Este documento describe las reacciones de aglutinación directa utilizadas en el diagnóstico de fiebres entéricas como la fiebre tifoidea y paratífica. Explica los tipos de pruebas cualitativas y cuantitativas, incluyendo las reacciones de Widhal, Weil-Félix y Huddleson que detectan las aglutininas presentes en el suero sanguíneo frente a diferentes antígenos bacterianos. También establece los títulos mínimos requeridos para el diagnóstico y los pas

1. Dra. Patricia Gómez Ruelas
Práctica #4
Laboratorio de Inmunología

2. Reacciones febriles
Son un conjunto de reacciones de aglutinación directa útiles
en el diagnostico de fiebres entéricas.
Salmonella, Brucella & Rickettsias
Reacciones  Windal
Huddleson
Weil-Félix
Existen dos tipos de fiebres entéricas:
Paratíficas Fiebre tifoidea
Salmonella paratiphy (A,B,C) Salmonela tiphy

3. Rickettsiosis  Proteus vulgaris
(OX-19, OX-K)
FALSOS POSITIVOS
Vacunación previa
Efecto de antibióticos
Detalles clínicos
Estadios de la enfermedad
TITULOS MINIMOS PARA
DIAGNOSTICO:
Mayores a 1:160

4. Fundamento: Los antígenos bacterianos suspendidos en solución
fisiológica interactúan con los Acs específicamente inducidos
durante el contacto de la bacteria con el sistema inmunológico.
En este caso se demostrará la presencia o ausencia de
aglutininas in vitro, lo cual será fácilmente detectable:
Granular  Somática Gramos tenues Flagelar
Preparación de la muestra:
1. Se colocan 5ml de sangre obtenida por punción venosa en un
tubo de ensayo limpio y seco sin anticoagulante.
2. Se deja coagular la sangre, se desprende el coagulo, se
centrifuga la muestra a 2000rpm durante 10 min, se extrae el
suero y lo colocamos en otro tubo seco.

5. Reacción de widal:
Antígeno tífico “O”
Antígenos tífico “H”
Antígeno paratífico “A”
Antígeno paratífico “B”
Reacción de Weil-Félix:
Antígeno Proteus OX-19
Reacción de Huddleson:
Antígeno Brucella abortus

6. Prueba cualitativa
Se utiliza una placa de vidrio con
excavaciones, que se marcan
adecuadamente según el antígeno
que se vaya a estudiar en cada
espacio.
Con una pipeta serológica 0.2ml se
colocan en cada una de las
excavaciones de la placa 0.04 ml del
suero problema (una gota).
A cada excavación con suero se le
agrega una gota de cada uno de los
ags febriles.
Mezclar en cada excavación el suero
y el Ag con un aplicador de madera.
Oscilar la placa durante 4 minutos y
observar.
O H A B
OX-19 Bp

7. Resultados
• Positivo: dan aparición de grumos. Significa
paciente con infección actual, reciente o
pasada.
• Negativo: Paciente en estado muy temprano
de la infección o no infectado.

8. Prueba cuantitativa
Cuando el suero problema presenta reacciones positivas
con algún antígeno, se repite la técnica descrita empleando
el antígeno correspondiente, frente a una serie de
diluciones del suero.
Con pipeta graduada de 0.1 ml, medir respectivamente en
la excavaciones de la placa: 0.02, 0.01, 0.005 ml de suero.
Agregar una gota de Ag frente al cual presento aglutinación
y proseguir de mismo modo que para la prueba cualitativa.
Anotar la cantidad mínima de suero (dilución) que
manifiesta aglutinación franca.

9. Resultados
Las cantidades empleadas de suero corresponden a las
siguientes diluciones:
Milititros de suero Dilución
0.08 1:20
0.04 1:40
0.02 1:80
0.01 1:160
0.005 1:320
El titulo de suero para el antígeno utilizado corresponde a la
dilución mas alta en la que se observa la reacción positiva
franca