La información contenida en el ADN en el núcleo de la célula eucariota es expresada en el citoplasma a través de los procesos de transcripción y traducción. La transcripción implica al ADN y otros ácidos nucleicos como el RNAm y el RNAt para copiar la información del ADN en RNA. La traducción luego convierte la secuencia de bases nitrogenadas en el RNAm en una secuencia de aminoácidos para formar proteínas. Las enzimas de restricción juegan un papel clave en los métodos de obtención de

1. Del núcleo al citoplasma: Transcripción y traducción La información contenida en el ADN (núcleo) es expresada en el citoplasma de la célula eucariota REPLICAR, Implica al ADN exclusivamente TRANSCRIBIR y TRADUCIR, Implica al ADN y a otros ácidos nucleicos (RNAm, RNAt, RNAr)

2. Esquema general de la traducción

3. Traducción, de bases nitrogenadas a aminoácidos Inicio de traducción, el codón AUG o codón de inicio

4. A•aminoacil P•peptidil

5. Traducción, de bases nitrogenadas a aminoácidos Elongación

6. Traducción, de bases nitrogenadas a aminoácidos Finalización, el codón UAA, terminación

7. Esquema general de la traducción

8. Metodos de obtencion de ADN recombinante

9. Metodos de obtencion de ADN recombinante

10. Métodos de obtencion de ADN recombinante

11. Métodos de obteción de ADN recombinante

12. Métodos de obtención de ADN recombinante

13. Métodos de obtención de ADN recombinante

15. Enzimas de restricción o endonucleasas Existen 3 tipos de enzimas de restricción: 1. Tipo I y Tipo III: a. Tienen actividad de restricción (cortan) y modificación (metilan). b. Cortan a cierta distancia de la secuencia de reconocimiento, las Tipo I cortan lejos de la secuencia de reconocimiento, ya sea río arriba o río abajo. Las Tipo III cortan de 5-8 bases antes o despúes de la secuencia que reconocen. c. Necesitan ATP para moverse a través de la molécula de DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el sitio del corte. 2. Tipo II: a. Sólo tienen actividad de restricción. b. Cortan de manera consistente y predecible dentro de la secuencia que reconocen. c. Sólo requieren Mg++ como cofactor. d. No necesitan ATP.

16. Aplicaciones de las enzimas de restricción: 1. Hacer mapa de restricción de un plásmido o bacteriófago. 2. Fragmentar DNA genómico para separación de electroforesis y “Southern Blot”. 3. Generación de fragmentos para ser usados como sondas marcadas en “Southern”y “Northern” blotting. 4. Generación de fragmentos para ser subclonados en los vectores apropiados, creación de DNA recombinante.