Este documento describe cómo un compuesto natural llamado THHY, extraído del aguacate, inhibe la replicación del virus del dengue (DENV) a través de la inducción de la vía de señalización NF-κB que media la expresión de interferón tipo I (IFN). Los experimentos mostraron que el THHY inhibió la replicación de DENV de manera dependiente de la dosis y el tiempo, y aumentó la fosforilación de NF-κB y la expresión de IFN. Esto sugiere que el THHY podría usarse como un tratamiento potencial contra el dengue

1. laura andrea genez leyva
facultad de medicina
tercer semestre
universidad pontificia bolivariana

2. Activation of the nuclear factor-κB (NF-
κB) signal pathway is considered as a
critical factor for stimulating type I IFN
responses against pathogen infection.
ifn

3. Persea americana Mill. (P. americana) belongs(BILONG to the family
Lauraceae, which is known as avocado and generally grows in tropical and
subtropical regions. The fruit, stem(STIM), and leaf(LIF) of avocado are
widely used in ethno-medicine. Particularly, the avocado fruit contains lots
of nutrients such as vitamin E, vitamin B, potassium and monosaturated
fatty acids, which have been reported to have several bioactive properties
such as antibacterial, antiviral, antioxidant, anti-atherosclerotic,
hepatoprotective, and other functions. The bioactive components of
avocado contain monoterpenoids, sesquiterpenoids, triterpenoids,
flavonoids, alkaloids, steroids, carotenoids and long-chain fatty alcohol
derivatives.
1,2,4-
trihydroxyheptadec-
16-ino (THHY)
inhibits DENV infection through
induction of NF-κB-mediated
antiviral IFN responses
avocado

4. OBJECTIVE
Prove that a natural product (2R,4R)-1,2,4-trihydroxyheptadec-16-yne (THHY),
extracted from avocado (Persea americana) fruit, can inhibit DENV-2
replication in a concentration-dependent manner and eficiently suppresses
replication of all DENV serotypes (1–4). We further reveal that the NF-κB-
mediated interferon antiviral response contributes to the inhibitory efect of
THHY on DENV replication

5. 1. Western blot:
Western Blot es una técnica analítica,
ampliamente utilizada, para el estudio de
proteínas. Este método, permite la detección de
una sola proteína dentro de una muestra
biológica. La especificidad de Western Blot se
logra mediante la utilización de un anticuerpo
que reconoce y se une a un epítopo único de la
proteína de interés. Con la técnica de Western
Blot se puede estimar el tamaño de una
proteína, confirmar la presencia de
modificaciones post-traduccionales como la
fosforilación, y ser utilizado para comparar
cuantitativamente los niveles de proteína
entre muestras.
métodos
● Se utilizó para analizar la
presencia de los los niveles de
proteína DENV infectadas con
THHY.
● Para determinar el estado de
fosforilación de NF κ B y sus
reguladores , es decir, para
verificar la activación del NF κ B
● Para analizar los niveles de
fosforilación de STAT1 y STAT2
con anti-STAT1 fosforilada
anticuerpos (P-STAT1) y STAT2 (P-
STAT2).

6. 2. transfección
la transfección consiste en la introducción de
material genético externo en las células
eucariotas mediante plásmidos u otras
herramientas.
Se utilizó para evaluar el control de la
señalización de interferón o la actividad
transcripcional luego de transfectar las células
con lo plásmidos pISRE-Luc. THHY aumento de
la actividad transcripcional ISRE de una
manera dependiente de la dosis

7. es una técnica de inmunoensayo en la cual
un antígeno inmovilizado se detecta
mediante un anticuerpo enlazado a una
enzima capaz de generar un producto
detectable, como cambio de color o algún
otro tipo.
examinar si el tratamiento THHY podría regular
positivamente los niveles IFN α tras la infección
DENV, para esto se estudiaron el ARN de células
infectadas con DENV-2, en el sobrenadante se midió
el nivel de proteína secretora de IFN α. Estos
resultados revelaron que THHY inhibe la
replicación DENV a través de la regulación de NF κ
B mediada expresión DEL IFN α.
3. Elisa

8. resultados ● Los datos indicaron que
THHY inhibió la
replicación DENV de una
manera tiempo
dependiente.
● la THHY también inhibió
la síntesis de proteínas
DENV-2 en comparación
con las células DENV
infectados no tratados
THHY, en el que la
ribavirina se servía
como control positivo.
la proteína no estructural NS2B
proteína DENV sirvió como un
indicador para representar
síntesis de proteínas virales.

9. la vía de señalización se considera como un factor crítico
para la estimulación de IFN. La fosforilación de IKK-α / β (P-
IKKα / β) e IκBα (P-IκBα) se determinó mediante
transferencia Western con anticuerpos NF-κB, IKK-α / β e
IκBα antifosforilados, respectivamente. El total de NF-κB
(NFκB), IKK-α / β (IKKα)
y los niveles de IKKβ) e IκBα (IκBα) se determinaron
mediante transferencia Western con anti-NF-κB, IKK-α / β, e
IκBα
anticuerpos, respectivamente.
Para confirmar aún más el papel de NF kB, se empleó CAPE
para inhibir NF kB en la presencia de infección DENV.

10. Para investigar si THHY puede inducir la STAT1 y la
fosforilación STAT2 en presencia de DENV, las células Con
infección por DENV-2 se incubaron con THHY a la
concentración indicada. Después de 3 días, la proteína
celular total se cosechó para examinar el nivel de fosfo-
STAT1 y fosfo-STAT2

11. Author statement agreement
Zhu, X. et al. Describe the process of
activation of NF κ B and how it
permits the expression of
genes with antiviral responses
through the activation of INF-1
Lu, YC, Chang, HS, Peng,
CF, Lin, CH y Chen
Avocado is known to be a
healthy fruit which contains
many phytochemicals with
high antioxidant activity
Morrison, J. Activation of these ISGs leads
to the inhibition of virus
replication

12. This type of research is important to find
new drugs that prevent the advance of
infectious diseases that affect millions of
people around the world each year in this
specific case of this article the dengue.
It's important because this studies allow
the discovery of new natural and
affordable products for the community
that will help counteract infectious
diseases with prevalece in tropical areas,
many of which doesn't have easy access to
health services
conclusions