Práctica de metabolismo de lípidos

1. METABOLISMO DE
LÍPIDOS
Universidad Simón Bolívar
Facultad de Ciencia y Tecnología
Laboratorio de Análisis clínicos
Equipo 4
Jorge Iván Carrillo Soto
Adrián Rangel Román
Renata Rivas Carranco

2. ¿QUÉ SON LOS LÍPIDOS?
Los lípidos representan la principal fuente de energía, son
fundamentales en la formación de estructuras celulares como las
membranas, también actúan como vehículo de vitaminas liposolubles. Los
lípidos se caracterizan por ser relativamente insolubles en agua y
solubles en solventes orgánicos, como el éter, cloroformo y benceno.
(Doucombs, 2020)
Figura 1. Clasificación de lípidos

3. TIPOS DE LÍPIDOS
● Ácidos grasos
● Triacilgliceroles
● Ésteres de ceras
● Fosfolípidos (fosfoglicéridos y esfingomielina)
● Esfingolípidos (moléculas diferentes a la esfingomielina que contienen el
aminoalcohol esfingosina)
● Isoprenoides (moléculas formadas por unidades repetidas de isopreno, un
hidrocarburo ramificado de cinco carbonos).
(Hudson, 2018).
Figura 2. Representaciones de lípidos

4. METABOLISMO DE LÍPIDOS
Figura 3. Metabolismo de lípidos
HDL: Lipoproteínas
de alta
densidad,comúnmente
conocida como
"colesterol bueno".
VLDL: Lipoproteínas
de muy baja
densidad, aumento de
triglicéridos.
LDL: Lipoproteínas
de baja densidad,
“colesterol malo”.
IDL: Lipoproteínas
de densidad
intermedia.
(Scarone S., 2016)

5. ENFERMEDADES RELACIONADAS CON METABOLISMO DE
LÍPIDOS
Hiperlipidemias:Aumento en la concentración de lípidos en el plasma
sanguíneo.
● Hipercolesterolemia: Aumento de las cifras de colesterol: más de 200
mg/dl con cifras de triglicéridos por debajo de 200 mg/dl.
● Hipertrigliceridemia: más de 200 mg/dl con cifras de colesterol por
debajo de 200 mg/dl.
● Hiperlipidemias mixtas:Si encontramos aumentadas ambas cifras,
hablamos de el aumento de colesterol y triglicéridos en sangre
aumenta la frecuencia de infarto de miocardio, e infarto cerebral,
que disminuyen al disminuir el colesterol sanguíneo.
(Navarro, 2019)
Figura 4. Representación de colesterol en venas.

6. PERFIL LIPÍDICO
Los dos lípidos principales del organismo, el colesterol y los
triglicéridos, son transportados por la sangre mediante unas partículas
conocidas como lipoproteínas. Cada tipo de lipoproteína está constituida
por una combinación de proteína, colesterol, triglicéridos y
fosfolípidos. Las partículas que se evalúan en un perfil lipídico se
clasifican en lipoproteínas de alta densidad (HDL), lipoproteínas de
baja densidad (LDL) y lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL).
¿En qué casos se realiza este estudio?
● Tabaquismo
● Sobrepeso y obesidad
● Dieta inadecuada
● Sedentarismo
● Edad
● Hipertensión
● Diabetes
Figura 5. Perfil lipidico
(Ramírez, 2020)

7. OBJETIVOS
Realizar la
determinación
cuantitativa de
triglicéridos
aplicando precisión
y exactitud para la
obtención de
resultados fiables.
03
Determinar la
concentración de
colesterol total
presente en una
muestra de sangre.
01
Reconocer la
importancia de
realizar estudios
de rutina para
evitar enfermedades
relacionadas con
los lípidos.
02

8. MATERIAL
● Kit de venopunción
● Tubos amarillos
● 6 tubos de 5 mL
● 3 micropipetas 10,100,1000 uL con puntas
● Celdas para espectrofotómetro
● Gradilla
● Kit de trigliceridos
● Kit de colesterol
MUESTRA
● Suero
Figura 6 y 7. Reactivos del kit

9. METODOLOGÍA
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE COLESTEROL (TEST ENZIMATICO-COLORIMETRICO).
- PRINCIPIO DEL MÉTODO
La colesterol esterasa hidroliza (CHE) los ésteres de colesterol presentes
en la muestra dando colesterol libre y ácidos grasos, una posterior
oxidación enzimática por la colesterol oxidasa (CHOD) formando H2
O2
y
colesterona. El H2
O2
se valora por reacción de Trinder, mediante la presencia
de fenol y 4-aminofenazona en presencia de peroxidasa formando una
quinonimina un complejo rojizo, que es proporcional a la concentración de
colesterol presente en la muestra.

10. METODOLOGÍA
El cambio de la absorbancia a 520 nm es proporcional a la concentración de
colesterol en la muestra.
PRECAUCIÓN: Todos los reactivos son tóxicos e irritantes, uso de guantes
Preparación de reactivo
de trabajo (RT)
Disolver con agitación
suave, el contenido del
vial de enzima R2 con un
poco de regulador R1.Una
vez disuelto el
liofilizado regresar al
frasco original de
tampón, homogeneizar la
solución.

11. METODOLOGÍA
Procedimiento
Ajustar espectrofotómetro a cero frente agua destilada y pipetear en
una celda:
Blanco Patrón Muestra
Reactivo
(mL)
1.0 10 1.0
Patrón (uL) - 10 –
Muestra
(uL)
- - 10
Mezclar e incubar por 5
min a 37°C una vez pasado
el tiempo, leer la
absorbancia (A) de 505 nm
del patrón y la muestra,
frente al blanco de
reactivo. El color es
estable como mínimo 60
minutos.

12. SIGNIFICADO CLÍNICO
El colesterol es una sustancia grasa presente en todas las células del
organismo. El hígado produce naturalmente todo el colesterol que
necesita para formar las membranas celulares y producir ciertas
hormonas. La determinación del colesterol es una de las herramientas
más importantes para el diagnóstico y clasificación de las lipidemias.
El aumento del nivel de colesterol es uno de los principales factores
de riesgo cardiovascular. El diagnóstico clínico debe realizarse
teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
VALORES DE REFERENCIA
Normal menos de 200 mg/dL
Morderado 200-239 mg/dL
Alto 240 mg/dL o más

13. METODOLOGÍA
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE TRIACILGLICÉRIDOS.
- PRINCIPIO DEL MÉTODO
Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y
ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerofosfato
deshidrogenasa (GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para
producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P es
entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrógeno
(H2
O2
) por GPO. Al final, el peróxido de hidrógeno (H2
O2
) reacciona con
4-aminofenazona (4-AF) y p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa
(POD) dando una coloración roja, la intensidad del color formado es
proporcional a la concentración de trigliceridos.

14. METODOLOGÍA
Condiciones de método: Ajustar longitud de onda a 490-550 nm y agregar a
la cubeta:
Blanco Patrón Muestra
RT (mL) 1.0 1.0 1.0
Patrón
(uL)
- 10 -
Muestra
(uL)
- - 10
Mezclar e incubar 5
minutos a 37 °C, pasado
el tiempo leer
absorbancia del patrón y
muestra frente al
blanco.

15. SIGNIFICADO CLÍNICO
Los triglicéridos son grasas que suministran energía a la célula. Al igual
que el colesterol, son transportados a las células del organismo por las
lipoproteínas en la sangre. Una dieta alta en grasas saturadas o
carbohidratos pueden elevar los niveles de triglicéridos. Su aumento es
relativamente inespecífico. Diversas dolencias, como ciertas disfunciones
hepáticas (cirrosis, hepatitis, obstrucción biliar) o diabetes mellitus.
VALORES DE REFERENCIA
Hombres 40-160 mg/dL
Mujeres 35-135 mg/dL

16. REFERENCIAS
● Doucombs, F. (2020). EL USO DE LIPIDOS ESTRUCTURADOS EN LA NUTRICIÓN: UNA TECNOLOGÍA QUE ABRE NUEVAS
PERSPECTIVAS EN EL DESARROLLO DE PRODUCTOS INNOVADORES.. 17
dehttps://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS31_TG_2018.pdf marzo del 2022, de Revista
chilena de nutrición Sitio web:
https://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-75182002000200005#:~:text=Los%20l%C3%A
Dpidos%20representan%20la%20principal,veh%C3%ADculo%20de%20vitaminas%20liposolubles%2C%20y
● Hudson, M. (2018). CAPÍTULO 11: Lípidos y membranas. 17 de marzo del 2022, de Access Medicina Sitio
web: https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1960§ionid=148095989#1137987941
● Navarro, M. (2019). Trastornos del metabolismo de los lípidos. 17 de marzo del 2022, de DISCAPNET
Sitio web:
https://www.discapnet.es/areas-tematicas/salud/enciclopedia/trastornos-del-metabolismo-de-los-lipido
s
● Carrilo, P. (2014). Colesterol (spinreact). 18/03/2022, de Slideshare Sitio web:
https://es.slideshare.net/carrillopaul1/colesterol-spinreact
● Ramírez J. (2020). Perfil lipídico . Marzo 18, 2022 , de Lab test online Sitio web:
https://labtestsonline.es/tests/perfil-lipidico
● Colesterol CHOD-POD. Líquido CHOLESTEROL -LQ. (n.d.).
https://www.spinreact.com.mx/public/_pdf/41021.pdf
● Triglicéridos GPO-POD. Enzimáticos colirimétricos- TRIGLYCERIDES (n.d):
https://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS31_TG_2018.pdf
● Scarone S. (2016). Trastornos de los lípidos. Tuendocrinologo.com.
http://tuendocrinologo.com/site/endocrinologia/metabolismo/trastornos-de-los-lipidos.html