El agar hierro de Kligler se utiliza para diferenciar enterobacterias mediante la fermentación de lactosa y glucosa y la producción de ácido sulfhídrico. Esto se observa por el cambio de color del medio de rojo a amarillo. La fermentación de glucosa sólo se observa en el fondo del tubo, mientras que la fermentación de lactosa cambia el color en toda la superficie y fondo.

1. AGAR HIERRO KLIGLER
Equipo 7.
Martínez de León Víctor
Romero Monroy Luis Angel

2. Fundamento
• Es un medio de cultivo utilizado para la diferenciación de
enterobacterias en base a la fermentación de lactosa y
glucosa, además de la formación de ácido sulfhídrico.
• El medio se solidifica en forma inclinada permitiendo
tener dos cámaras de crecimiento: una aeróbica, el pico
de flauta y la otra anaeróbica, el fondo del tubo.
• La fermentación de azúcares acidifica el medio lo cual se
observa con el vire del rojo de fenol a amarillo que es el
indicador ácido-base incorporado. En caso de no haber
fermentación, el medio vira a rojo.

3. Fermentación de carbohidratos
• La fermentación de glucosa cambia el medio a
amarillo, pero debido a su baja concentración (0.1%) esto
sólo se observa en el fondo del tubo, mientras que la
superficie cambia a rojo.
• Una vez consumida la glucosa, el microorganismo
comienza a metabolizar aminoácidos liberando
amoníaco, lo cual alcaliniza el medio, esto ocurre en la
superficie.
• La fermentación de lactosa cambia el medio a amarillo y
dado que su concentración es mayor (1%), la formación de
ácido es suficiente para mantener el color amarillo tanto en
el fondo como en la superficie del tubo.

4. Tipos de reacciones
producidas por bacterias
que crecen en agar hierro
de kligler:
A. Sin fermentación de
carbohidratos.
B. Fermentación de
glucosa
C. Fermentación de lactosa
Koneman, E. [Et al].2008. Koneman diagnógstico microbiológico. 6°
edición. Buenos Aires; Médica Panaméricana. Página 209

5. Formación de gas
• La formación de gas se observa por la presencia de
burbujas, fracturas o desplazamiento del agar.
• La producción de sulfuro de hidrógeno se debe a la
utilización del tiosulfato de sodio.
• El sulfuro de hidrógeno reacciona con el citrato férrico de
amonio formando sulfuro de hierro que se observan
como un precipitado negro.

6. Modo de empleo
• La siembra se realiza por picadura en el agar y estría en
la superficie inclinada.
• Se incuban de 18 a 24 horas a 37 °C en condiciones
aerobias

7. Composición
• Mezcla de Peptonas……………………………….20.0 g
• Cloruro de Sodio…………………………………….5.0 g
• Lactosa……………………………………………...10.0 g
• Glucosa..……………………………………………..1.0 g
• Tiosulfato de Sodio …………………………………0.5 g
• Citrato férrico de amonio...…..……………………..0.5 g
• Rojo de Fenol………………………………………..0.025 g
• Agar Bacteriológico……………………………..….15.0 g
• pH 7.4 ± 0.2

8. Resultados
• Superficie roja (alcalina), fondo rojo (alcalino):
El microorganismo no fermenta ningún carbohidrato;
glucosa (-), lactosa (-)
• Superficie roja (alcalina), fondo amarillo (ácido):
El microorganismo solamente fermenta glucosa;
glucosa (+), lactosa (-)
• Superficie amarilla (ácida), fondo amarillo (ácido)
El microorganismo fermenta glucosa y lactosa;
Glucosa (+), lactosa (+)

9. •

10. Resultados con cepas control
Manual Básico de Microbiología cultimed.
Panreac Química S.A. España 2002 página 110

11. http://eltecnicodelaboratorio.blogspot.mx/
2010/05/agar-hierro-kliger.html

12. Consideraciones
•

13. Referencias
• Koneman, E. [Et al].2008. Koneman diagnógstico
microbiológico. 6° edición. Buenos Aires; Médica
Panaméricana
• MacFaddin. 2003. Pruebas bioquímicas para la
identifiación de bacterias de importancia clínica. 3°
edición. Buenos Aires; Médica Panaméricana
• Manual Básico de Microbiología Cultimed. Panreac
Química S.A. España 2002
• http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/kliglerhierr
oagar.htm

14. • http://eltecnicodelaboratorio.blogspot.mx/2010/05/agar-
hierro-kliger.html
• http://www.bd.com/europe/regulatory/Assets/IFU/US/L007
458%2807%29%280207%29_ES.pdf
• http://perso.wanadoo.es/microdominguez/a.htm
• http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_hierro_kliger.pdf