El documento describe la evolución de la citogenética desde inicios del siglo XX, cuando los cromosomas solo podían observarse con tinción igualitaria, hasta el desarrollo de técnicas como FISH y CGH que permiten estudiar el ADN directamente en los cromosomas. Explica que la citogenética clásica dio paso a la citogenética molecular y cómo estas técnicas han mejorado el diagnóstico de enfermedades como el mosaicismo.

1. CITOGENÉTICA Y ANÁLISIS DE
ARTÍCULO
Pérez Zavala Omar Alejandro
7 DE OCTUBRE DE 2021
UNIVERSIDAD VERACRUZANA
Genética Dra Trinidad Hernández Sagrario del Pilar

2. Pérez Zavala Omar Alejandro Bloque C Genética 13/10/2021
Citogenética
Introducción
Desde inicios del siglo XX hemos visto cómo los métodos para poder analizar el
material genético han avanzado a pasos agigantados, gracias a los ahora diversos
métodos de análisis de cromosomas y genomas hemos logrado entender el
proceder de un gran número de alteraciones que encontramos en la estructura y
secuencia del ADN y así relacionarla con todo tipo de enfermedades, desde
hereditarias hasta no hereditarias. Es más, la citogenética ha permitido que se
realicen estudios para detectar enfermedades con alteraciones extremadamente
pequeñas en la estructura del cromosoma, dando paso también a otra área la cual
conoceremos como citogenética molecular, ambas áreas de estudio buscan darse
a conocer y explicar función y cuáles son sus características con este documento.

3. Pérez Zavala Omar Alejandro Bloque C Genética 13/10/2021
Antecedentes
Hasta antes de 1971 se observaban cromosomas sin diferencia por una tinción
igualitaria a lo largo de toda su estructura, provocando este un problema para poder
observar más allá y tratar de entender un poco más los problemas que se plantean,
es entonces, que en aquel año se creó lo que conocemos como bandas claras y
oscuras (distintivas por su fluorescencia), las cuales presentan distintos patrones
dependientes de las parejas de cromosomas a los que se colocaban, esta creación
fue la que dio el primer paso de la citogenética, estableciendo 5 diferentes análisis,
sin embargo hay 3 principales, que son las bandas Q, bandas G y bandas R. Algo
importante a conocer y diferenciar son las dos eras por las cuales pasó la
citogenética, observándose la era clásica y la molecular la cual comenzó con la
introducción de las tecnologías de ADN.
Desarrollo
La citogenética es una ciencia la cual se encarga de estudiar a fondo la estructura
de los cromosomas, así como su comportamiento. En la actualidad estas técnicas
se basan en la tecnología de la hibridación in situ fluorescente o FISH (fluorescent
in situ hybridization), siendo esta la técnica que abrió las puertas al estudio de la
cromatina directamente sobre los cromosomas gracias a la información que
encontramos del mismo ADN y no solo información obtenida al conocer su
morfología.
La segunda era comentada anteriormente, se considera que fue la fusión entre la
citogenética clásica y la molecular, se le corresponde a esta un conjunto de técnicas
ocupando métodos de la biología, pero directamente sobre los cromosomas.
Además de estos métodos usados, el cambio mayor se dio en los últimos años
gracias al uso de microscopía confocal y epifluorescente, así como por el desarrollo
de nuevos componentes ópticos que han mejorado con el tiempo.
Ahora que ya hemos contextualizado en qué consisten ambas situaciones,
comenzaremos a hablar sobre las técnicas, comenzando con FISH el cual es una
técnica que se basa en la estructura doble de la cadena de ADN, en si lo que se
hace es diseñar un fragmento de este
ADN, conocido como sonda el cual es
complementario a la región del genoma
de estudio, es entonces que esta se
marca con un fluorocromo que es
básicamente una sustancia fluorescente
y se añade a la preparación de células
que se quiere estudiar, el calor las
desnaturaliza y desencadena una serie
de procesos que derivan en que la marca podrá visualizarse en un microscopio de
fluorescencia.

4. Pérez Zavala Omar Alejandro Bloque C Genética 13/10/2021
Se han desarrollado diferentes técnicas con las cuales se obtienen diferente
resolución y objetivos diagnósticos.
Otro método útil para la citogenética es la CGH (Hibridación genómica comparada),
la cual ocupa los fundamentos de FISH, esta nueva tecnología se desarrolló a
finales de 90, en sí, funciona marcando el ADN del agente con fluorocromo verde y
el de un individuo normal o de referencia con un fluorocromo rojo, mezclarlos y
realizar la hibridación in situ sobre cromosomas normales, lo que provoca es que
ambos ADN compiten para hibridar en los mismos lugares cromosómicos. Entonces,
si ADN no tiene alteraciones el resultado será una tinción fluorescente amarilla y
homogénea resultante de la mezcla, Sin embargo, si el ADN de la muestra tiene
una deleción (pérdida de ADN), o una ganancia (duplicación) en una región
cromosómica determinada, el patrón de fluorescencia mostrará en esa zona
incremento de la señal roja en caso de deleción (ya que habrá más cantidad de ADN
normal), o de la señal verde en caso de ganancia.
Dentro de los estudios de la citogenética podemos encontrar muchos artículos, los
cuales son muy informativos y nos dan un mejor contexto de cómo ha evolucionado
esta rama de estudio, uno de estos es llamado “Diagnóstico citogenético molecular
y variaciones del genoma somático”, publicado en 2010 por una academia rusa, en
este nos dan una perspectiva muy interesante sobre algunas dificultades con las
que cuenta un genetista al presentarse algunos casos como el mosaicismo, sin
embargo este no es el único problema, muchas veces es la deficiencia en el
conocimiento tecnológico y de aplicación de conocimientos con nuevas tecnologías,
y es esto en lo que se centra principalmente el artículo.
Para poder distinguir gran cantidad de las muestras que se realizan también es
necesario que se añadan muchos estudios con técnicas basadas en FISH, esta
clase de análisis son los mejores para estudiar grandes poblaciones de células, sin
embargo aquí también se encuentran.
A pesar de todos los avances que se han desarrollado a lo largo de estos años
hemos visto diferentes cambios, en cuanto al diagnóstico del ADN, aún con estos
cambios en diagnosis aún se debe de realizar evaluaciones citogenéticas, esto
podría considerarse un problema, solo visto desde la perspectiva que se deberían
encontrar formas más diversas para estos análisis.
En cuanto al problema antes comentado del mosaicismo, como comenté, es un
problema aún principalmente de interpretación, de hecho parece ser más fácil
cuando presenta líneas celulares anormales, aunque aún la determinación si es una
condición patógena o benigna sigue siendo un misterio, y es aún más problemático
porque aquella población clínica con la que presentan los hospitales, y se relaciona
mucho con malignización, por tanto es mejor considerar tales variaciones
genómicas en lugar de un factor neutral o de susceptibilidad que una anomalía
genética causal.

5. Pérez Zavala Omar Alejandro Bloque C Genética 13/10/2021
El mismo artículo nos da ciertas recomendaciones y soluciones tales como un modo
de operación para el diagnóstico del mosaicismo, entre los cuales veremos una
puntuación de eventos raros, considerar si hay posible falta de reproductividad,
determinar si no hay otros enfoques que puedan producir eventos similares, como
tal estos pasos no siempre darán un resultado exacto, es por eso que se suele
acompañar de otros estudios complementarios, que normalmente son numerosas
técnicas citogenéticas moleculares, gracias a estas es que obtenemos una
resolución más alta para poder puntuar eventos raros de una sola célula.
Conclusiones
Como observamos han habido muchos cambios en el diagnóstico y el análisis del
mosaicismo, en este trabajo explicamos un poco cómo funcionan estos,
basándonos principalmente en técnicas como el FISH, CGH y en otras técnicas
basadas en Array-CGH, aunque algunas de estas no presenten un buen diagnóstico
al inicio y requieran apoyo de otras técnicas complementarias nos damos cuenta
del trabajo que se debe realizar para el diagnóstico, no solo del mosaicismo, si no
de en general todas las enfermedades que tienen bases de diagnóstico en la
genética.

6. Pérez Zavala Omar Alejandro Bloque C Genética 13/10/2021
Revisión bibliográfica:
A continuación adjunto las bibliografías consultadas.
Vorsanova S., Yurov Y. Molecular Cytogenetic Diagnosis and Somatic Genome
Variations. Current Genomics [INTERNET] 2010 Disponible en:
DOI: 10.2174/138920210793176010
Martínez A. Citogenética Convencional y Molecular. [INTERNET] Anatomía
patológica [Consultado el 20/10/2021]. Disponible en:
http://cdb.hospitalclinic.org/laboratorios/anatomia-patologica/tecnicas/citogenetica-
tecnica/
NIH. Citogenética. [INTERNET] NHGRI [Consultado el 20/10/2021]. Disponible en:
https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Citogenetica