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product oproduct o
de sus propiosde sus propios
Laboratorio # 3Laboratorio # 3
BacterioloBacteriolo
gíagía
Objetivos del laboratorio
 Entender la clasificación de las bacterias deEntender la clasificación de las bacterias de
acuerdo a sus característicasacuerdo a sus características
 Describir las estructuras y morfología de lasDescribir las estructuras y morfología de las
bacteriasbacterias
 Prácticar técnicas de cultivos de bacteriasPrácticar técnicas de cultivos de bacterias
LA CLA CÉÉLULALULA
 Unidad básica de los organismos
Unicelular
Características de los seres vivos:
•Movimiento
•Respiración
•Metabolismo
•Reproducción
•Responden a estímulos Pluricelular
LA CLA CÉÉLULALULA
Dos tipos de células:
Eucariótica Procariótica
CCÉÉLULA EUCARILULA EUCARIÓÓTICATICA
 Eu = verdadero
Karios = núcleo
 Organelos
definidos
 Grande y
compleja
CCÉÉLULA PROCARILULA PROCARIÓÓTICATICA
 Pro = Antes
Karios = núcleo
 Pequeña y simple
 Reinos
 Categoría
taxonómica formada
por fila o divisiones
relacionados
 Considerada la
categoría más alta
hasta finales del
s. XX
ClasificaciónClasificación
 Se reconocen cinco reinos en la actualidad
 Prokaryotae: organismos unicelulares, bacterias
y algas llamadas cianobacterias. Célula
procariótica
 Protista: organismos que solo tienen una célula
eucariótica
 Fungi: (hongos) descomponedores, parásitos
(patógenos)
 Plantae: organismos que usan clorofila para
captar la energía lumínica y convertirla en
alimento (fotosíntesis). Son autótrofos
 Animalia: organismos heterótrofos
ClasificaciónClasificación
 Nivel taxonómico más alto
DominioDominio
Dominio ArchaeaDominio Archaea
Arqueas:
•Halogeometricum
borinquensis
•Haloterrigena
thermotolerans
Dominio BacteriaDominio Bacteria
•Células procariotas (estructura simple)
•Carecen de núcleo u organelos
limitados por una membrana
•Tienen importancia positiva y negativa
CianobacteriasCianobacterias
•Eran conocidas como algas azul-
verdosas
•Organismos fijadores de nitrógeno
•Abundantes en charcas y lagos
Dominio EukaryaDominio Eukarya
•Se encuentran
los diferentes
reinos
•Organismos
con núcleo
verdadero
BacteriasBacterias
BacteriasBacterias
•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)
•Células microscópicas que se miden en micras (u)
•Mayoría presentan pared celular compuesta de
peptidoglucano (polimero de proteínas y
carbohidratos)
•Reproducción por fisión binaria (asexual)
•Material genético encontrado en plásmidos
•Algunas poseen cápsula
•Pueden formar colonias
BacteriasBacterias
•Crecimiento de
las colonias
•Su morfología
y tamaño se
utilizan para
identificar las
especies de
bacterias
Formas comunes
Márgenes comunes
Características de la superficie
Tinción BacterianaTinción Bacteriana
•Utilización de tintes para identificar
bacterias
•Tinción Gram
•Células responden al tinte de acuerdo a
la complejidad y composición de su pared
celular (pared delgada o gruesa)
•Bacterias Gram +
•Gram –
•Gram variable (menos común)
Tinción GramTinción Gram
Bacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular simple Pared celular compleja
Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina
No capa externa de
lipopolisacáridos
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lipopolisacáridos
Retienen cristal violeta/iodo-
color azul/violeta
Retienen safranina-color
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Parte experimentalParte experimental
Técnicas de asepsiaTécnicas de asepsia
 Contaminación de cultivos
 Trabajamos con posibles patógenos
 Limpiar mesas con Lysol
 Lavarse las manos
 Utilizar zafacón
 Utilizar guantes
 Utilizar bata
Ejercicio # 1: Preparación deEjercicio # 1: Preparación de
laminillalaminilla Preparar laminilla con muestra de sarro
 Procedimiento:
 Gota de agua en laminilla
 Raspar sarro con palillo
 Pasar palillo en gota de agua
 Secar la laminilla utilizando lámpara de alcohol
 Derramar cristal violeta a la laminilla (2-3 gotas)
 Lavar exceso de tinte
 Secar con papel especial
 Observar preparación a través del microscopio
 Dibujar lo observado.
Ejercicio # 2: Observación deEjercicio # 2: Observación de
laminillaslaminillas Observar laminillas
 Bacterias - tinción gram
 Bacilos
 Cocos
 Otras morfologías
 Dibujar lo observado
Ejercicio # 3:Ejercicio # 3: MorfologMorfologíaía
bacterianabacteriana
 Observar bajo
estereoscopio las
placas Petri para
identificar la
morfología de
las colonias
Ejercicio # 4:Ejercicio # 4: Exposición deExposición de
platosplatos Tomar muestra de aire, agua, suelo, entre otros,
utilizando la técnica a explicarse en el
laboratorio
 Colocarla en las placas Petri conteniendo un
medio de cultivo (TSA) utilizando las técnicas
asépticas correspondientes
 Cerrar con parafina y rotular las placas: nombre,
sección, clave, instructor.
 Incubar a 25°C por 48 hrs
 Anotar y dibujar los resultados
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hongos
Ejercicio # 5:Ejercicio # 5: Control deControl de
crecimiento Bacterianocrecimiento Bacteriano
 Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o
antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo
el crecimiento de bacterias
 Inocular de forma estriada la muestra de bacterias en el
medio de cultivo
 Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes
sustancias químicas, sobre el agar y un disco con agua
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 Rotular las placas
 Incubar a 37°C, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los
resultados (medir la zona de inhibición-cm)
Informe Escrito (40 pts)Informe Escrito (40 pts)
 Será solo del ejercicio de control de
crecimiento bacteriano
 Página presentación
 Introducción (incluir objetivos)
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O clab3

  • 1.
  • 2. ““Los mej ores hombres sonLos mej ores hombres son product oproduct o de sus propiosde sus propios
  • 3. Laboratorio # 3Laboratorio # 3 BacterioloBacteriolo gíagía
  • 4. Objetivos del laboratorio  Entender la clasificación de las bacterias deEntender la clasificación de las bacterias de acuerdo a sus característicasacuerdo a sus características  Describir las estructuras y morfología de lasDescribir las estructuras y morfología de las bacteriasbacterias  Prácticar técnicas de cultivos de bacteriasPrácticar técnicas de cultivos de bacterias
  • 5. LA CLA CÉÉLULALULA  Unidad básica de los organismos Unicelular Características de los seres vivos: •Movimiento •Respiración •Metabolismo •Reproducción •Responden a estímulos Pluricelular
  • 6. LA CLA CÉÉLULALULA Dos tipos de células: Eucariótica Procariótica
  • 7. CCÉÉLULA EUCARILULA EUCARIÓÓTICATICA  Eu = verdadero Karios = núcleo  Organelos definidos  Grande y compleja
  • 8. CCÉÉLULA PROCARILULA PROCARIÓÓTICATICA  Pro = Antes Karios = núcleo  Pequeña y simple
  • 9.  Reinos  Categoría taxonómica formada por fila o divisiones relacionados  Considerada la categoría más alta hasta finales del s. XX ClasificaciónClasificación
  • 10.  Se reconocen cinco reinos en la actualidad  Prokaryotae: organismos unicelulares, bacterias y algas llamadas cianobacterias. Célula procariótica  Protista: organismos que solo tienen una célula eucariótica  Fungi: (hongos) descomponedores, parásitos (patógenos)  Plantae: organismos que usan clorofila para captar la energía lumínica y convertirla en alimento (fotosíntesis). Son autótrofos  Animalia: organismos heterótrofos ClasificaciónClasificación
  • 11.  Nivel taxonómico más alto DominioDominio
  • 13. Dominio BacteriaDominio Bacteria •Células procariotas (estructura simple) •Carecen de núcleo u organelos limitados por una membrana •Tienen importancia positiva y negativa
  • 14. CianobacteriasCianobacterias •Eran conocidas como algas azul- verdosas •Organismos fijadores de nitrógeno •Abundantes en charcas y lagos
  • 15. Dominio EukaryaDominio Eukarya •Se encuentran los diferentes reinos •Organismos con núcleo verdadero
  • 17. BacteriasBacterias •Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674) •Células microscópicas que se miden en micras (u) •Mayoría presentan pared celular compuesta de peptidoglucano (polimero de proteínas y carbohidratos) •Reproducción por fisión binaria (asexual) •Material genético encontrado en plásmidos •Algunas poseen cápsula •Pueden formar colonias
  • 18. BacteriasBacterias •Crecimiento de las colonias •Su morfología y tamaño se utilizan para identificar las especies de bacterias Formas comunes Márgenes comunes Características de la superficie
  • 19. Tinción BacterianaTinción Bacteriana •Utilización de tintes para identificar bacterias •Tinción Gram •Células responden al tinte de acuerdo a la complejidad y composición de su pared celular (pared delgada o gruesa) •Bacterias Gram + •Gram – •Gram variable (menos común)
  • 20. Tinción GramTinción Gram Bacteria Gram + Bacteria Gram - Pared celular simple Pared celular compleja Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina No capa externa de lipopolisacáridos Capa externa de lipopolisacáridos Retienen cristal violeta/iodo- color azul/violeta Retienen safranina-color rojo/rosado
  • 22. Técnicas de asepsiaTécnicas de asepsia  Contaminación de cultivos  Trabajamos con posibles patógenos  Limpiar mesas con Lysol  Lavarse las manos  Utilizar zafacón  Utilizar guantes  Utilizar bata
  • 23. Ejercicio # 1: Preparación deEjercicio # 1: Preparación de laminillalaminilla Preparar laminilla con muestra de sarro  Procedimiento:  Gota de agua en laminilla  Raspar sarro con palillo  Pasar palillo en gota de agua  Secar la laminilla utilizando lámpara de alcohol  Derramar cristal violeta a la laminilla (2-3 gotas)  Lavar exceso de tinte  Secar con papel especial  Observar preparación a través del microscopio  Dibujar lo observado.
  • 24. Ejercicio # 2: Observación deEjercicio # 2: Observación de laminillaslaminillas Observar laminillas  Bacterias - tinción gram  Bacilos  Cocos  Otras morfologías  Dibujar lo observado
  • 25. Ejercicio # 3:Ejercicio # 3: MorfologMorfologíaía bacterianabacteriana  Observar bajo estereoscopio las placas Petri para identificar la morfología de las colonias
  • 26. Ejercicio # 4:Ejercicio # 4: Exposición deExposición de platosplatos Tomar muestra de aire, agua, suelo, entre otros, utilizando la técnica a explicarse en el laboratorio  Colocarla en las placas Petri conteniendo un medio de cultivo (TSA) utilizando las técnicas asépticas correspondientes  Cerrar con parafina y rotular las placas: nombre, sección, clave, instructor.  Incubar a 25°C por 48 hrs  Anotar y dibujar los resultados  Tomar en consideración a las bacterias, no a los hongos
  • 27. Ejercicio # 5:Ejercicio # 5: Control deControl de crecimiento Bacterianocrecimiento Bacteriano  Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo el crecimiento de bacterias  Inocular de forma estriada la muestra de bacterias en el medio de cultivo  Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes sustancias químicas, sobre el agar y un disco con agua (control)  Rotular las placas  Incubar a 37°C, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los resultados (medir la zona de inhibición-cm)
  • 28. Informe Escrito (40 pts)Informe Escrito (40 pts)  Será solo del ejercicio de control de crecimiento bacteriano  Página presentación  Introducción (incluir objetivos)  Materiales y métodos  Análisis de resultados (incluir gráficas, dibujos y/o tablas)  Conclusión  Bibliografía (mínimo cinco)