  • 11. Conclusiones La Leishmaniasis visceral canina es un complejo que involucra varias alteraciones orgánicas, tanto dermatológicas como viscerales. Realizar un monitoreo prolongado de las funciones tanto hepáticas como renales es importante en pacientes sintomáticos. Tener en cuenta alternativas terapéuticas en éstos pacientes contribuye al bienestar animal, lo cual corresponde al objeto de nuestra profesión. La evaluación de anfotericina B en su forma emulsificanteliposomal y la inyección de Glucantimeperilesional tuvieron buenos resultados en éste caso. De hecho, en humanos la inyección de glucantimeperilesional corresponde a una alternativa terapéutica rutinaria, en lesiones focalizadas de Leishmaniasis cutánea. Hacen falta aun esfuerzos para detectar estados latentes de infección en Colombia, para tratar a pacientes convalecientes tanto sintomáticos como asintomáticos y reducir de ésta forma la capacidad de transmisión vectorial.
  • 12. Bibliografía Barbieri C.L. (2006). Immunology of canine Leishmaniasis.Parasite Immunology, 18, 617- 623. Corrales M.G. (2007). Leishmaniosis canina: situación actual en Europa, diagnóstico y control. Acta ScientiaeVeterinariae, 35,2, 227-229. Coura S.X., DeAndrade M.H., Hadad S.J., Chiarelli I.M., Lima W.G., Marques M.S., Tafuri L.W., Luiz T.W. (2006). Comparison of paraffin-embedded skin biopsies from different anatomical regions as samplings methods for detection of Leishmania infection in dogs using histological, inmunohistochemical and PCR methods. Biomed Central, 2,17, 1-7. Greene C.E. (2006). Leishmaniasis in dogs and cats.En Craig. E.G. (ed.). Infectious diaseases of the dog and cat. (pp. 685-696).EstadosUnidos: Saunders Elsevier. Grindem C.B., Neel J.A., Joupperi T.A. (2002, Junio).Bone marrow biopsies and cytology.The Veterinary Clincis of North America, 1313-1373. Sousa F.R.V., Ferreira P.A. (2008). Co-infeccao entre Leishmaniose visceral e Erlichiosemonocíticaem caes de Cuiaba, Mato Grosso. Acta ScientiaeVeterinarie, 36,2, 113-117. Vercosa B., Lemos C., Mendoca I., Silva S., Carvalho S., Goto H., Costa F. (2008). Transmission potential, skin inflammatory response, and parasitism of symptomatic and asymptomatic dogs with visceral Leishmaniasis. Biomed Central, 4, 45-52.