Este documento describe varias técnicas para medir inmunoglobulinas y anticuerpos en el laboratorio clínico, incluyendo nefelometría, turbidimetría, inmunodifusión radial, radioinmunoensayo, ELISA, cromatografía por inmunoafinidad e inmunoelectroforesis en cohete. Cada técnica tiene ventajas y desventajas respecto a su precisión, sensibilidad, especificidad, tiempo de ejecución y costo.

1. Medición de las
Inmunoglobulinas y
Anticuerpos
Farroñay Garcia, Chandel Hilary Danae
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
Universidad Del Perú, Decana de América
FACULTAD DE MEDICINA
E.A.P TECNOLOGÍA MÉDICA
ÁREA DE LABORATORIO CLÍNICO Y ANATOMÍA PATOLÓGICA

2. Nefelometría
• Medición de la dispersión de luz causada por la formación
de complejos Ag-Ac
Ag: Ig
Ac: Anti-Ig
Ventajas:
- Corto tiempo
- Automatización
- La presencia de polímeros de Ig de gran tamaño no causa
error
Desventajas:
- Interferencias

3. Se introduce la muestra
diluida, el suero estandar y
control en los tubos de
reacción del nefelómetro.
Se añaden los reactivos anti-
IG y el buffer de reacción.
La luz dispersada es medida.
Las concentraciones de Ig
son calculadas con las curvas
de calibración.
Turbidimetría: Mide la disminución de la transmisión
de luz

4. Inmunodifusión Radial
• Difusión libre de la muestra en un agar que
contiene Anti-Ig, formándose un anillo de
precipitación, cuya área es proporcional a la
concentración del Ag de la muestra.
Ventajas
-Fácil uso
Desventajas
- Periodos largos de incubación.
- Ig poliméricas

5. a)Zona de exceso de
Ag.
b)Zona de
Equivalencia:
Máxima
precipitación.
c)Zona de exceso de
Ac.

6. Agar que contiene
Anti-Ig
Muestra, Suero
estándar y suero
control
48-64h a T° Amb
Cuantificación
•Método con curva de calibración.
•Método tabular

7. Radio inmunoensayo
Se utilizan Ac Anti-Ig marcados radiactivamente
para formar inmunocomplejos.
Directo
Indirecto
Técnica riesgosa y costosa

8. ELISA
Anticuerpos marcados con enzimas.
Alta sensibilidad y especificidad.
Recomendado para saliva, fluido cerebro
espinal y de lavado broncoalveolar

10. Cromatografía por inmunoafinidad
 El conjugado es medido en
un lector de fluorescencia.
 Las [] fueron calculadas
usando una curva de
calibración.

11. Inmunoelectroforesis en cohete
Se hace migrar al Ag en
un gel que contiene al
Ac, a medida que migra
el Ag se produce la
precipitación.

12. Técnicas de aglutinación
• Prueba de Coombs directa.