Este documento describe los componentes y uso del microscopio óptico convencional, incluyendo las lentes del condensador, objetivo y ocular, así como las propiedades de aumento, poder resolutivo y profundidad de foco. También cubre el microscopio de fluorescencia, el cual usa luz ultravioleta y fluorocromos para permitir la visualización de sustancias autofluorescentes o marcadas. Los microscopios ópticos y de fluorescencia han permitido avanzos en investigación biológica al permitir la observación de cél

1. MICROSCOPIO ÓPTICO
CONVENCIONAL

2. Índice
● 1. Introducción.
● 2. Partes y funciones.
● 3. Uso del microscopio.
● 4. Componentes básicos.
● 5. Propiedades ópticas.
● 6. Aberraciones.
● 7. Microscopio de fluorescencia.
● 8. Conclusión.

3. 1. Introducción
El microscopio compuesto o microscopio de luz convencional es un
aparato basado en lentes ópticas que nos permite estudiar cortes finos de
muestras magnificados entre 40 y 1000 veces.
Las muestras biológicas deben ser preparadas cuidadosamente siguiendo
protocolos que envuelven su fijación, deshidratación, infiltración en
parafina o algún tipo de resina, seccionamiento en cortes finos, tinción y
montaje sobre una laminilla de cristal.

4. 2. Partes y funciones

5. * Las lentes del microscopio óptico son el
condensador, el objetivo y el ocular.
* La luz que entra en el sistema debe enfocarse sobre la
preparación, y para eso se utiliza el condensador.
El objetivo es la lente situada cerca del objetivo que se observa. El
aumento primario del objeto es producido por la lente objetivo y la
imagen se transmite al ocular.
En el ocular se realiza el aumento final.
* Otro dato importante que hay que recordar es que un
microscopio, aparte de tener la capacidad de dar aumento al
tamaño de la imagen de la muestra, también tiene poder
resolutivo, esto es la capacidad de mostrar distintos y separados
dos puntos muy cercanos.

6. 3. Usos del microscopio
Se utiliza para examinar cultivos, preparaciones trituradas o una lámina
muy fina del material que sea. Normalmente depende de la luz que
atraviese la muestra desde abajo y visualmente son necesarias técnicas
especiales para aumentar el contraste de la imagen.

7. 4. Componentes básicos de los
microscopios.
-Sistema de iluminación: Que emita la luz, otras
radiaciones electromagnéticas o los electrones.
-Sistema óptico: Que con un conjunto de lentes
consiga el aumento y permita la visualización o la
captura en algún soporte.
-Sistema mecánico: Que proporcione soporte a las
lentes y demás elementos, y, que además, permita
mover las lentes y/o la preparación para conseguir el
enfoque.

8. 5. Propiedades ópticas de los
microscopios.
-Aumento: número de veces que se aumenta el tamaño del
objeto real.
-Poder resolutivo: capacidad del microscopio para distinguir
dos puntos muy cercanos entre sí.
El límite de resolución es la distancia mínima a la que pueden
estar dos puntos para ser visualizados como dos imágenes
separadas.
-Profundidad del foco: posibilidad de enfocar correctamente
un objeto de cierto grosor.
-Amplitud del campo: parte de la preparación que se ve
aumentada.

9. 6. Aberraciones
Los sistemas ópticos pueden presentar errores que producen la distorsión
de las imágenes, y es debido al comportamiento de la luz al incidir
sobre el objeto de estudio o a defectos propios de las lentes.
- Aberraciones esféricas: Están relacionadas con la forma esférica de la
lente. Las ondas luminosas que atraviesan la lente por sus extremos no
convergen con las que atraviesan por el centro.
- Aberraciones cromáticas: es un tipo de distorsión óptica provocada
por la imposibilidad de una lente para enfocar todos los colores en un
único punto de convergencia.
- Aberraciones geométricas: es un defecto de los espejos y las lentes en
el que los rayos de luz que inciden paralelamente al eje óptico, son
llevados a un foco diferente que los rayos próximos al mismo.
.

11. 7. Microscopio de fluorescencia.
● El microscopio de fluorescencia es una variación del microscopio
óptico, dotado de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados
por rayos de una determinada longitud de onda.
● La imagen observada es el resultado de la radiación electromagnética
emitida por las moléculas que han absorbido la excitación primaria y
reemitido una luz con mayor longitud de onda.
● Para dejar pasar sólo la emisión secundaria deseada, se deben colocar
filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se
usa para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o
sustancias marcadas con fluorocromos.

12. ● El fenómeno de la fluorescencia se produce cuando un electrón de un
átomo absorbe toda la energía de una determinada longitud de onda de
la luz, saltando a otros orbitales. Es una situación inestable durante la
cual se emite la mayor parte de la energía que se ha absorbido (con
mayor longitud de onda) y vuelve a desplazarse a su orbital.
● Aprovechando este fenómeno, se han creado los fluorocromos
(también conocido como fluoroforos). Para utilizarlos necesitamos
una bombilla que emita luz ultravioleta y luz visible. Para excitar el
fluorocromo necesitamos un filtro de excitación que seleccione la
longitud de onda que excita nuestro flurocromo. Los más comunes son
el DAPI que tiñe el núcleo de las células y el GFP.

14. 8. Conclusión
Podemos decir que tanto los microscopios ópticos como los
microscopios fluorescentes nos han permitido avanzar
mucho en la investigación biológica, ya que podemos con
ellos observar células vivas, células completas y con ello
prevenir enfermedades y algunos tipos de cáncer.
● https://www.youtube.com/watch?v=D6SOwRHsjrI