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colocan en cada una de las
excavaciones de la placa 0.04 ml del
suero problema (una gota).
A cada excavación con suero se le
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ags febriles.
Mezclar en cada excavación el suero
y el Ag con un aplicador de madera.
Oscilar la placa durante 4 minutos y
observar.
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Resultados
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con algún antígeno, se repite la técnica descrita empleando
el antígeno correspondiente, frente a una serie de
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Con pipeta graduada de 0.1 ml, medir respectivamente en
la excavaciones de la placa: 0.02, 0.01, 0.005 ml de suero.
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y proseguir de mismo modo que para la prueba cualitativa.
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manifiesta aglutinación franca.
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siguientes diluciones:
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Práctica4 reacciones febriles

  • 1. Dra. Patricia Gómez Ruelas Práctica #4 Laboratorio de Inmunología
  • 2. Reacciones febriles Son un conjunto de reacciones de aglutinación directa útiles en el diagnostico de fiebres entéricas. Salmonella, Brucella & Rickettsias Reacciones  Windal Huddleson Weil-Félix Existen dos tipos de fiebres entéricas: Paratíficas Fiebre tifoidea Salmonella paratiphy (A,B,C) Salmonela tiphy
  • 3. Rickettsiosis  Proteus vulgaris (OX-19, OX-K) FALSOS POSITIVOS Vacunación previa Efecto de antibióticos Detalles clínicos Estadios de la enfermedad TITULOS MINIMOS PARA DIAGNOSTICO: Mayores a 1:160
  • 4. Fundamento: Los antígenos bacterianos suspendidos en solución fisiológica interactúan con los Acs específicamente inducidos durante el contacto de la bacteria con el sistema inmunológico. En este caso se demostrará la presencia o ausencia de aglutininas in vitro, lo cual será fácilmente detectable: Granular  Somática Gramos tenues Flagelar Preparación de la muestra: 1. Se colocan 5ml de sangre obtenida por punción venosa en un tubo de ensayo limpio y seco sin anticoagulante. 2. Se deja coagular la sangre, se desprende el coagulo, se centrifuga la muestra a 2000rpm durante 10 min, se extrae el suero y lo colocamos en otro tubo seco.
  • 5. Reacción de widal: Antígeno tífico “O” Antígenos tífico “H” Antígeno paratífico “A” Antígeno paratífico “B” Reacción de Weil-Félix: Antígeno Proteus OX-19 Reacción de Huddleson: Antígeno Brucella abortus
  • 6. Prueba cualitativa Se utiliza una placa de vidrio con excavaciones, que se marcan adecuadamente según el antígeno que se vaya a estudiar en cada espacio. Con una pipeta serológica 0.2ml se colocan en cada una de las excavaciones de la placa 0.04 ml del suero problema (una gota). A cada excavación con suero se le agrega una gota de cada uno de los ags febriles. Mezclar en cada excavación el suero y el Ag con un aplicador de madera. Oscilar la placa durante 4 minutos y observar. O H A B OX-19 Bp
  • 7. Resultados • Positivo: dan aparición de grumos. Significa paciente con infección actual, reciente o pasada. • Negativo: Paciente en estado muy temprano de la infección o no infectado.
  • 8. Prueba cuantitativa Cuando el suero problema presenta reacciones positivas con algún antígeno, se repite la técnica descrita empleando el antígeno correspondiente, frente a una serie de diluciones del suero. Con pipeta graduada de 0.1 ml, medir respectivamente en la excavaciones de la placa: 0.02, 0.01, 0.005 ml de suero. Agregar una gota de Ag frente al cual presento aglutinación y proseguir de mismo modo que para la prueba cualitativa. Anotar la cantidad mínima de suero (dilución) que manifiesta aglutinación franca.
  • 9. Resultados Las cantidades empleadas de suero corresponden a las siguientes diluciones: Milititros de suero Dilución 0.08 1:20 0.04 1:40 0.02 1:80 0.01 1:160 0.005 1:320 El titulo de suero para el antígeno utilizado corresponde a la dilución mas alta en la que se observa la reacción positiva franca