1. LA MITOCONDRIA COMO DIANA
FARMACOLÓGICA
ORIGEN DE LA MITOCONDRIA:
La mitocondria, cuyo nombre proviene del griego mito (hilo) y chondros
(cartílago), es una organela citoplasmática con un origen ciertamente peculiar.
Todas sus características estructurales y funcionales evidencian que en el
nacimiento de la célula eucariota, una bacteria fue fagocitada por un
microorganismo de mayor tamaño con el fin de aprovecharse de la energía, en
forma de ATP, que ésta fabricaba mientras la célula anfitriona dotaba a su
huésped de materias primas y protección. La simbiosis perfecta entre estos dos
organismos primitivos supone en uno de los pasos más importantes de la
evolución.
DATOS RELEVANTES:
 Las mitocondrias tienen más similitudes con las bacterias que únicamente
tamaño y forma.
 La matriz mitocondrial, contiene DNA, RNA y ribosomas que participan
en la síntesis de algunos componentes mitocondriales (el resto es
importado del citoplasma después de su expresión desde el núcleo).
 A pesar de esto, se reproducen por fisión binaria, además el proceso
respiratorio que llevan a cabo, es muy semejante al que se observa en
bacterias aerobias actuales.
 A partir de estas observaciones, Lynn Margulis propuso que el origen de
las mitocondrias modernas es a partir de la endosimbiosis (endo, dentro +
simbiosis relación biológica con beneficio mutuo) de bacterias aerobias
con eucariontes anaerobios antiguos.
 Los nutrientes abastecidos por el eucarionte y consumidos por la bacteria,
fueron presumiblemente reembolsados con creces, debido a la alta
eficiencia metabólica oxidativa que el procarionte (sin núcleo), le dio al
eucarionte.
A lo largo del tiempo, estas bacterias fagocitadas fueron asumiendo tareas cada
vez más relevantes dentro del funcionamiento interno de esta célula primitiva
hasta convertirse en lo que hoy conocemos como mitocondria.

2. LAS MITOCONDRIAS:
Son organelos citoplasmáticos membranosos característicos de las células
eucarióticas. Las mitocondrias poseen una gran importancia, ya que en ellas se
realizan una serie de reacciones de óxido-reducción que permiten el sustento
energético de la célula.
De esta manera, y de forma general, células que realizan un mayor gasto de
energía poseerán una mayor cantidad de mitocondrias.
Su dimensión varia entre 1 a 10 u. Pudiendo las mismas adoptar distintas formas:
 Granular
 Bastoniforme
 Filamentosas
ESTRUCTURA MITOCONDRIAL:
La mitocondria presenta una estructura con dos compartimentos bien definidos,
matriz y espacio intermembranal, delimitados por dos membranas, interna y
externa, con características morfológicas y funcionales bien diferentes.
1.-EN LA MATRIZ se localizan varias copias del genoma circular mitocondrial
(herencia de su pasado procariota), ribosomas, más parecidos a los de las
bacterias que a los de las células eucariotas, y numerosos complejos enzimáticos
necesarios tanto para las funciones energéticas, como para la expresión y la
replicación de genes.

3. 2.-EL ESPACIO INTERMEMBRANAL tiene un menor contenido proteico,
en él se localizan las enzimas que median el tránsito de sustancias entre la matriz
mitocondrial y el citosol.
Del mismo modo, sus membranas presentan también diferencias significativas.
3.-LA MEMBRANA INTERNA, caracterizada morfológicamente por presentar
unas invaginaciones denominadas crestas, presenta multitud de complejos
enzimáticos (los componentes de la cadena transportadora de electrones (CTE),
la ATP sintasa) y proteínas que regulan el paso de metabolitos (como el
transportador de nucleótidos de adenina), resultando especialmente impermeable
a iones.
4.-LA MEMBRANA EXTERNA, a diferencia de la interna y debido a la
presencia de la proteína porina, conocida en la actualidad como canal aniónico
dependiente de voltaje (VDAC), es permeable, en condiciones fisiológicas, al
paso de iones y de metabolitos con pesos moleculares inferiores a 6000 Daltons.
FUNCION MITOCONDRIAL:
La función mitocondrial se basa en los siguientes aspectos: abastecimiento
energético de la célula y en la regulación de los niveles de calcio y otros
segundos mensajeros como las EROS.
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
La fosforilación oxidativa es una serie de eventos químicos que llevan a la
síntesis de ATP.
La mitocondria, y en concreto su matriz, es el escenario donde tiene lugar la
fosforilación oxidativa, a través de la cual se genera poder reductor en forma de
NADH y FADH2, que son utilizados como donadores de electrones en la cadena
respiratoria, estos interaccionan con el oxigeno molecular, el cual es un potente
aceptor de electrones. De hecho el flujo neto de electrones desde el NADH
hasta el Oxígeno resulta en la síntesis de ATP. (Jordán, 2004)
Proceso:
 Acoplado al transporte de los electrones (por una serie de complejos
enzimáticos —I, II, III y IV, que forman la cadena transportadora de
electrones) y gracias a la energía liberada, tiene lugar la salida de tres
protones desde la matriz hasta el espacio intermembranal, originando un
gradiente electroquímico entre los dos compartimentos.

4.  Esta energía es utilizada por la enzima ATP sintasa o complejo V,
localizada en la membrana interna, para fosforilar moléculas de ADP
dando lugar a ATP, a la vez que los protones vuelven a la matriz a favor
de gradiente.
CAPTACION DE Ca+2
Por otro lado, las mitocondrias, gracias a su capacidad de internalizar Ca2+ y
precipitarlo en su interior en forma de fosfatos, participan, junto con el retículo
endoplasmático y las bombas iónicas y canales localizados en la membrana
celular, en la regulación de los niveles citoplasmáticos del catión calcio libre.
(Villalobos, Carlos - Sanz Blasco Sara - STAF LABORATORY, 2006)
 El Ca2+ intracelular es un mensajero versátil y del universal segundo
implicado en el control de una gran cantidad de funciones celulares y
fisiológicas en esencialmente todos los tipos de células.
 Las señales de Ca2+ regulan no sólo funciones a corto plazo de la célula
tales como exocitosis y contracción del músculo sino también desempeñan
un papel fundamental en el control de las funciones de largo plazo de la
célula como proliferación de célula.
 Las señales de Ca2+ activan los genes responsables de la entrada de
reclinar las células en el ciclo celular, promueven síntesis de la DNA y
estimulan diversos acontecimientos en la mitosis.
SISTEMAS DE TRANSPORTE DE CA2+
Se conocen tres sistemas de transportadores que controlan la entrada y la salida
de este catión en la mitocondria:
 El uniporte de Ca2+

5.  El antiporte 2Na+/Ca2+,
 El antiporte Ca2+/2H+.
El primero de ellos es un transportador electrogénico y el único que se encarga
de internalizar Ca2+ en la mitocondria, presenta baja afinidad por el Ca2+ y
puede ser inhibido por el rojo de rutenio y el Mg2+.
Por otro lado, el sistema antiporte Na+/Ca2+, inhibido por fármacos bloqueantes
de los canales de Ca2+, y el sistema de antiporte dependiente de energía
Ca2+/2H+, localizado en las mitocondrias de algunas células, realizan la
liberación del Ca2+ en respuesta a determinados estímulos.
APLICACIÓN EXPERIMENTAL:
Experimentos donde se determinó la concentración de calcio mitocondrial
[Ca2+]m gracias al uso de acuorinas, han demostrado que cambios rápidos en la
concentración de calcio citoplasmático[Ca2+]c producidos, por ejemplo, por la
estimulación de la célula nerviosa, tienen su representación en la mitocondria, y
con una amplitud muy elevada, aunque de una duración muy corta, ya que es
rápidamente compensada por la salida de Ca2+.
 En respuesta a este incremento de [Ca2+]m se produce, por ejemplo, la
activación de rutas metabólicas, generando más cantidad de energía para
la célula.
 Además, se ha observado que esta regulación de los niveles de [Ca2+]c
llevada a cabo por la mitocondria también es esencial, en las células
excitables, para el correcto funcionamiento de los sistemas que controlan
la liberación de neurotransmisor.
Sin embargo, en condiciones patológicas, donde las [Ca2+]c se encuentren
elevadas de forma sostenida, la entrada de Ca2+ a la matriz es desmesurada y
conduce a efectos muy diferentes, como es la activación de forma rotunda del
sistema de uniporte de Ca2+, con la consiguiente saturación de los sistemas de
salida de calcio, obteniendo como resultado cambios drásticos en el interior de la
mitocondria.
Una mitocondria dañada dilata los ciclos metabólicos, relentiza el proceso
energético y consume más energía. El exceso de energía consumida para el
mismo rendimiento inhibe la capacidad de comunicación con las células vecinas
y promueve la muerte celular.
FUENTE DE EROS:

6. Finalmente, se ha propuesto a la mitocondria como la fuente de EROS más
importante en el interior de las células.
Como resultado de una reducción defectuosa del oxígeno durante la fosforilación
oxidativa puede tener lugar, en la matriz mitocondrial, la generación de especies
reactivas del oxígeno (EROS), como el superóxido que, constituyen una pieza
clave en el envejecimiento celular.
LA MITOCONDRIA UNA ORGANELA
ENERGETICA EN EXPANSIÓN:
En la actualidad se sabe que esta organela, no solo supone la fuente energética
para el funcionamiento celular, sino que también desempeña un papel esencial en
la regulación de los niveles de segundos mensajeros como el Ca2+ o las especies
reactivas de oxígeno (EROS) en el citoplasma.
ESPECIES REACTIVAS DE OXIGENO (EROS)
La estructura electrónica del oxígeno hace que sea susceptible de reducciones
parciales, produciéndose Especies Reactivas de Oxígeno (EROs)
Las especies reactivas del oxígeno incluyen:
 iones de oxígeno
 radicales libres
 peróxidos tanto inorgánicos como orgánicos.
Son generalmente moléculas muy pequeñas altamente reactivas debido a la
presencia de una capa de electrones de valencia no apareada.
Estas especies se forman de manera natural como subproducto del metabolismo
normal del oxígeno y tienen un importante papel en la señalización celular. Sin
embargo, en épocas de estrés ambiental sus niveles pueden aumentar en gran
manera, lo cual puede resultar en daños significativos a las estructuras celulares.
Esto lleva en una situación conocida como estrés oxidativo.
Las principales especies reactivas del oxígeno o sustancias pro-oxidantes son:
− Radical hidroxilo (HO)+
− Peróxido de hidrógeno (H2O2)
− Anión superóxido (O2)
− Oxígeno singlete (1O2)
− Oxígeno nítrico (NO)
− Peróxido (ROO)
− Semiquinona (Q)

7. − Ozono
Las EROS se pueden originar en cualquier compartimento celular como
resultado normal de su fisiología, se pueden formar a nivel de mitocondrias,
como de retículo endoplasmico.
EQUILIBRIO OXIDANTES—ANTIOXIDANTES
Las especies reactivas del oxigeno (EROs) se producen normalmente en las
células como producto del metabolismo celular. La concentración de EROS es
finamente controlada por acción de los antioxidantes
 Si un agente estresante induce un aumento en la producción de EROs, este
equilibrio puede romperse causándose daños en las estructuras celulares
 Los daños serán reparados por mecanismos celulares específicos. Si no se
recupera el equilibrio se producirán disfunciones que pueden desembocar
en la muerte celular.
EFECTOS DAÑINOS
Normalmente las células son capaces de defenderse a sí mismas contra los daños
de las especies reactivas del oxígeno mediante el uso de enzimas como la
superóxido dismutasa y la catalasa. Pequeñas moléculas antioxidantes como el
ácido ascórbico (vitamina C), ácido úrico, y glutatión también desempeñan un rol
importante como antioxidantes celulares.
Los efectos de las especies reactivas del oxígeno sobre el metabolismo celular
han sido bien documentadas en una gran variedad de especies. Estos incluyen no
sólo los roles en la muerte celular programada y la necrosis, sino también efectos
positivos, tales como:
 La inducción de genes de defensa y la movilización de los sistemas de
transporte de iones.
 También se lo implica con frecuencia en funciones de señalización redox
o señalización oxidativa.
 Estas también proporcionan un enlace a la adaptación del sistema inmune
a través de la reclutación de glóbulos blancos.
 La señalización redox también está implicada en la mediación de la
apoptosis o muerte celular programada y en la lesión isquémica. Ejemplos
concretos son los accidentes cerebro vasculares y ataques cardíacos.
En general, los efectos nocivos de las especies reactivas del oxígeno en la célula
son:

8. 1. Daños al ADN
2. Oxidación de ácidos grasos poliinsaturados
3. Oxidación de aminoácidos en las proteínas
LA MITOCONDRIA Y SU RELACIÓN
RELEVANTE CON LA APOPTOSIS:
Pero quizás el descubrimiento más importante sobre esta organela sucedió hace
un par de décadas, cuando se observó que su presencia era necesaria para la
inducción de muerte celular programada, de forma que, estudios recientes
sitúan a la mitocondria como el punto donde convergen diferentes vías de
señalización apoptótica.
Esta organela, a través de la regulación de la permeabilidad de sus membranas,
controla la liberación al citoplasma gran cantidad de sustancias de naturaleza
proteica (Citocromo C, AIF, SMAC/Diablo, etc.) que son capaces de activar
rutas de señalización (factores proapoptoticos) necesarias para que se produzca la
muerte programada de la célula.
El lanzamiento de factores proapoptoticos se relaciona con un aumento enorme
en la permeabilidad de la membrana mitocondrial interna.
Varios factores promueven este aumento de la permeabilidad incluyendo:
 La tensión oxidativa.
 Pérdida de potencial mitocondrial.
 Sobrecarga especialmente mitocondrial de la concentración de Ca2+.
PROCESOS APOPTÓTICOS.

9. Los procesos de apoptosis se ejecutan normalmente durante el desarrollo para
suprimir las células innecesarias o para eliminar las células que han sido dañadas
por distintos agentes estresantes, tales como la radiación o la oxidación.
 Si la apoptosis no está operando correctamente, sin embargo, pueden
presentarse tumores, inmunodeficiencia, autoinmunidad o trastornos
neurodegenerativos.
 Cuando la célula no consigue el ATP suficiente para su funcionamiento,
su citoplasma y membrana cambian su configuración, entrando en lo que
se denomina senescencia. Las células T detectan las células senescentes y
les insertan la información necesaria para que inicien su programa de
autodestrucción o apoptosis.
APLICACIÓN EXPERIMENTAL:
En la última década del siglo pasado, en el laboratorio del Prof. J.C. Reed en
la Fundación para la Investigación sobre el Cáncer en California se obtuvo la
primera indicación de que la mitocondria desempeña un papel importante en
la inducción de la apoptosis, al demostrar que la presencia de esta organela
era necesaria para inducir apoptosis en un tubo de ensayo.
Desde entonces los estudios se han dirigido a analizar diferentes características
de esta organela que son esenciales para que ejerza este papel, tales como su
capacidad de regular la permeabilidad de sus membranas, controlando la
liberación de componentes proteicos al citoplasma y la producción de radicales
libres como el superóxido.

10. VÍAS DE SEÑALIZACIÓN DE LA APOPTOSIS
Existen tres vías principales para la transmisión de una señal apoptótica:
– La primera ocurre cuando el sistema nervioso es sobreexcitado por
glutamato, como ocurre en los procesos isquémicos.
En ellos se ha observado una entrada masiva y prolongada del ión Ca2+ al
citoplasma, que es «detectada» por la mitocondria.
– La unión de ligandos a receptores «de muerte», como el TNFR1 o Fas
localizados en la membrana citoplasmática activa rutas de señalización que se
dirigen a la mitocondria.
– Por último, el daño en el genoma celular puede ser detectado por ciertos
factores de transcripción, como p53, que inducen el incremento de las
concentraciones citoplasmáticas de ciertas proteínas que se translocan a la
mitocondria para ejercer efecto proapoptótico.
LA APERTURA DEL PORO DE PERMEABILIDAD
TRANSITORIA MITOCONDRIAL:
Todos estos procesos se ven traducidos a nivel mitocondrial en la formación de
una estructura multiproteica, en las zonas de unión de sus membranas, que se
conoce como «poro de permeabilidad transitoria mitocondrial» (PPTM), y que se
presenta como el eje del desencadenamiento de una señal apoptótica.
Cuando estos estímulos llegan a la mitocondria, diferentes proteínas, entre las
que destaca el ANT-proapoptico y el VDAC (Voltaje Dependent Anion
Channel), se ven modificadas para la generación de un poro de dimensiones
exageradas y por el cual se produce la liberación, entre otras sustancias, de
compuestos con conocida actividad pro-apoptótica, como citocromo C, la
proteína Smac/Diablo, el factor inductor de apoptosis y algunos miembros de
la familia de las caspasas (ejecutoras más importantes de las últimas fases de la
apoptosis gracias a su actividad catalítica).
Este proceso está altamente regulado por multitud de proteínas que interaccionan
con los componentes esenciales del PPTM, entre las que destacan la ciclofilina
D, que se encuentra en la matriz y cuya interacción con ANT parece esencial
para la apertura del poro.

11. FASE DE EJECUCIÓN
En esta etapa, las sustancias liberadas por la mitocondria activan diferentes rutas
apoptóticas. Así, mientras el citocromo C junto con la procaspasa 9 y la
proteína apaf-1 entran a formar parte de un complejo multiproteico denominado
apoptosoma, que dirige la activación de las proteínas denominadas caspasas, que
median la muerte programada celular, el AIF (factor inductor de apoptosis)
desencadena procesos de condensación de la cromatina y fragmentación del
ADN.
CASOS FRECUENTES DE APOPTOSIS:
 La apoptosis puede ocurrir, por ejemplo, cuando una célula se halla
dañada y no tiene posibilidades de ser reparada, o cuando ha sido
infectada por un virus.
 ghg
 La "decisión" de iniciar la apoptosis puede provenir de la célula misma,
del tejido circundante o de una reacción proveniente del sistema inmune.
 hggh
 Cuando la capacidad de una célula para realizar la apoptosis se encuentra
dañada (por ejemplo, debido a una mutación), o si el inicio de la apoptosis
ha sido bloqueado (por un virus), la célula dañada puede continuar
dividiéndose sin mayor restricción, resultando en un tumor que puede ser
de carácter canceroso.
 ghnggh
 También condiciones de stress como la falta de alimentos, así como el
daño del ADN provocado por tóxicos o radiación, pueden inducir a la
célula a comenzar un proceso apoptótico.
FARMACOLOGÍA DE LA MITOCONDRIA:
La capacidad reguladora de los procesos de muerte celular por parte de la
mitocondria la convierte en la organela de estudio de fármacos con actividades
tanto proapoptóticas, con el fin de matar la célula, como antiapoptóticas, con el
fin de prevenir su muerte. (CEÑA, Valentín - TORNERO, Daniel, 2002)
Estos farmacos ayudarian al tratamiento.

12.  Enfermedades neurodegenerativas.
 Envejecimiento celular.
 Procesos isquemicos e infartos al corazón.
 Tratamiento del Cancer y el crecimiento tumoral.
En este trabajo revisaremos el mecanismo de acción de algunos fármacos que
modulan la función mitocondrial, entre los que se incluyen algunos
antitumorales, inmunosupresores, antivirales, y agonistas de canales de potasio
localizados en la membrana mitocondrial, así como sulfonilureasas y anestésicos.
FÁRMACOS PROAPOPTÓTICOS
Entre los mecanismos de acción de los fármacos proapoptóticos existe la
manipulación de la concentración de calcio en el interior de las células, por
ejemplo, mediante el uso de la tapsigargina (inhibidor de la ATPasa-Ca2+ del
retículo endoplasmático) que previene la acumulación de calcio en el retículo y
que induce apoptosis en varios tipos celulares. Otros promotores de la apoptosis,
como ya se ha comentado, son las EROS.

13. La producción excesiva de radicales libres puede ser inducida por un gran
número de xenobióticos, iones de metales de transición y radiaciones ionizantes y
ultravioleta.
LA ACTIVACIÓN DEL PPTM o la modificación de la estabilidad de la
membrana mitocondrial constituyen parte del mecanismo de acción de gran
número de fármacos anticancerígenos entre los que se incluye el etopósido,
doxorrubicina, 1-beta-D-arabinofuranosilcitosina, lonidamina, ácido
betulínico, arsenito, CD437 y péptidos alfahelicoidales catiónicos anfifílicos.
APOPTOSIS
FÁRMACOS ANTIAPOPTÓTICOS. MODULACIÓN DEL ESTRÉS
OXIDATIVO
Con el fin de proteger a la mitocondria contra el daño producido por las EROS,
son varias las aproximaciones que se están realizando (entre las que destacamos
el aumento de los valores de glutatión) mediante el uso de precursores de su
síntesis como puede ser la N-acetilcisteína, que además tiene, por sí sola,
propiedades antioxidantes.
Este efecto también se produce con el incremento en el contenido de coenzima A
mediante la administración de su precursor, el ácido pantoténico.
Otros antioxidantes intracelulares generales son el ácido ascórbico, el
alfatocoferol y el betacaroteno.
EL RECEPTOR DE BENZODIACEPINAS
Las benzodiazepinas son fármacos extensamente utilizados por sus propiedades
como ansiolíticos, anticonvulsionantes, relajantes musculares y sedantes.
Como se ha comentado anteriormente, el receptor de estos compuestos se
encuentra en la membrana externa mitocondrial, interaccionando tanto con el
VDAC como con el ANT.

14. FÁRMACOS INMUNOSUPRESORES
La ciclosporina A es un fármaco inmunosupresor que bloquea la transcripción de
genes en células T activadas. Es ampliamente utilizado para evitar los rechazos
en transplante de órganos.
A nivel mitocondrial, la ciclosporina A es capaz de bloquear la formación del
PPTM, y éste parece ser el mecanismo por el cual este fármaco es eficaz en la
protección de las células frente a una lesión isquémica.
FÁRMACOS ANTIINFLAMATORIOS NO ESTEROIDES:
Los fármacos antiinflamatorios no esteroides, como los salicilatos y el
ibuprofeno, muy comúnmente prescritos, presentan efectos secundarios que
parecen estar mediados por un proceso que incluye daño mitocondrial e
inhibición de ciclooxigenasas.
A este nivel, estos fármacos antiinflamatorios modifican la fosforilación
oxidativa, inhibiendo la producción de ATP y alterando la permeabilidad de la
membrana interna de la mitocondria.
El hecho de que los salicilatos induzcan la formación del PPTM en mitocondria
aislada está siendo motivo de estudio por su implicación en el síndrome infantil
de Reye. Además, el ibuprofeno, de una forma directa, también induce la
apertura del PPTM.
OTROS FÁRMACOS
Además de los ya revisados, numerosos compuestos usados en medicina humana
y veterinaria pueden interaccionar con la mitocondria de un modo más o menos
accidental.
Así, algunos fármacos antiarrítmicos, como amiodarona, y algunos antibióticos,
como el cloranfenicol, no sólo inhiben la síntesis proteica bacteriana, sino
también la mitocondrial.
TÉCNICAS DE ANÁLISIS DE LA MITOCONDRIA
Debido a la importancia que, en el campo de la Farmacología, está adquiriendo el
estudio de la mitocondria se ha producido un gran avance en el desarrollo de
técnicas, no sólo bioquímicas que permiten el estudio de la acción de fármacos
sobre esta organela.
Así, disponemos de técnicas tanto in situ, en las que las mitocondrias se
encuentran dentro de células intactas; como de mitocondria aislada que requieren
la purificación de las mismas.

15. Todas estas técnicas han servido para conocer la gran diversidad que existe en las
mitocondrias de distintos tipos celulares y dentro de una misma célula y para
conocer con mayor detalle las funciones que desempeñan dentro de ellas.
EN LAS TÉCNICAS IN SITU, las mitocondrias se estudian valorando sus
interacciones con el resto de componentes celulares, si bien presentan la
dificultad de que pueden existir interferencias entre las diferentes mitocondrias y
por parte de otras organelas del citoplasma.
 La técnica "in vitro" más conocida y utilizada, quizás debido a su gran
versatilidad, para el análisis de las mitocondrias individuales es la
microscopía.
 Mediante la microscopía y usando sondas de localización mitocondrial
como es la "mito-DsRed", hoy somos capaces de estudiar las propiedades
físicas mitocondriales en el interior de las células.
 También disponemos de sondas fluorimétricas que permiten el estudio de
variaciones en el potencial mitocondrial o de los niveles de ciertas
moléculas de la matriz como el NADH.
EN LAS TÉCNICAS DE MITOCONDRIA AISLADA la organela es purificada
por centrifugación a través de gradientes bien de sacarosa o de Percoll.
 En estas preparaciones se eliminan las posibles interferencias con los otros
componentes del citoplasma celular, permitiendo un análisis más directo,
aunque se encuentran sacrificadas todas las interacciones que existen con
ellos y que pueden modificar los procesos motivo de estudio.
 Estas preparaciones permiten la manipulación de los substratos y la
modificación del entorno con el fin de obtener una mayor eficiencia en el
suministro de los fármacos.

16. Las técnicas más frecuentemente utilizadas sobre preparaciones de mitocondria
aislada son:
i) El registro electrofisiológico de los canales iónicos de ambas membranas.
En el caso de la membrana interna se realizan preparaciones, conocidas como
mitoplastos, en las que se ha eliminado la membrana externa.
ii) La citometría de flujo, utilizada para detectar distintas subpoblaciones de
mitocondrias con diferentes características estructurales y/o funcionales.
iii) Las medidas espectrofotométricas de la absorbencia de una suspensión de
mitocondrias aisladas permiten monitorizar modificaciones en el volumen de
la organela como es su hinchamiento que indica, en algunos modelos, la
apertura del PPTM.
iv) La electroforesis capilar con detección de fluorescencia inducida por láser
utiliza las diferentes cargas de la superficie de las mitocondrias determinadas
por la composición de su membrana externa para separarlas y determinarlas.
BIBLIOGRAFÍA:
VILLALOBOS, Carlos - SANZ BLASCO, Sara - STAF LABORATORY. (2006). The Unit of
Chemoprevention And Neuroprotection @ IBGM. Recuperado el OCTUBRE de 2008, de UCAN-
IBGM- ESPAÑA VALLADOLID - http://www.ucan-ibgm.com/
Jordán, D. T. (MARZO de 2004). ACTUALIDAD EN FARMACOLOGÍA Y TERAPÉUTICA. Recuperado
el OCTUBRE de 2008, de I+D+i DE FÁRMACOS - La mitocondria como diana farmacológica:
http://www.uclm.es/profesoradO/jjordan/pdf/review/5.pdf
CEÑA, Valentín - TORNERO, Daniel. (DICIEMBRE de 2002). Revista Farmaceútica OFFARM.
Recuperado el OCTUBRE de 2008, de La mitocondria como diana farmacológica:
http://www.uclm.es/profesoradO/jjordan/pdf/review/5.pdf - ESPAÑA
REVISTA REDBI. (2005). Recuperado el 2008, de Biologia en internet: http://www.biologia-en-
internet.com/default.asp?Id=11&Fd=2
Abbracchio MP, Ongini E, Memo M. (1999). Disclosing apoptosis in the CNS. Trends in
Pharmacological Sciences. Recuperado el octubre de 2008, de Apoptosis. suicidio celular:
http://www.raphael.com.ve/multimedia/Temas/Apoptosis/Apoptosis.pdf
ALVARADO, C. J. (2003). Farmacología Basica. Lima , Perú: AMP - Apuntes médicos del Perú.
BERTRAM, G. K. (2004). Farmacología básica y clínica (Novena Edición ed.). Lima, Perú: Manuel
Moderno.

17. Tortora - Derickson. (2006). Principios de Anatomía y Fisiología (Onceava Edición ed.). Sevilla,
España: Editorial Médica Panamericana.