Este documento describe los principios de funcionamiento de equipos hematológicos y de coagulación. Explica que el sistema Alinity hq realiza análisis cuantitativos y multiparamétricos de hematología de forma continua y accesible. También describe cómo la citometría de flujo y la tecnología de dispersión óptica y fluorescencia miden las propiedades de las células. Finalmente, explica los principios cronométricos y fotométricos detrás del análisis de coagulación en el equipo Star Max.

1. Metodología de funcionamiento de
equipos hematológicos y de
coagulación
MR1 LUIS ANGEL POMA ROMERO

2. Metodología de funcionamiento del
equipo hematológico Alinity hq
 Es un sistema destinado para el análisis cuantitativo y multiparamétrico de
hematología que permite el acceso aleatorio y continuo, así como
procesamiento prioritario y el reanálisis automático de las muestras, todos
ellos controlados mediante una única interfaz de uso de fácil acceso y
manejo.
 Esta interfaz de usuario intuitiva proporciona una visualización del sistema
en tiempo real y una lista de actividades de mantenimiento programadas
lo que reduce el tiempo de interacción del usuario con el sistema
aumentando la productividad.

3. CITOMETRIA DE FLUJO
 Es un proceso de recuento y medición de las propiedades de las células o
partículas que se transportan mediante un fluido a través de la zona de detección.
 Las características químicas y físicas de las células se miden en la zona de
detección
 El enfoque hidrodinámico se utiliza para alinear las células en una fila única para
atravesar la zona de detección.

4. CITOMETRIA DE FLUJO
 Un liquido envolvente carente de células rodea
la muestra diluida y la transporta en un flujo
laminar.
 El flujo laminar evita que el liquido envolvente
y la muestra diluida se mezclen.
 Las tecnologías de citometría de flujo de
dispersión óptica y fluorescencia se utilizan
para analizar las muestras para los parámetros
siguientes: WBC, RBC, NRBC, reticulocitos y
plaquetas

5. TECNOLOGIAS DE DISPERSION
OPTICA Y FLUORESCENCIA
 Las mediciones por dispersión óptica y fluorescencia tienen lugar en la
unidad óptica que se compone de tres subsistemas así:
 Subsistema de iluminación
 Subsistema de la celda de flujo óptico
 Subsistema de recogida y detección

6. Subsistema de iluminación óptica
 Hace referencia a la fuente de luz que
es un Láser.
 El láser genera un haz de luz
polarizada verticalmente con una
longitud de onda de 488 nm que
interacciona con la muestra diluida
para crear la dispersión de la luz y la
fluorescencia.

7. Susbsistema de Celda de Flujo Optica
 Consta de una cámara de flujo de
diseño exclusivo con fondo
acampanado en forma de cono y una
abertura central rectangular.
 Las diluciones de RBC/PLT, WBC y
RETIC se inyectan en la celda de flujo
óptica a través de un conjunto de
inyección.
 La celda de flujo óptica recibe la
dilución de la muestra y el reactivo
envolvente proyecta la dilución de la
muestra como un flujo estrecho en el
interior del reactivo envolvente.
 Las células presentes en la dilución
pasan a través del haz del láser
enfocado.

8. Subsistema de recogida y detección
 Realiza múltiples mediciones de cada célula simultáneamente
 Se compone de dos conjuntos que incluyen ocho detectores ópticos y los
sistemas ópticos de ángulo de avance y lateral
 El conjunto de dispersión lumínica de avance realiza cinco
determinaciones de dispersión de avance de la luz.
 El detector interno del bloque mide la pérdida de luz axial (ALL).
 El detector externo del bloque mide cuatro ángulos de dispersión del ángulo
intermedio (IAS, IAS1, IAS2, IAS3)

9. PRINCIPIO DE LA DISPERSION
LUMINICA
 La dispersión de la luz tiene lugar
cuando el haz del láser choca con
una célula y cambia la dirección.
 Los cambios de dirección son
detectados por sensores que ofrecen
información sobre las estructuras y
conformación de las diferentes clases
de células analizadas.
 Estas características pueden
deducirse a partir de la medición de la
luz dispersada a diferentes ángulos
respecto a la luz del laser.

10. PRINCIPIO DE LA DISPERSION
LUMINICA
 Dispersiones de la luz con la
característica que determinan:
 ALL: Tamaño
 IAS: Complejidad
 PSS: Lobularidad
 DSS: Granularidad

11. PRINCIPIO DE LA DISPERSION
LUMINICA
 Esto se conoce como Separación de
Dispersión con múltiples ángulos
Polarizada (MAPSS).
 Combinaciones de estas mediciones,
junto con la fluorescencia. se utilizan
para realizar las siguientes funciones:
 Determinación de WBC, RBC, PLT,
RETIC, NRBC
 Clasificación de subpoblaciones de
WBC
 Proporciona alertas de morfología

12. PERDIDA DE LUZ AXIAL (ALL)
 Es una medición de la
reducción de la luz de avance
cuando una célula pasa a
través del haz de luz, esta
célula hace que el haz de luz
disminuya.
 Teniendo en cuenta que a
mayor tamaño disminuye el
haz de luz, la señal ALL
determina el tamaño de la
célula

13. DISPERSION DEL ANGULO
INTERMEDIO (IAS)
 Mide y genera cuatro mediciones IAS diferentes
(IAS, IAS1. IAS2 e IAS3)
 Se utilizan para medir la complejidad de las
células especialmente en Leucocitos.
 IAS1: concentración de HGB en un eritrocito, y
el tamaño de las plaquetas.
 IAS2 : tamaño de los eritrocitos.
 El MCV se obtiene tomando la posición IAS2
media de los eritrocitos.
 IAS3: diferenciar las Plaquetas de los eritrocitos
y las plaquetas del ruido.

14. SEPARACION POR DISPERSION
POLARIZADA (PSS)
 Es la luz dispersada lateralmente que se dirige
a ángulos orientados simétricamente a 90°
respecto del haz del láser y se mide con el
detector PSS.
 Esta señal ayuda a diferenciar Leucocitos con
núcleos segmentados (lobularidad alta) de las
células con núcleos simples no segmentados.

15. SEPARACION POR DISPERSION
DESPOLARIZADA (DSS)
 Es la luz dispersada lateralmente que ha sido
despolarizada por una célula durante la
dispersión.
 Esta señal se utiliza para diferenciar
Neutrófilos de Eosinófilos.
 Sinónimo de granularidad de la célula.

16. PRINCIPIOS DE LA
FLUORESCENCIA
 Fenómeno en el que la luz dispersada se absorbe a una longitud de onda
y se emite a otra longitud de onda.
 Se usa para teñir los ácidos nucleicos de la célula.
 Se utiliza para determinar la formula leucocitaria, conocer las
características de los eritrocitos nucleados y los reticulocitos.
 Los reactivos de WBC y RETC tienen colorantes que fluorescen en una
banda de 530 nm cuando el colorante interactúa con los 488nm de la luz
del láser
 Un filtro permite pasar la señal del 530 nm y bloquea la de 488 nm.
 La señal de 530 nm se denomina FLI y se detecta mediante un transistor
fotomultiplicador del conjunto óptico.

17. PROCESO DE MEDICION DE LA
HEMOGLOBINA
 La espectrofotometría de absorción se utiliza para medir la hemoglobina.
 Se basa en la relación lineal, entre la cantidad de luz absorbida por una
muestra homogénea en reposo en una determinada banda de absorción y
la concentración de una sustancia que absorbe la luz en la muestra.
 El sistema utiliza la dilución de la hemoglobina como muestra y un
complejo de hemoglobina como sustancia que absorbe la luz.
 Esto se realiza a una longitud de onda 540 nm

18. CLASIFICACION DE POBLACIONES
POR ANGULOS DE DETECCION
 WBC/NRBC: ALL, IAS, PSS, DSS, FLI
 RBC/PLT: ALL, IAS, IAS1, IAS2, IAS3, PSS
 RETIC: ALL, FLI

19. POBLACIONES CELULARES
 Se utilizan la dispersión óptica y la fluorescencia en
conjunto para realizar el recuento y la clasificación
de las poblaciones celulares siguientes:
 WBC
 Fórmula Leucocitaria (colores en las gráficas ):
 Neutrófilos (amarillo)
 Linfocitos (cian)
 Monocitos (violeta)
 Eosinófilos (verde)
 Basófilos (blanco)
 Granulocitos inmaduras IG (amarillo)
 NRBC
 Reticulocitos

20. Analizador de coagulación automático
Star Max ®
 Es un producto sanitario de diagnóstico in vitro compuesto por un
instrumento de laboratorio y un programa informático, y destinado a su
uso en combinación con una serie de consumibles y reactivos
 Está diseñado para realizar análisis in vitro destinados al diagnóstico y
control de enfermedades relacionadas con la hemostasia
 Permite realizar pruebas cronométricas (medición de un tiempo de
coagulación), colorimétricas o inmunológicas en muestras de plasma

21. Principio de medición cronométrico
 Este principio se basa en la medición de las
variaciones de amplitud de oscilación de la bolita
del interior de la cubeta por medio de unos
sensores electromagnéticos
 La bolita se desplaza con un movimiento
pendular producido por los dos raíles curvos del
fondo de la cubeta y un campo electromagnético
alterno creado por dos bobinas de motorización
independientes.
 Si la viscosidad del medio permanece constante,
la amplitud de oscilación de la bolita no variara.
 La amplitud de oscilación de la bolita disminuirá
al aumentar la viscosidad del medio.

22. Principio de medición cronométrico
 La intensidad del campo magnético de motorización
varia según el tipo de análisis (TP, TTPA, etc.) y el tipo
de coágulo esperado.
 El sistema de detección de la variación de la amplitud
del movimiento de la bolita está compuesto por dos
bobinas de medición.
 La bobina de medición emisora emite un campo
electromagnético. La señal recibida por la bobina de
medición receptora varia en función de la posición de la
bolita dentro de la cubeta.
 Un algoritmo de calculo utiliza estas variaciones del
campo magnético para obtener la amplitud de oscilación
y determinar con precisión los tiempos de coagulación

23. Principio de medición fotométrico
 El principio de detección de los análisis
colorimétricos o inmunologicos realizados
con el sistema STAR Max se basa en la
absorbancia (densidad óptica, DO) de una
luz monocromática (405 o 540 nm)) que
pasa a través de una cubeta en el
momento en el que se está produciendo
una reaccion enzimatica o inmunologica

24. Principio de medición fotométrico
 El medio donde se produce la reacción
absorbe parcialmente la luz incidente que
penetra en la cubeta cuando aquella pasa
a través de él
 Se realiza la medición de la luz transmitida
(I1=I+Ip)
 La influencia de la luz parasita (Ip) se
elimina realizando dos mediciones
consecutivas de la luz transmitida
 I1=I+Ip (primera medición, que incluye la
luz incidente y la luz parasita)
 I2=Ip (segunda medición, en la que se
bloquea la luz incidente y se detecta
únicamente la luz parásita)

25. Principio de medición fotométrico
 Al sustraer el valor de l2 del valor de l1 se
obtiene el valor correspondiente
exclusivamente a la luz incidente
 Se supone que la luz parasita (Ip) es
idéntica en ambas mediciones.
 La absorbancia se obtiene mediante la
aplicación de la siguiente ecuación
 A= -log (I/I0)

26. Principio de medición fotométrico
 Tras medir la absorbancia se aplica la ley
de Beer-Lambert:
 A=εIC
 A= Absorbancia
 ε= Coeficiente de extinción molecular
 I= Longitud del trayecto por fibra óptica
 C Concentración:

27. Principio de medición fotométrico
 La fuente de luz incidente monocromática
(I0) se obtiene mediante la combinación de
una lámpara halógena de tungsteno y de
un filtro monocromático(de 405 o 540 nm)
colocado en un portafiltros móvil
 Estos elementos se encuentran ubicados
en el módulo fotométrico.
 Desde dicho módulo, la luz
monocromática se transmite hasta los
cabezales de medición por medio de fibra
óptica y, desde ahí, otras líneas de fibra
óptica la transmiten hasta la tarjeta de
medición fotométrica

28. Características técnicas
 Tipo:
 Instrumento de diagnostico in vitro
 Analizador multiparamétrico.
 Modo de trabajo paciente por paciente
 Cronometría.
 Fotometría
 Condiciones de uso.
 Para uso en interiores.
 Temperatura de +15 C ° a +32 °C
 Humedad relativa del 20 al 80 %
 Altitud inferior a 2 000 metros

29. Gestión de los productos
 Un cajón dividido en tres zonas
 R0: zona para los controles, calibradores y diluyentes
 R1: zona para los reactivos a distribuir antes de la primera incubación
 R2: zona para los reactivos a distribuir después de la primera incubación

30. Gracias