Este documento presenta información sobre la dosificación de lípidos totales, colesterol y triglicéridos. Explica el metabolismo y transporte de lípidos en el organismo, incluyendo la digestión, absorción y función de las lipoproteínas. Describe los procedimientos para dosificar triglicéridos y colesterol en el suero sanguíneo, e interpretar los resultados obtenidos. Finalmente, define valores normales y anormales de lípidos en sangre, y tipos comunes de dislipidemias.
1. UNIVERSIDAD DE CUENCA
FACULTAD DE CIENCIAS
MÉDICAS
PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7
BIOQUIMICA- PRACTICA
DOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS
TOTALES, COLESTEROL,
TRIGLICÉRIDOS Y
LIPOPROTEÍNAS
Doménica Ortega
Christian Ochoa
2. OBJETIVOS
Conocer el metabolismo de los lípidos y su camino
en el organismo.
Identificar lipoproteínas beneficiosas y
perjudiciales para el organismo.
Conocer las alteraciones que se presentan en el
metabolismo de los lípidos.
Aprender sobre la aterosclerosis, y las
dislipidemias.
8. AG de cadena corta viajan en plasma
unidos a albúmina
Todos los AG de cadena larga absorbidos su vuelven
TAG antes de pasar al s. linfático como quilomicrones
99% lípidos
1% proteínas
9.
10. Lipoproteinlipasa (LPL) metaboliza quilomicrones
hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos:
- lípidos tisulares
- se oxidan como combustible
Los remanentes de quilomicrones van a ser
reciclados en el hígado, para formar las VLDL.
13. En el hígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG
desde este órgano hacia los tejidos extrahepáticos, donde
son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales
regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa
hepática las transforma en LDL.
Las LDL son ricas en colesterol y circulan mucho más tiempo
en el plasma, hacia los tejidos periféricos (de ahí su potencial
aterogénico).
14.
15. Las HDL transportan colesterol en sentido inverso: desde los tejidos
periféricos hasta el hígado; único órgano capaz de excretarlo por la
vía biliar.
16. Colesterol
Es un esterol (lípido) que se encuentra en los
tejidos corporales y en el plasma
sanguíneo de los vertebrados.
- No se puede metabolizar por lo que se
elimina a través de la bilis
- 98% se reabsorbe en íleon terminal
- 2% se excreta en las heces
18. REACTIVOS
•1 muestra de suero
(desconocido)
• Kit de dosificación
(estándar y reactivo
de trabajo)
MATERIALES
• 3 tubos de ensayo
• 1 gradilla
• 1 pinza de madera
• 3 cubetas para
espectrofotómetro
• 1 pipeta
automática de 10 ul
• 2 puntas blancas
• 1 pipeta de 1 ml
• 1 pera de caucho
EQUIPOS
• Espectrofotóm
etro
• Termostato
19. DOSIFICACIÓN DE
TRIGLICÉRIDOS
TRIGLICÉRIDOS
LPL
GLICEROL
AC.
GRASOS
GLICEROL ATP
Glicerol Kinasa
ADP
GLICEROL
1-P
GLICEROL
1-P
O2
GPO
H2O2
DIHIDROXI
ACETONAFOSFATO
2 H2O2 4-AF
POD QUINONIMINA
ROJA
20. PROCEDIMIENTO
1. Colocar los tubos de ensayo en la
gradilla y rotularlos
A= Blanco B=Estándar C=
Desconocido
2. Tomar 10 ul de estándar y colocar
en el tubo B.
3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de
desconocido y colocar en el tubo C.
4. Colocar 1 ml de reactivo e color en
cada tubo (A, B,C)
21. 5. Incubar en el termostato los tres
tubos a 37º C, durante 5 min.
6. Trasvasar el contenido de los tubos en
cubetas para espectrofotómetro, y
rotularlas.
7. Leer en el espectrofotómetro a
505 nm.
22. INTERPRETACIÓN
Para conocer la concentración de
triglicéridos en el suero desconocido,
aplicamos una regla de tres:
푋 =
퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표
퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
26. REACTIVOS
•1 muestra de suero
(desconocido)
• Kit de dosificación
(estándar y reactivo
de trabajo)
MATERIALES
• 3 tubos de ensayo
• 1 gradilla
• 1 pinza de madera
• 3 cubetas para
espectrofotómetro
• 1 pipeta
automática de 20 ul
• 2 puntas amarillas
• 1 pipeta de 2 ml
• 1 pera de caucho
EQUIPOS
• Espectrofotóm
etro
• Termostato
27. DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL
Esteres de
colesterol
Lipasa
Colesterol
AC.
GRASOS
Colesterol O2
CHOD
H2O2
Colesten
3-ona
4-AF Fenol
POD
Quinona
H2O2 Coloreada
H2O
28. PROCEDIMIENTO
1. Colocar los tubos de ensayo en la
gradilla y rotularlos
A= Blanco B=Estándar C= Desconocido
2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en
el tubo B.
3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de
desconocido y colocar en el tubo C.
4. Colocar 2 ml de reactivo e color en
cada tubo (A, B,C)
29. 5. Incubar en el termostato los tres
tubos a 37º C, durante 15 min.
6. Trasvasar el contenido de los tubos en
cubetas para espectrofotómetro, y
rotularlas.
7. Leer en el espectrofotómetro a
505 nm.
30. INTERPRETACIÓN
Para conocer la concentración de
triglicéridos en el suero desconocido,
aplicamos una regla de tres:
푋 =
퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표
퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
32. DISLIPIDEMIA
TIPO ANOMALÍA PERFIL LIPÍDICO
Hipercolesterolemia
familiar
Defecto en la codificación
de los receptores para las
LDL
Hipercolesterolemia o
hiperlipemia mixta
Hipercolesterolemia
familiar combinada
Defecto en la secreción
hepática de las VLDL
Perfil cambiante
(hipercolesterolemia,
hipertrigliceridemia y mixto)
Disbetalipoproteinemia
familiar
Alteración de la ApoE que
impide la metabolización
de VLDL y quilomicrones
Hipercolesterolemia e
hipertrigliceridemia
Hipercolesterolemia
poligénica
Interacciones de numerosos
genes – ambiente (p.ej:
alimentación)
Colesterol moderadamente
elevado
Hipertrigliceridemia
familiar
Mayor secreción de
triglicéridos (más VLDL y de
mayor tamaño). Defectos
en la LPL
Aumento de las VLDL
Disminución de las HDL y LDL
Sitosterolemia o
fitosterolemia
Defectos en ABC G5/G8
Aumento de la absorción de
sitosteroles y colesterol
dietético. Altos niveles de
esteroles (de origen vegetal y
animal) en el plasma.
35. ATEROSCLEROSIS
Enfermedad
de arterias
Se da el depósito de placas de ateroma, a
nivel de la pared vascular, provocando el
estrechamiento u occlusion completa de la luz
arterial.
Clínicamente puede causar infarto agudo del
miocardio, accidente cerebro vascular o
enfermedad perférica.