1. GUIA DE LABORATORIO.
MICROSCOPIA Y DESTILACION POR ARRASTRE DE VAPOR.
I.E.D LICEO FEMENINO MERCEDES NARIÑO
GRADO UNDÉCIMO
Para trabajar en las muestras orgánicas (flores) asignadas a cada grupo (La práctica se
divide en 2 partes, en la primera de ellas ejecutaremos el análisis microscópico de las
muestras, en la segunda extraeremos aceites esenciales de las mismas.
Objetivos.
Observar una célula y esquematizar la observación, relacionándola con los
soportes teóricos.
Reconocer y manejar adecuadamente cada una de las partes de un microscopio
y preparar adecuadamente una muestra para su observación.
Realizar el correcto montaje de laboratorio para una destilación por arrastre de
vapor.
Obtener aceites esenciales de las muestras vegetales trabajadas .
PARTE 1. Microscopia.
A continuación encontrarás los pasos detallados para realizar una correcta práctica de
laboratorio de microscopia, ejecuta los pasos indicados para la práctica y recuerda que a
cualquier duda debes manifestarla a los profesores encargados.
Tabla1. Materiales y reactivos necesarios en la práctica de microscopia.
Materiales Reactivos
Microscopio compuesto Agua destilada
Papel filtro para laboratorio Azul de metileno
Portaobjetos Cebolla cabezona
Cubreobjetos Flores de la planta objeto de estudio
Pinzas Hojas de la planta objeto de estudio
Bisturí Hoja de lirio
Gotero
Caja de petri
2. Imagen 1. Partes generales de un microscopio.
Procedimiento de laboratorio.
a. Preparación de la muestra.
1ª. Tome el microscopio siempre de manera fija del mango destinado a este fin,
transpórtelo siempre con cuidado.
2ª. Localice todas las partes del microscopio y asegúrese de su correcto
funcionamiento.
3ª.Ajuste el diafragma de manera correcta hasta que el campo de visualización este
uniformemente iluminado, siendo de espejo el microscopio use el lado plano del mismo.
4ª. Para la preparación de la muestra tome la hoja por el envés y realice un corte
horizontal delgado (si la muestra lo permite). Con las pinzas tirar de uno de los bordes
del corte rasgando en sentido longitudinal de la hoja. Se desprenderá fácilmente una
fina membrana, que es la epidermis de la hoja. La muestra puede ser de 1 centímetro
por cada lado.
5ª.Tome el portaobjetos y límpielo muy bien con ayuda de las toallitas y un poco de
etanol, o en su defecto agua destilada, seque el portaobjetos muy bien.
6ª. Con el portaobjetos situado encima de la placa de Petri, coloca la muestra y añade a la
muestra unas gotas de colorante y espera, más o menos 5 minutos, para que este ejerza
su acción. Transcurrido los cinco minutos, elimina el colorante vertiendo agua sobre la
muestra, que habrás sujetado al porta con ayuda de unas pinzas. El exceso de agua o de
colorante que queda en los alrededores de la muestra se seca con un trozo de papel de
filtro. Una vez seco el portaobjetos proceda a poner la muestra previamente preparada
sobre el mismo, posteriormente con el gotero ponga una gota de agua sobre la muestra, de
manera rápida tome el cubreobjetos, póngalo sobre la muestra en un ángulo de 45 grados
aproximadamente y déjelo caer sobre la muestra.
3. 7ª. Lleve el sistema anterior sobre la platina del microscopio, para su observación.
b. Ajuste del microscopio.
1b. Usando el tornillo micrométrico para ajustar el objetivo, hasta casi llegar a tocar la
muestra anteriormente dispuesta.
2b. Con ayuda del tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico se debe calibrar la
distancia y por ensayo se ajusta el enfoque del microscopio.
3b. Una vez ajustado el enfoque se procede a realizar las observaciones.
Preguntas tomadas de:
files.integralab.webnode.es/.../OBSERVACION%20DE%20ESTOMAS%
¿Qué es la epidermis de una hoja y qué finalidad tiene? ¿Porqué encontramos en ella
presentan una membrana fácilmente visible. ¿Se trata de la membrana plasmática o de la
pared
Cuál es
relación que existe entre el color observado en los cloroplastos y la función que tienen en
icroscopio óptico. ¿Qué aspecto tendrán las células de
una planta que germinó bajo una roca? Argumenta tu respuesta. Propón un experimento
la teoría celular. Fundamenta este planteamiento.
PARTE 2. Destilación por arrastre de vapor.
Para la segunda parte de la práctica de laboratorio usaremos por grupo las mismas
sustancias orgánicas ya asignadas, el manejo de material debe ser adecuado para evitar
accidentes durante la práctica.
4. Imagen 2. Montaje de destilación arrastre por vapor.
Tabla 2. Materiales y reactivos necesarios en la práctica de arrastre
Materiales reactivos
Soporte universal (2) Agua destilada
Balón de vidrio con desprendimiento
lateral.
Frasco de vidrio con tapón o tubo de
ensayo con tapa rosca
Balón de dos bocas 250 mililitros Muestra a destilar
Mangueras
Tapones de caucho
Refrigerante
Erlenmeyer de 100 mililitros
Placa de calentamiento
Trípode
Mechero Bunsen
Embudo de decantación
Perlas de ebullición
Procedimiento.
1. Acople el balón con desprendimiento (1) a un soporte universal con ayuda de una
pinza metálica o con nuez.
2. Tome el balón con desprendimiento lateral (1) adicione agua hasta llenar ¾ partes
del balón, tápelo con un corcho con orificio e introduzca en este un termómetro.
3. Con ayuda de las mangueras de caucho una el balón (1) al balón de dos bocas (2),
use tapones con orificios para este fin, la conexión proveniente del balón (1) debe
estar sellada totalmente y acoplada a una punta de vidrio que llegue hasta el fondo
del balón (2), el balón se acopla a un soporte universal con ayuda de una pinza
metálica.
5. 4. Tome la muestra vegetal y rásguela en trozos grandes, esto facilitará que la planta
libere sus metabolitos secundarios. Introduzca la muestra vegetal en el balón (2),
agrega 100 mililitros de agua a este balón.
5. posteriormente acople al balón (2) en su extremo libre una T de destilación
acoplada a un refrigerante.
6. Finalmente use un Erlenmeyer para recoger el destilado final.
7. Al finalizar la destilación vierta en producto en un frasco con tapón y márquelo con
el nombre de la planta, curso y fecha.
Preparación del perfume
Materiales reactivos
Pipeta Esencias
Frasco perfumero de 1 onza o menos. Alcohol de perfumería (Etanol o Alcohol
etílico desnaturalizado al 96%)
Agitador de vidrio Fijador (PoliPropilenGlicol o PPG):
Embudo de vidrio Café
Probeta de vidrio
1. Preparación de la esencia. La esencia se prepara mezclando las esencias de tu
elección.
6. 2. Primero se prepara el alcohol con el fijador en proporción 0.016g de PPG/ml etanol.
Se mezclan y agitan hasta lograr una mezcla homogénea.
3. Ponemos el envase elegido sobre una superficie plana . Agregamos dentro del
frasco la esencia y el alcohol y agitamos. Una vez finalizado sellamos el frasco.
4. formula general para hacer perfume :
30% esencia
70% de alcohol perfumol (mezcla de etanol y PPG).
5. El frasco debe dejarse en maduración ocho días dentro de una bolsa negra y
otros ocho en la parte baja de la nevera.