1. EQUIPO 4
ESPECTROFOTOMETRÍA
ULTRAVIOLETA-VISIBLE
QUIMICA ANALITICA
Y METODOS
INSTRUMENTALES
AZMITIA ALEMAN KARINA
IRIS ZAMARRIPA
MARQUEZ MIRANDA KARINA ADELA
OLIVA RAMOS GENESIS

2. ESPECTROFOTOMETRIA
 La espectrometría ultravioleta-visible o espectrofotometría
UV-Vis implica la espectroscopia de fotones en la región de
radiación ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos
visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el
infrarrojo ( IR) cercano.
 En esta región del espectro electromagnético, las moléculas
se someten a transiciones electrónicas.

3. APLICACIONES
 La espect romet r ía UV/Vis se ut i l iza habi tualmente en la determinación cuant i tat iva
de soluciones de iones metál icos de t ransición y compuestos orgánicos muy
conjugados.
 Soluciones de iones metál icos de t ransición
Las soluciones de iones metál icos de t ransición pueden ser coloreadas (es deci r,
absorben la luz visible) debido a que los elect rones en los átomos de metal se pueden
exci tar desde un estado elect rónico a ot ro. El color de las soluciones de iones
metál icos se ve muy afectado por la presencia de ot ras especies, como algunos
aniones .
 Compuestos orgánicos
Los compuestos orgánicos, especialmente aquel los con un al to grado de conjugación,
también absorben luz en las regiones del espect ro elect romagnét ico visible o
ul t ravioleta. Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para
los compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgánicos solubles . Los
disolventes orgánicos pueden tener una signi f icat iva absorción de UV, por lo que no
todos los disolventes son adecuados para su uso en espect romet r ía UV.

4. EL ESPECTROFOTÓMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE
El espectrofotómetro es un instrumento que permi te comparar la
radiación absorbida o transmi tida por una solución que contiene
una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energía radiante. El vidrio,
que parece ser completamente transparente, absorbe longitudes
de onda que per tenecen al espectro visible; el agua absorbe
fuer temente en la región del IR. La absorción de las radiaciones
UV, visibles e IR depende de la estructura de las moléculas, y es
característica para cada sustancia química.
Esta espectrofotometría uti l iza radiaciones del campo UV de 80 a
400 nm, principalmente de 200 a 400 nm (UV cercano) y de luz
visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran uti l idad para
caracterizar las soluciones en la región ul travioleta-visible del
espectro. Se rige por una ley muy impor tante: la ecuación de Beer-
Lamber t .

5. LEY DE BEER-LAMBERT
La espect romet r ía UV -Vis se ut i l iza con mayor f recuencia en forma cuant i tat iva para
determinar las concent raciones de especies absorbentes en solución, usando la Ley
de Beer -Lamber t :
 Fórmula Ley de Beer -Lamber t
 donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una
determinada longi tud de onda, I es la intensidad de t ransmisión, L la longi tud de
ruta a t ravés de la muest ra, y c la concent ración de las especies absorbentes. Para
c a d a e s p e c i e y l o n g i t u d d e o n d a , ε e s u n a c o n s t a n t e c o n o c i d a c o mo a b s o r t i v i d a d
molar o coef iciente de ex t inción.
 L a a b s o r b a n c i a y e x t i n c i ó n ε a v e c e s s o n d e f i n i d a s e n t é r mi n o s d e l o g a r i tmo
natural en lugar de logar i tmo de base 10.
 La ley de Beer -Lamber t es út i l para la caracter ización de muchos compuestos, pero
no si r ve como relación uni ver sal para la concent ración y absorción de todas las
sustancias. En moléculas complejas de gran tamaño, como los t intes orgánicos
(Xy lenol Naranja o Rojo Neut ro, por ejemplo) , a veces se encuent ra una relación
pol inómica de segundo orden ent re la absorción y la concent ración.

6. CARACTERÍSTICAS DEL SISTEMA
 Las muestras en solución se ponen en una pequeña celda de
Si .
 Se uti l izan dos lámparas: una de H o deuterio para la región
UV, y una de W / halógeno para la región visible
 Se uti l iza también una celda de referencia que contiene sólo
solvente.
 La luz pasa simultáneamente por la celda de muestra y la
celda de referencia.
 El espectrómetro compara la luz que pasa por la muestra con
la que pasa por la celda de referencia.
 La radiación transmitida es detectada y el espectrómetro
obtiene el espectro de absorción al barrer la longitud de onda
de la luz.

7. TIPOS DE ESPECTROFOTÓMETROS
Espectrofotómetro de doble haz: es aquel que cuenta con dos
compar timientos para celdas de muestra que le permite
medir simultáneamente la cantidad de energía radiante
absorbida por una matriz (blanco) y la energía absorbida por
la muestra compuesta por la matriz y la especie de interés.
 Espectrofotómetro de haz simple: cuenta con un único
compar timiento de celda con lo cual se debe real izar la
me d id a d e a b s o rc ió n d e l “ b l an c o ” p a r a p o d e r r e g is t rar u n c e ro
(o referencia) y luego medir la absorción de la muestra.

8.  El aspecto t ípico de un espect ro UV es el que se muest ra en la f igura:
 Los máximos de absorción se deben a la presencia de cromóforos en la molécula,
en este caso existen dos absorciones a 190 y 270 nm, pero para caracter izar dichas
absorciones además de la longi tud de onda máxima para cada absorción debemos
recordar la ley de Lamber t -Beer, según la cual :
Absorbancia = ε · l · c
ε = Coef iciente de ext inción molar, es una constante relacionada con el área de
incidencia del cromóforo y la probabi l idad de de que produzca la absorción.
l = recor r ido en cm de la radiación a t ravés de la muest ra
c = concent ración de la muest ra en moles/l i t ro