Este documento describe la tinción negativa, un método de tinción que permite observar la morfología y tamaño de bacterias sin alterarlas. Usa colorantes negros como la tinta china que no penetran la célula bacteriana debido a su carga negativa, haciendo que la bacteria se vea transparente sobre un fondo oscuro. Esto facilita ver estructuras como las cápsulas bacterianas que aparecen como zonas claras alrededor de las células. La tinción negativa se usa principalmente para detectar la presencia de c
Son organismos procariotas unicelulares, que se encuentran en casi todas las partes de la Tierra. Son vitales para los ecosistemas del planeta. Pueden observarse directamente al microscopio de campo claro. Sin embargo, debido al bajo contraste entre las células y su entorno, estos procedimientos se utilizan en ocasiones muy limitadas, como por ejemplo para la observación de la movilidad bacteriana.
2. Introducción
Tinta china (suspensión de
partículas de carbono
coloidal)
Nigrosina (colorante negro
insoluble al agua)
Técnica que permite contrastar las
muestras mediante una sustancia
opaca a los fotones (microscopia
óptica) o a los electrones
(microscopia electrónica). Este
método de tincion utiliza colorantes
neutros o ácidos ya que tiene poca
afinidad por la célula bacteriana.
3. Facilita las observaciones de la
morfología y tamaño de las
Bacterias sin alteración por
efecto del calor así como la
cápsula de algunas bacterias.
TINCIÓN
SIMPLE
4. La cápsula también llamada glicocalix es una estructura externa a
la celula formada de polisacaridos o polipeptidos que confiere
protección a las Bacterias en contra la desecación y la fagocitosis.
¿Qué es capsula?
5. En Microbiología médica la
demostración de la presencia de
una cápsula es un medio para
determinar la virulencia del
microorganismo, es decir, el
grado hasta el cual un patógeno
puede causar una enfermedad.
6. HOY
APRENDEREMOS
La extensión sobre un portaobjetos
en forma de capa fina de una mezcla
de bacterias con tinta china o negros
inactividad permite observar en el
microscopio estructuras especiales
como lo son capsukas que aparecen
como una zona clara que rodé la
celula bacteriana en un fondo
obscuro
7. Los tintes ácidos poseen un cromógeno negativo que no penetra la célula
de la bacteria debido a la carga negativa en la pared celular.
La bacteria se verá transparente y el fondo de la laminilla del color del tinte,
que en este caso, es negro.
Mecanismo de acción del colorante
Para encontrar presencia de cápsulas alrededor de células bacterianas y micóticas.
8. Metodología para la observación de cápsulas en tinción negativa.
Tinta china
+
cultivo líquido
Distribuír la mezcla a lo ancho y
colocar otro portaobjetos a 45°
sobre la muestra
9. Metodología para la observación de cápsulas en tinción negativa.
Desplazar el segundo
portaobjetos formando una capa
fina de la muestra.
Dejar secar al aire.
10. Cápsula bacteriana. Se observan las cápsulas bacterianas por tinción
negativa con tinta china
Resultados
11. APLICACIÓN
La tinción negativa se aplica al
estudio de microorganismos (virus,
bacterias, protozoarios),
fragmentos celulares (membranas)
y macromoléculas aisladas
(proteínas)
12. La tinción negativa es un método de coloración especial para destacar
la presencia de la cápsula en algunos microorganismos principalmente
de Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae y Cryptococcus
neoformans
Streptococcus
pneumoniae
Klebsiella
pneumoniae
Cryptococcus
neoformans
13. ¡GRACIAS!
• -Mtz., I. (2014, 28 octubre). Microbiologia, Bacteriologia.
Tipos de tinciones.Tinción negativa. Slides.
https://es.slideshare.net/ceciliaisabelm1/tincin-negativa
