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UNIVERSIDAD DE CUENCA 
FACULTAD DE CIENCIAS 
MÉDICAS 
PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7 
BIOQUIMICA- PRACTICA 
DOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS 
TOTALES, COLESTEROL, 
TRIGLICÉRIDOS Y 
LIPOPROTEÍNAS 
Doménica Ortega 
Christian Ochoa
OBJETIVOS 
Conocer el metabolismo de los lípidos y su camino 
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monoglicéridos y ácidos grasos.
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pancreática 
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hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos: 
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reciclados en el hígado, para formar las VLDL.
LIPOPROTEÍNAS
 En el hígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG 
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son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales 
regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa 
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DOSIFICACIÓN 
DE 
TRIGLICÉRIDOS
REACTIVOS 
•1 muestra de suero 
(desconocido) 
• Kit de dosificación 
(estándar y reactivo 
de trabajo) 
MATERIALES 
• 3 tubos de ensayo 
• 1 gradilla 
• 1 pinza de madera 
• 3 cubetas para 
espectrofotómetro 
• 1 pipeta 
automática de 10 ul 
• 2 puntas blancas 
• 1 pipeta de 1 ml 
• 1 pera de caucho 
EQUIPOS 
• Espectrofotóm 
etro 
• Termostato
DOSIFICACIÓN DE 
TRIGLICÉRIDOS 
TRIGLICÉRIDOS 
LPL 
GLICEROL 
AC. 
GRASOS 
GLICEROL ATP 
Glicerol Kinasa 
ADP 
GLICEROL 
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GLICEROL 
1-P 
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ACETONAFOSFATO 
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POD QUINONIMINA 
ROJA
PROCEDIMIENTO 
1. Colocar los tubos de ensayo en la 
gradilla y rotularlos 
A= Blanco B=Estándar C= 
Desconocido 
2. Tomar 10 ul de estándar y colocar 
en el tubo B. 
3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de 
desconocido y colocar en el tubo C. 
4. Colocar 1 ml de reactivo e color en 
cada tubo (A, B,C)
5. Incubar en el termostato los tres 
tubos a 37º C, durante 5 min. 
6. Trasvasar el contenido de los tubos en 
cubetas para espectrofotómetro, y 
rotularlas. 
7. Leer en el espectrofotómetro a 
505 nm.
INTERPRETACIÓN 
 Para conocer la concentración de 
triglicéridos en el suero desconocido, 
aplicamos una regla de tres: 
푋 = 
퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 
퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
 0,310 Absorbancia (Conocido). 
 0,243 Absorbancia (Desconocido). 
 200 mg/dl Constante. 
TENEMOS: 
200 mg/dl 0,310 
X 0,243 
0,243 × 200 
푚푔 
푑푙 
0,310 
= 156,77 푚푔/푑푙 
CONCENTRACIÓN DEL DESCONOCIDO: 156,77 mg/dl
VALORES NORMALES 
• <1,5 g/l 
• 44 – 158 mg/dl 
• 0,50-1,67 mmol/l 
Deseable 
• 1,55 – 1,99 g/l 
Moderada 
mente elevado 
Elevado • 2,0 – 4,99 g/l 
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DOSIFICACIÓN 
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•1 muestra de suero 
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MATERIALES 
• 3 tubos de ensayo 
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automática de 20 ul 
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DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL 
Esteres de 
colesterol 
Lipasa 
Colesterol 
AC. 
GRASOS 
Colesterol O2 
CHOD 
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Colesten 
3-ona 
4-AF Fenol 
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H2O
PROCEDIMIENTO 
1. Colocar los tubos de ensayo en la 
gradilla y rotularlos 
A= Blanco B=Estándar C= Desconocido 
2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en 
el tubo B. 
3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de 
desconocido y colocar en el tubo C. 
4. Colocar 2 ml de reactivo e color en 
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5. Incubar en el termostato los tres 
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VALORES NORMALES 
• <2,0 g/l 
• 44 – 158 mg/dl 
• 0,50-1,67 mmol/l 
Deseable 
• 2,0 – 2,39 g/l 
Moderada 
mente alto 
Elevado • >2,4 g/l
DISLIPIDEMIA 
TIPO ANOMALÍA PERFIL LIPÍDICO 
Hipercolesterolemia 
familiar 
Defecto en la codificación 
de los receptores para las 
LDL 
Hipercolesterolemia o 
hiperlipemia mixta 
Hipercolesterolemia 
familiar combinada 
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hepática de las VLDL 
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Disbetalipoproteinemia 
familiar 
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impide la metabolización 
de VLDL y quilomicrones 
Hipercolesterolemia e 
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poligénica 
Interacciones de numerosos 
genes – ambiente (p.ej: 
alimentación) 
Colesterol moderadamente 
elevado 
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familiar 
Mayor secreción de 
triglicéridos (más VLDL y de 
mayor tamaño). Defectos 
en la LPL 
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Disminución de las HDL y LDL 
Sitosterolemia o 
fitosterolemia 
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Aumento de la absorción de 
sitosteroles y colesterol 
dietético. Altos niveles de 
esteroles (de origen vegetal y 
animal) en el plasma.
PERFIL LIPÍDICO 
Colesterol total (mg/dL) 
Deseable 
< 200 
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200 – 239 
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LDL (mg/dL) 
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ATEROSCLEROSIS 
Enfermedad 
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Se da el depósito de placas de ateroma, a 
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Dosificación de lipidos

  • 1. UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7 BIOQUIMICA- PRACTICA DOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS TOTALES, COLESTEROL, TRIGLICÉRIDOS Y LIPOPROTEÍNAS Doménica Ortega Christian Ochoa
  • 2. OBJETIVOS Conocer el metabolismo de los lípidos y su camino en el organismo. Identificar lipoproteínas beneficiosas y perjudiciales para el organismo. Conocer las alteraciones que se presentan en el metabolismo de los lípidos. Aprender sobre la aterosclerosis, y las dislipidemias.
  • 3. LOS LÍPIDOS Biomoléculas Orgánicas Hidrófobos
  • 4. TRIGLICÉRIDOS -COLESTEROL -COLESTERIL -ÉSTERES -FOSFOLÍPIDOS -ÁCIDOS GRASOS NO ESTERIFICDOS.
  • 6.  Su digestión empieza en el estómago:  - Lipasa lingual  - Lipasa gástrica  20-30% de triglicéridos (TAG) a monoglicéridos y ácidos grasos.
  • 7. Intestino delgado - Ácidos biliares (emulsión) - Lipasa pancreática Absorbidos por enterocitos (micelas)
  • 8. AG de cadena corta viajan en plasma unidos a albúmina Todos los AG de cadena larga absorbidos su vuelven TAG antes de pasar al s. linfático como quilomicrones 99% lípidos 1% proteínas
  • 9.
  • 10. Lipoproteinlipasa (LPL) metaboliza quilomicrones hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos: - lípidos tisulares - se oxidan como combustible Los remanentes de quilomicrones van a ser reciclados en el hígado, para formar las VLDL.
  • 12.
  • 13.  En el hígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG desde este órgano hacia los tejidos extrahepáticos, donde son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa hepática las transforma en LDL.  Las LDL son ricas en colesterol y circulan mucho más tiempo en el plasma, hacia los tejidos periféricos (de ahí su potencial aterogénico).
  • 14.
  • 15.  Las HDL transportan colesterol en sentido inverso: desde los tejidos periféricos hasta el hígado; único órgano capaz de excretarlo por la vía biliar.
  • 16. Colesterol Es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de los vertebrados. - No se puede metabolizar por lo que se elimina a través de la bilis - 98% se reabsorbe en íleon terminal - 2% se excreta en las heces
  • 18. REACTIVOS •1 muestra de suero (desconocido) • Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo) MATERIALES • 3 tubos de ensayo • 1 gradilla • 1 pinza de madera • 3 cubetas para espectrofotómetro • 1 pipeta automática de 10 ul • 2 puntas blancas • 1 pipeta de 1 ml • 1 pera de caucho EQUIPOS • Espectrofotóm etro • Termostato
  • 19. DOSIFICACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS TRIGLICÉRIDOS LPL GLICEROL AC. GRASOS GLICEROL ATP Glicerol Kinasa ADP GLICEROL 1-P GLICEROL 1-P O2 GPO H2O2 DIHIDROXI ACETONAFOSFATO 2 H2O2 4-AF POD QUINONIMINA ROJA
  • 20. PROCEDIMIENTO 1. Colocar los tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos A= Blanco B=Estándar C= Desconocido 2. Tomar 10 ul de estándar y colocar en el tubo B. 3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de desconocido y colocar en el tubo C. 4. Colocar 1 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)
  • 21. 5. Incubar en el termostato los tres tubos a 37º C, durante 5 min. 6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas. 7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.
  • 22. INTERPRETACIÓN  Para conocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres: 푋 = 퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
  • 23.  0,310 Absorbancia (Conocido).  0,243 Absorbancia (Desconocido).  200 mg/dl Constante. TENEMOS: 200 mg/dl 0,310 X 0,243 0,243 × 200 푚푔 푑푙 0,310 = 156,77 푚푔/푑푙 CONCENTRACIÓN DEL DESCONOCIDO: 156,77 mg/dl
  • 24. VALORES NORMALES • <1,5 g/l • 44 – 158 mg/dl • 0,50-1,67 mmol/l Deseable • 1,55 – 1,99 g/l Moderada mente elevado Elevado • 2,0 – 4,99 g/l Muy elevado • >5,0 g/l
  • 26. REACTIVOS •1 muestra de suero (desconocido) • Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo) MATERIALES • 3 tubos de ensayo • 1 gradilla • 1 pinza de madera • 3 cubetas para espectrofotómetro • 1 pipeta automática de 20 ul • 2 puntas amarillas • 1 pipeta de 2 ml • 1 pera de caucho EQUIPOS • Espectrofotóm etro • Termostato
  • 27. DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL Esteres de colesterol Lipasa Colesterol AC. GRASOS Colesterol O2 CHOD H2O2 Colesten 3-ona 4-AF Fenol POD Quinona H2O2 Coloreada H2O
  • 28. PROCEDIMIENTO 1. Colocar los tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos A= Blanco B=Estándar C= Desconocido 2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en el tubo B. 3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de desconocido y colocar en el tubo C. 4. Colocar 2 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)
  • 29. 5. Incubar en el termostato los tres tubos a 37º C, durante 15 min. 6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas. 7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.
  • 30. INTERPRETACIÓN  Para conocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres: 푋 = 퐴푏푠. 푀푢푒푠푡푟푎 ∗ 퐶표푛푐. 푆푢푠푡푟푎푡표 퐴푏푠. 푆푢푠푡푟푎푡표
  • 31. VALORES NORMALES • <2,0 g/l • 44 – 158 mg/dl • 0,50-1,67 mmol/l Deseable • 2,0 – 2,39 g/l Moderada mente alto Elevado • >2,4 g/l
  • 32. DISLIPIDEMIA TIPO ANOMALÍA PERFIL LIPÍDICO Hipercolesterolemia familiar Defecto en la codificación de los receptores para las LDL Hipercolesterolemia o hiperlipemia mixta Hipercolesterolemia familiar combinada Defecto en la secreción hepática de las VLDL Perfil cambiante (hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia y mixto) Disbetalipoproteinemia familiar Alteración de la ApoE que impide la metabolización de VLDL y quilomicrones Hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia Hipercolesterolemia poligénica Interacciones de numerosos genes – ambiente (p.ej: alimentación) Colesterol moderadamente elevado Hipertrigliceridemia familiar Mayor secreción de triglicéridos (más VLDL y de mayor tamaño). Defectos en la LPL Aumento de las VLDL Disminución de las HDL y LDL Sitosterolemia o fitosterolemia Defectos en ABC G5/G8 Aumento de la absorción de sitosteroles y colesterol dietético. Altos niveles de esteroles (de origen vegetal y animal) en el plasma.
  • 33. PERFIL LIPÍDICO Colesterol total (mg/dL) Deseable < 200 Límite alto 200 – 239 Elevado > 240 LDL (mg/dL) Óptimo < 100 Cercano a lo óptimo 100 – 129 Límite alto 130 – 159 Elevado* 160 – 189 Muy elevado* > 190
  • 34. Triglicéridos (mg/dL) Normal < 150 Límite alto 150 – 199 Elevado2 00 – 499 Muy elevado > 500 HDL (mg/dL) Bajo* < 40 Elevado > 60
  • 35. ATEROSCLEROSIS Enfermedad de arterias Se da el depósito de placas de ateroma, a nivel de la pared vascular, provocando el estrechamiento u occlusion completa de la luz arterial. Clínicamente puede causar infarto agudo del miocardio, accidente cerebro vascular o enfermedad perférica.
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  • 37.