1. Extracción, Identificación
Cromatográfica de Lípidos de
Yema de Huevo y
Cuantificación de Colesterol.

2. Resumen
El presente trabajo, es una
propuesta experimental que
pretende complementar una práctica
que forma parte de los experimentos
del Manual de Bioquímica Celular y
de los Tejidos I (BCT I). Se imparte
en el cuarto semestre, a los alumnos
de la carrera de Química
Farmacéutico Biológica.

3. Resumen
Actualmente, se extraen y separan los
lípidos fosforilados y no fosforilados de
la yema de huevo y mediante la
valoración del fósforo, cuantificamos de
manera indirecta los lípidos fosforilados.
La siguiente metodología, permite la
identificación cromatográfica de los
lípidos tanto fosforilados como no
fosforilados y además la cuantificación
del colesterol.

4. Antecedentes
BIOQUÍMICA CELULAR Y
BIOQUÍMICA CELULAR Y
DE LOS TEJIDOS I I
DE LOS TEJIDOS
SEMINARIO DE
SEMINARIO DE LAB. DE CIENCIA
LAB. DE CIENCIA
PROBLEMAS
PROBLEMAS
MATEMÁTICAS
MATEMÁTICAS QUÍMICA II
QUÍMICA BÁSICA II
BÁSICA
SOCIOECONÓMICOS
SOCIOECONÓMICOS
MATEMÁTICAS II
MATEMÁTICAS II QUÍMICA II
QUÍMICA II FISICOQUÍMICA II
FISICOQUÍMICA LAB. DE CIENCIA
LAB. DE CIENCIA
BÁSICA II
BÁSICA II
BIOESTADÍSTICA
BIOESTADÍSTICA QUÍMICA III
QUÍMICA III FISICOQUÍMICA II
FISICOQUÍMICA II LAB. DE CIENCIA
LAB. DE CIENCIA
BÁSICA III
BÁSICA III

5. Justificación de la
Propuesta
 Los lípidos son un grupo de compuestos
muy importantes desde el punto de vista
biológico y en particular para su estudio
en los laboratorios de educación
(Bioquímica).
 Debido a sus características fisicas y
químicas, es posible establecer una serie
de experimentos, que permiten realizar
procesos como: extracción, identificación
y cuantificación.

6. Justificación de la
Propuesta
La yema de huevo (31%), es una
fuente rica en lípidos(32%),
contiene:
Fosfatidilcolina
Fosfatidiletanolamina
Esfingomielina
Colesterol y ésteres de colesterol
 Lecitina es aproximadamente el 14%
del peso seco.

7. Objetivos
 Analizar algunas características
físicas y químicas de los lípidos.
 Emplear un método de
extracción de los lípidos, a partir
de la yema de huevo.

8. Objetivos
 Realizar cromatografía de capa
fina para identificar lípidos
fosforilados y no fosforilados.
 Determinar la concentración del
colesterol de la yema de huevo,
por el método de Liebermann-
Burchard.

9. Procedimiento
 I. Extracción:
Disolventes (cloroformo:metanol)
Purificación (NaCl al 1%)
 Desecante (sulfato de sodio)
Separación de fosforilados y no forforilados
(acetona)

10. Procedimiento
II. Identificación por cromatografía:
- Eluyente (Cloroformo, metanol,
ácido acético, agua destilada)
REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
 Reacción con molibdato (grupos fosfatos).
 Reacción con ninhidrina (grupo amino)
 Reacción con Yodo (lípidos insaturados)

11. Identificación de Fosfatos
(NH4 )Mo7O24 + PO43-
(NH4)[PO4(Mo12O36)] + Agente reductor
Azul de molibdeno

12. Identificación con Ninhidrina

13. Procedimiento
III. Determinación de colesterol en la
yema de huevo
 La reacción de Lieberman-Burchard,
se lleva a cabo entre el colesterol o
esteroles y el anhídrido acético y ácido
sulfúrico concentrado, obteniendose un
color verde característico en la reacción.

14. Identificación de Colesterol
Deshidratación
Colesterol 3,5 colestadieno
Oxidación
3,5 colestadieno ác. Colestahexén sulfónico

15. Procedimiento

16. Resultados
A partir de las reacciones que se
llevan a cabo entre los reactivos
y los lípidos, identificar el tipo de
lípidos se obtuvo en el proceso
de separación.
 Obtener los valores de las
distancias del recorrido por los
lípidos y calcular los Rf.

17. Resultados.
 Construir una gráfica de absorbancia
contra concentración, e interpolar la
absorbancia del problema (extracto de
lípidos), para determinar la
concentración del colesterol.
 Calcular la concentración de colesterol
presente en la yema, considerando el
peso de la yema y las diluciones
realizadas.

18. Conclusiones
 Esta propuesta permite fácilitar la
identificación de los lípidos
fosforilados y no forforilados, así
como, la cuantificación del
colesterol.
 Los alumnos aplicarán las
metodologías de CCF y preparación
de curva estándar.

19. Conclusiones
 Debido a la importancia que tiene
actualmente en la dieta, el control del
consumo de colesterol, su
cuantificación en los alimentos, resulta
relevante.
 Además, con los recursos con que
contamos actualmente en el laboratorio
de BCT I, se satisfacen los
requerimientos para llevar a cabo dicha
propuesta

20. Conclusiones
 Sólo sería necesario aumentar
una sesión a la práctica de
lípidos para poder realizar la
propuesta.
 Esta metodología ya fue
realizada con alumnos y los
resultados fueron satisfactorios.

21. QFB Araceli García del Valle
QFI Leonor Aguilar Santelises