Este documento presenta un resumen de las pruebas para evaluar la inmunidad celular tanto in vivo como in vitro. Explica que las pruebas in vivo incluyen la intradermo-reacción y la hipersensibilidad retardada, mientras que las pruebas in vitro son funcionales como la proliferación celular, la citotoxicidad y los bioensayos, o no funcionales como la citometría de flujo y la inmunofluorescencia. Finalmente, describe algunas pruebas in vitro funcionales específicas como la proliferación inducida por ant

1. INMUNIDAD CELULAR
Materia: Inmunología
Carrera: Farmacia
Flavia Sacerdoti
Año:2015

2. Objetivo de este seminario
• Repasar las generalidades del sistema
inmune
• Conocer las formas de evaluar la respuesta
celular in vivo e in vitro.

3. ¿CUALES SON LAS CELULAS DEL
SISTEMA INMUNE?

4. ¿CUALES SON LAS FUNCIONES DE LAS
CELULAS DEL SISTEMA INMUNE?

5. ¿Qué vamos a ver hoy?
In vivo:
• Pruebas funcionales
Pruebas para
evaluar
la inmunidad celular:
In vitro:
• Pruebas funcionales
• Pruebas no funcionales

6. Pruebas in vitro
No
Funcionales
Funcionales
Proliferación celular
-por mitógenos
-por antígenos
Citotoxicidad
-ADCC
-CDC
Detección de sustancias
liberadas
-Bioensayos
Citometría de Flujo
Inmunofluorescencia

7. Pruebas in vitro
No
Funcionales
Citometría de Flujo
Inmunofluorescencia
UTILIDADES: Caracterizar poblaciones celulares
* Detección de tipos celulares
Diagnóstico y clasificación de leucemias y linfomas
* Caracterización fenotípica
Evaluación del pronóstico en cáncer
* Evaluación número total de linfocitos
Pronóstico de pacientes con HIV
* Relaciones LT/LB, LT CD4+/ CD8+
Estado inmunitario en pacientes transplantados

8. Citometría de flujo
Debe encontrarse en forma de suspensión monodipersa
MUESTRAS

9. Imunofluorescencia

10. Pruebas in vitro
Funcionales
No
Funcionales
Citometría de Flujo
Inmunofluorescencia
Funcionalidad de LT:
Bioensayos,ELISA,ELISPOT
Detección de sustancias liberadas
(Respuesta efectora)
-ADCC (Citotoxicidad mediada por
Ac)
Citotoxicidad (Respuesta efectora)
-por antígenos
Proliferación celular (linfocitaria) (Activa

11. ¿Cómo se cultiva una célula?
Condiciones esterilidad para
evitar contaminaciones con
bacterias y hongos
fundamentalmente

12. Proliferación por antígenos
Co-cultivo de Células presentadoras de
antígenos (CPA) con LT
Evalúa: Funcionalidad de LT específicos de memoria
contra una antígeno determinado
LINFOCIT
O T o B
CPA
ANTIGENO
5-7 días
Proliferación de Linfocitos

13. ADCC (Citotoxicidad mediada por
anticuerpos)

14. BIOENSAY
O
Evalúa la funcionalidad biológica de una molécula
determinada
Ejemplos:
• Proliferación inducida por citoquinas (proliferación de LT por IL-2)
• Citotoxicidad de una molécula (TNF-α produce citotoxicidad de
células fibroblasticas, L929)
• Funcionalidad de anticuerpos (anti TNF-α inhibe la funcionalidad
del TNF- α)

15. Pruebas para evaluar la inmunidad
celular
Pruebas in vivo
Funcionales Intradermo-reacción
Hipersensibilidad
Retardada

16. Intradermo-reacción
Prueba de Mantoux, tuberculina o PPD
Inoculación del
Ag Intradérmico
LT reconoce el
Ag y libera
citoquinas que
actúan sobre el
endotelio
Reclutamiento de
macrófagos y
leucocitos
INFLAMACION
Evalúa la respuesta celular (activacion de CPS y linfocitos de
memoria)
ante el Mycobacterium tuberculosis

17. MUCHAS GRACIAS!