PREPARACIÓN DE MATERIALES PARA ESTERILIZACIÓN

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“Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional”
Universidad Nacional de Ucayali
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Escuela Profesional de Ingeniería Agroindustrial
Informe: N° 2
Tema: preparación de materiales para esterilización.
Curso: Microbiología general.
Profesora: Ing. Cristina Elena Quiñones Ruiz.
Integrantes: Andagua Shapiama, Jassy Lizeth.
Navarro Sabalbascoa, Paolo.
Ponce Durán Jholsen Felipe.
Rojas Rengifo, Jimmy Johan.
Solís Aliaga, Lizeth Nicolle.
Tamani Curitima, Ilda Melita.
Vargas Silva, Cluver.
Fecha de ejecución de la práctica:06-01-2022.
Fecha de entrega: 13-01-2022.
Pucallpa – Perú
2022

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INDICE
I. INTRODUCCIÓN:.................................................................................................................... 3
II. OBJETIVO:.............................................................................................................................. 4
III. FUNDAMENTO TEÓRICO:...................................................................................................... 4
IV. DEFINICIONES:...................................................................................................................... 7
V. CONDICIONES....................................................................................................................... 7
VI. MATERIAL Y MÉTODO.......................................................................................................... 8
VII. RESULTADOS Y DISCUSIONES............................................................................................ 10
VIII. CONCLUSIONES: ................................................................................................................ 11
IX. ANEXO............................................................................................................................... 12
X. REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................... 13

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I. INTRODUCCIÓN:
La esterilización es un método de eliminación total de todo tipo de organismo
que asegura la ausencia absoluta de cualquier forma viviente. Una esterilización
deficiente o manipulación incorrecta de materiales y medios de cultivo conlleva
a contaminaciones, resultados erróneos o pérdida del material biológico. Por ello,
se requieren buenas prácticas de laboratorio para su adecuado manejo. La
esterilización por calor seco o húmedo son los métodos que se utilizan con mayor
frecuencia en el Laboratorio de Microbiología. El calor seco destruye a los
microorganismos por oxidación, por ejemplo, al exponerlos directamente a la
flama de un mechero o en horno a 150-180°C durante 2 horas. Estos métodos
se aplican en la esterilización de asas de inoculación y para todo tipo de material
de vidrio.
En esta práctica de laboratorio se encuentra información del procedimiento de
preparado de materiales para la esterilización.

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II. OBJETIVO:
 Conocer los principios generales de las técnicas de esterilización de
materiales.
III. FUNDAMENTO TEÓRICO:
1) Preparación de los materiales
Lavar perfectamente todos y cada uno de los materiales que se vayan a
utilizar en el desarrollo de la práctica utilizando, detergente y escobillones.
En juagar con abundante agua corriente. Escurrir el exceso de agua y
enjuagar el material usando agua destilada con una piceta, por las paredes
interiores. Dejar escurrir el material sobre una toalla o papel de envoltura, se
puede usar aire caliente de una secadora para acelerar el proceso de
secado, en el caso de las pipetas, estas se pueden introducir en el horno de
secado a 100 ºC durante 10 minutos. Una vez seco el material, se procederá
a envolver las cajas Petri y pipetas, con papel Kraft. Para los tubos y
matraces se elaborarán tapones de algodón procurando ajusten sin tanta
holgura, sobre los que finalmente se colocarán los gorros de papel.
2) Elaboración de los gorros.
Para tener una base para el cálculo del gorro, tenemos que aproximadamente
con dos pliegos papel Kraft de tamaño carta, se obtiene un gorro adecuado
para tapar un matraz de 500 ml. Los pasos principales para la elaboración de
ellos es la siguiente:
1) Se corta el papel Kraft en forma de rectángulo, del tamaño según se
necesita.
2) Se dobla el papel a la mitad con respecto a la parte larga del mismo.
3) Se doblan las puntas superiores, uniéndolas por el centro.

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4) De la parte inferior se dobla hacia arriba al borde de la hoja que queda
encima, hasta la altura de las puntas unidas y se le da media vuelta al
papel.
5) Se doblan las puntas de los lados, hasta la altura donde sobre sale el
doblez del inciso no.4.
6) De la parte inferior se dobla hacia arriba, el borde sobresaliente de la
hoja hasta el doblez interior.
7) se le da media vuelta al papel obteniéndose de esta manera el gorro.
3) Elaboración de tapones de algodón
Los tapones son utilizados en los diferentes tamaños de tubos y matraces,
por lo que el procedimiento presentado es una forma generalizada del
proceso.
20 cm de largo, 3 cm de anchó y un grosor de 0.5 cm) aproximadamente,
se obtiene un tapón adecuado para un matraz de 500 ml. Los principales
pasos para la elaboración de tapones de algodón se describen a
continuación:
1) Se corta una tira de algodón, de largo adecuado a las necesidades
(ya sea para los tubos de ensayo o para el matraz de 500 ml).
2) Se enrolla el algodón, de una manera que quede firme el enrollado.
3) el algodón enrollado, se presiona hacia adentro del matraz, de
manera que, entre uniformemente por todos lados a la boca de
este, dejando a flote la punta superior del algodón.
4) Preparación y envolturas de pipetas.
La preparación de las pipetas para su esterilización es sencilla; una vez
limpias y secas. Con un clip se le introduce en la boquilla de succión un
filtro de algodón, de forma de que el algodón entre suavemente y sin
romperse con la presión del clip. Este tapón tiene una doble función, una
es para evitar que, en un descuido de succión forzada, por obstrucción de
la pipeta, ingiera el alumno el producto succionado al destaparse

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bruscamente, y la segunda razón es para evitar que por la boquilla de
succión entren microorganismos que alteren el trabajo realizado.
1. Se corta una tira de papel Kraft de aproximadamente 3 cm de
ancho y 30 cm de largo.
2. Se dobla el extremo inferior aproximadamente 2 cm.
3. Se coloca la pipeta con la punta a la mitad del doblez anterior y
con un ángulo de aproximadamente 25 / 30 grados de
inclinación con respecto a la posición del papel Kraft.
4. Se le hace un segundo doblez, tapando la punta de la pipeta
con la porción de papel que sobresale a la punta de la pipeta.
5. Se le hace un tercer doblez a la punta de la pipeta que queda
en el ángulo de inclinación, de manera que cubra
completamente la punta de la pipeta.
6. Se da vuelta a la pipeta procurando que el papel vaya
envolviéndola en forma de espiral.
7. Verificar que el enrollado no quede flojo, en caso de estarlo,
reafirmar el papel con respecto a la forma de la pipeta.
8. En la parte superior, doblar hacia abajo el papel sobresaliente.9.
Cubrir con cinta adhesiva dicho doblez.
5) Procedimiento para la envoltura de cajas de Petri.
Al utilizar cajas de Petri en los cultivos microbianos, tienen que ser
esterilizadas para poder vaciar dichos medios de cultivo que servirán de
nutriente a los microorganismos tratados. Estas cajas se pueden esterilizar
por calor húmedo o calor seco, siendo más recomendable el calor seco, por
ser más confiable su efectividad. Es necesario envolver las cajas Petri antes
de esterilizarlas para evitar que al término de la esterilización estén expuestas
al medio ambiente y se contaminen de nuevo. Para esterilizarlas se puede
utilizar un recipiente cilíndrico de metal o envolviéndolas en papel Kraft. La
manera de envolver las cajas se describe a continuación:
1) Se corta papel Kraft, de tamaño adecuado para el número de cajas que
se deseen envolver y se colocan las cajas en el centro del papel.

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2) Los bordes de los costados se unen al centro cubriendo las cajas que se
envuelven.
3) En la parte superior se unen los bordes de ambos lados y esta unión se
dobla a la mitad.
4) Se hace un segundo doblez, quedando recargado éste sobre las cajas.
5) Al papel se le presiona a los costados quedando al relieve el volumen de
las cajas envueltas en el papel.
6) Se doblan las puntas del papel de cada una de las esquinas al centro.
7) Se le da vuelta al material, quedando el doblez hacia abajo.
8) Las puntas salientes del papel en los lados de las cajas se doblan hacia
arriba y al centro de las cajas y se les asegura con cinta adhesiva.
IV. DEFINICIONES:
 Esterilización: Proceso de destrucción o remoción de todas las formas
de vida microbiana patógenas o no, tanto en su forma vegetativa como
esporulada de un material o un objeto. Destrucción de toda forma de vida
microbiana, como bacterias, hongos y virus, tanto en su forma vegetativa
como esporulada.
 Desinfección. Tratamiento físico o químico que destruye la mayor parte
de los microorganismos patógenos o formas vegetativas microbianas que
se encuentran en los objetos o sobre estos; pero no sus esporas. Y en el
cual no son eliminados o permanecen con frecuencia, los
microorganismos no patógenos o las formas resistentes de estos, en o
sobre los objetos, una vez estos desinfectados.
 Desinfectantes. Son agentes químicos o sustancias germicidas letales
para los microorganismos.
 Antiséptico. Sustancia que previene o impide el crecimiento o acción de
los microorganismos por inhibición de su actividad o por destrucción del
mismo.
V. CONDICIONES.
Las condiciones que deben cubrir todos los métodos de esterilización son:

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1. Permitir que el agente esterilizante penetre en todos los objetos
contenidos en el paquete.
2. Permitir la salida del agente esterilizante al finalizar el periodo de
exposición y secado o aireado adecuados.
3. Resistir las condiciones físicas de los procesos de esterilización.
4. Mantener la integridad del paquete en los diferentes niveles de presión y
humedad.
5. Proporcionar una barrera impermeable a los microorganismos, partículas
de polvo y humedad después de la esterilización. Los artículos deben
permanecer estériles desde que se extraen del esterilizador hasta que se
utilizan.
6. Cubrir por completo los artículos, considerando un margen de 2.5 cm,
para poder sellarlo. Para el sellado es importante no utilizar grapas o clips
o cualquier objeto penetrante, ya que para abrirlo se rompería.
7. Resistir las posibles rupturas o punciones al manipularlo.
8. Proteger el contenido de daños físicos.
9. Permitir que el paquete se deposite fácilmente en el campo estéril sin
contaminar.
VI. MATERIAL Y MÉTODO
 Materiales
 Tijera
 Papel kraft
 Algodón
 Hilo pabilo
 2 matraces Erlenmeyer
 10 tubos de ensayo
 Gradilla
 2 vasos de precipitado
 3 pipetas
 6 placas de Petri
 Bandeja de aluminio

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 Método
A) Preparación De Matraces
Preparar la torunda, para ello se necesita una porción de algodón de
aproximadamente 8x16 cm. Primero doblar la porción de algodón para evitar
que se desprendan las fibras, luego enrollar firmemente el algodón para
formar la torunda. Después, introducir la torunda a la boquilla del matraz y
dejar una porción que sobresalga para sostenerla.
Preparar un capuchón de papel, para ello se necesita papel kraft de
aproximadamente 20x14 cm. Iniciar doblando a la mitad el papel, marcar un
segundo doble y abrir. Llevar las esquinas hacia la marca del doble formando
un triángulo. Doblar hacia arriba una de las cejillas. Calcular el ancho de
acuerdo a la torunda y el matraz a cubrir, después doblar las esquinas hacia
atrás. Voltear la figura y doblar la otra cejilla hacia arriba para evitar de que
se salgue el capuchón. Una vez lista el capuchón, colocarlo en el matraz con
la torunda.
B) Preparación De Tubos De Ensayo
Preparar la torunda y el capuchón, que se hace de la misma manera que la
del matraz, pero con trozos más pequeños.
C) Preparación De Pipetas
Colocar un filtro de algodón, para ello con el extremo recto de un clip,
introducir una pequeña porción de algodón en la boquilla de la pipeta a una
profundidad aproximada de 2 cm, y luego acomodar las fibras del algodón
que sobresalen de la boquilla.
Envolver la pipeta con papel kraft, para ello se necesita 2x45 cm de este
papel. La envoltura se inicia al colocar la punta de la pipeta en posición
diagonal sobre un extremo de la tira de papel. Doblar sobre el frente del papel
sobre la punta de la pipeta, doblar la posición lateral de manera que se ajuste
al costado de la misma. Con una mano, sostener firmemente la punta de la
pipeta cubierta por el papel, y con la otra mano girar la pipeta para que la
envoltura se realice de la manera correcta. Al llegar al otro extremo de la

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pipeta, enrollar el papel excedente en forma más apretada para evitar que la
envoltura se afloje, o bien se dobla y se fija amarrándolo con hilo pabilo.
D) Preparación De Placas De Petri
Envolver la placa de Petri con papel kraft de aproximadamente 22x32 cm.
Primero, colocar la placa de Petri, en posición invertida, en el centro del
rectángulo del papel. Levantar los extremos más angostos y juntarlo.
Doblarlo hacia abajo y hacia al centro ajustando el dobles a la placa. Doblar
las esquinas de los extremos para formar un triángulo. Doblar los extremos
hacia debajo de la placa y fijarlo amarrando con hilo pabilo.
E) Preparación De Vasos De Precipitado
Envolver el vaso de precipitado con papel kraft. Primero cubrir la parte
superior con un cuadro de papel kraft de aproximadamente 16x16 cm, luego,
con hilo pabilo, amarrar y sujetar el papel. Después, envolver todo el vaso
con un rectángulo de papel de aproximadamente 25x35 cm. Luego, enrollar
el papel excedente y sujetarlo amarrando con hilo pabilo.
VII. RESULTADOS Y DISCUSIONES
 Resultados
 Luego de seguir toda la metodología, conseguimos preparar nuestros
materiales para su esterilización.
 El tiempo que duró la práctica fue alrededor de 40 minutos.

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VIII. CONCLUSIONES:
La esterilización de los materiales es un proceso a través del que se puede lograr
la destrucción total de los microorganismos presentes en un determinado
material, por tal motivo es de mucha importancia conocer el procedimiento y las
técnicas para empacar diversos materiales de uso en el laboratorio de
microbiología. Ya que estos nos ayudaran de una manera a preservar los
diferentes instrumentos de laboratorio como pipetas matraz de Erlenmeyer,
tubos de ensayo etc. Todo empacado con el papel Kraft y algodón de una
manera muy cuidadosamente y con mucha precaución; y posteriormente se lleva
a la autoclave para su respectiva esterilización.
La esterilización debe ser un método seguro, que permita el rápido
procesamiento del material en el laboratorio de microbiología, garantizando su
esterilidad en el momento preciso. Así mismo, es necesario el mantenimiento de
un ambiente laboral que no afecte a la salud del personal.

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IX. ANEXO
Flujograma de preparación para esterilización de materiales
Preparación De Matraces
Preparación De Tubos De Ensayo
Preparación De Pipetas
Preparación De Placas De Petri
Preparación De Vasos De
Precipitado
Materiales listos para esterilización
 Torunda (8x16
cm).
 Capuchón de
papel con papel
kraft (20x14 cm).
 Filtro de algodón,
profundidad de 2 cm
 Envolver con papel
kraft (2x45 cm)
Envolver con papel
kraft (22x32 cm).
Preparar la torunda
y el capuchón.
Filtro de algodón,
profundidad de 2 cm
Envolver con papel
kraft (2x45 cm)
Preparación para esterilización de
materiales

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X. REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍA
Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiología. Manual de Métodos
Generales (2ª edición). Facultad de Farmacia. Universidad Central de
Venezuela.
Ortega, Y.; Quevedo F. 1991. Garantía de la Calidad de los Laboratorios de
Microbiología Alimentaria. Organización Panamericana de la Salud.
Organización Mundial de la Salud.
Instituto tecnológico SEP. F. 2008. Preparación y esterilización de materiales
para su uso en microbiología. Pg. 7