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PRACTICA DE
LABORATORIO
ANATOMÍA
PATOLÓGICA
ANATOMÍA PATOLÓGICA
Etimología: La palabra
patología procede del
griego, y es el estudio
(logos) del sufrimiento o
daño (pathos).
Es uno de los pilares
fundamentales de la medicina
y una disciplina básica
imprescindible para médicos.
La interpretación de los
síntomas de las distintas
enfermedades o alteraciones
que se encuentran en la
exploración de los pacientes
exige el conocimiento de
todo el espectro de lesiones
que se presentan en cada uno
de los tejidos u órganos.
Comprende todos los aspectos
de la enfermedad,
fundamentalmente a nivel
morfológico. Estas
alteraciones son estudiadas
con diversos métodos, que
abarcan desde la patología
molecular hasta la patología
macroscópica, pasando por
todos los niveles y técnicas
de observación y estudio,
desde la histoquímica e
inmunohistoquímica hasta la
ultraestructura, la
microscopía óptica o la
simple visión ocular directa
(macroscópica).
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 La anatomía patológica general se ocupa del estudio de los fundamentos y
del desarrollo de los procesos de respuestas patológicas básicas, que van
desde la adaptación celular a las modificaciones del entorno, las lesiones y
la muerte celular, sus causas y sus consecuencias, los trastornos del
crecimiento de las células, de los tejidos y de los órganos, así como las
respuestas del individuo a las diversas lesiones causadas por agentes
externos e internos y de los mecanismos de reparación de esas lesiones.
Según la patología existen tres causas básicas que originan las
enfermedades que son:
 Inflamación son las enfermedades que terminan en -itis, como apendicitis.
Degenerativas son las enfermedades que acaban en -osis, como artrosis.
Crecimiento celular descontrolado Son las enfermedades que acaban en -
oma, como melanoma.
 La anatomía patológica especial se encarga del estudio de las respuestas
específicas de cada tejido u órgano.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 Los cuatro aspectos de una enfermedad, que forman el núcleo de la
patología son:
 Etiología: Son las causas de la enfermedad.
 Patogenia: Son los mecanismos por los que se desarrolla la enfermedad.
 Cambios morfológicos: Son las alteraciones estructurales que se producen
en las células y órganos.
 Clínica: Son las consecuencias funcionales de los cambios morfológicos.
 Los patólogos o especialistas en anatomía patológica, se encargan sobre
todo del estudio de los cambios morfológicos de las enfermedades.
 Hay enfermedades sine materia en las que no se puede objetivar una clara
alteración morfológica, como son la mayoría de las enfermedades
psiquiátricas y muchos trastornos funcionales como el colon irritable.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
EXAMEN ANATOMOPATOLÓGICO
1.- BIOPSIA.
2.- PIEZA QUIRÚRGICA.
3.- AUTOPSIA.
4.- CITOLÓGICO.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
Muerte celular. es un proceso fisiológico-patológico que conduce a la eliminación celular y que tiene
una función esencial en la homeostasis de los tejidos y en los estados patológicos.
La muerte celular pode ocurrir por:
Necrosis.
Apoptosis.
A) Necrosis: es un proceso pasivo que no requiere una activa participación de la célula y acontece
cuando la célula se encuentra ante condiciones extremas no fisiológicas. El origen de todos los
desórdenes necróticos es un desequilibrio osmótico. La permeabilidad de la membrana plasmática se
altera, produciéndose entrada del agua, por lo que se produce un aumento de volumen.
La cromatina nuclear forma pequeños agregados, el RE y las mitocondrias se dilatan por la entrada de
agua. Los ribosomas se desorganizan y los lisosomas se rompen.
Como etapa final, los orgánulos estallan, la membrana plasmática y la envoltura nuclear se segrega y
el contenido intracelular se vierte al exterior promoviendo una respuesta inflamatoria.
b) Apóptosis: el término apoptosis se utiliza cómo similar a la muerte celular programada, que sería
un proceso de suicidio celular específico que implica un encogimiento y condensación de la célula. El
cito-esqueleto se colapsa, la envoltura nuclear se rompe y el ADN nuclear se fragmenta. La superficie
celular se altera, presentando propiedades que provocan que la célula moribunda sea fagocitada
inmediatamente, de manera que no se produce ningún vertido del contenido celular
ANATOMÍA PATOLÓGICA
• Técnica histológica es conjunto de operaciones a que se
somete una materia organizada, a fin de posibilitar su
estudio al microscopio.
• El examen al microscopio se hace generalmente por luz
transmitida, lo que significa que la luz debe "atravesar" el
objeto a examinar para llegar, después de haber pasado
por las distintas lentes del microscopio. Por esa causa,
debe ser reducido a láminas muy delgadas y
transparentes.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
• FIJACIÓN tiene por objeto matar las células y
conservarlas, hasta donde sea posible, en el estado en
que se encontraban durante la vida. Por lo tanto es un
método histológico destinado a obtener preparados
duraderos que conservan la estructura morfológica y
química de las células y tejidos al estado vivo y que
permite realizar, posteriormente, los procedimientos de
coloración o de identificación que facilitan el completo
conocimiento de su constitución íntima.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 Cualidades que debe tener un fijador:
1. Actuar con rapidez, matando y fijando a las células antes de que
aparezcan los fenómenos agónicos o post-mortem (autólisis, desintegración,
etc.).
2. Poseer alto poder de penetración para asegurar la fijación correcta hasta
en las capas profundas de la pieza a fijar.
3. Conservar, en lo posible, los detalles estructurales que presentaban in
vivo.
4. Permitir o favorecer el empleo de los procedimientos necesarios para su
observación ulterior (ejecución de cortes, coloración, etc.).
5. Impedir la desaparición de los elementos solubles durante la fijación o
después de ella.
6. No provocar o impedir la producción de estructuras artificiales.
7. No retraer excesivamente los tejidos ni volverlos friables o quebradizos.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 Manera de actuar de los fijadores: Varía con la
composición o naturaleza de los mismos: coagulando las
proteínas sin combinarse con ellas (alcohol, ácido pícrico,
yodo, calor), formando combinaciones químicas con las
sustancias orgánicas (ácido crómico y sus sales), o
reduciéndose en contacto con las mismas y originando en
su seno un precipitado sumamente fino (ácido ósmico,
bicloruro de mercurio, cloruro de oro).
 La mayor parte de los fijadores actúan como oxidantes,
favoreciendo así la coloración posterior de los tejidos
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 FIJADORES QUÍMICOS: Son los más utilizados; pueden ser fijadores
simples, constituidos por una sola sustancia química, y fijadores compuestos
o mezclas fijadoras cuando varias sustancias intervienen en su constitución.
 FIJADORES SIMPLES:
a) Formol al 10%, es el más usado. Su empleo es aconsejable en todos los
casos en que no se disponga de un fijador especial, principalmente cuando
se trata de fijar órganos o tejidos para estudios histológicos topográficos.
b) Alcohol etílico absoluto o de 96%, se usa generalmente en microquímica.
c) Alcohol metílico, se lo emplea con frecuencia para fijar frotis desecados
(sangre, médula ósea, ganglio, bazo, líquidos de punción, etc.).
d) Ácido ósmico al 1 ó 2%, es poco penetrante pero enérgico, conserva muy
bien estructuras celulares.
e) Bicromato de potasio al 3-5%.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 FIJADORES COMPUESTOS: En su composición intervienen un número variable de fijadores simples
racionalmente elegidos con el fin de completar la acción de cada uno de ellos o atenuar sus defectos.
a) Líquido de Fleming, mezcla cromo-osmio-acética.
b) Líquido de Zenker, mezcla bicromato-sublimado-acética.
c) Líquido de Helly, mezcla Zenker-formol.
d) Líquido de Bouin, mezcla picro-formos-acética.
e) Liquido de Duboscq-Brasil, o Bouin alcohólico.
 FIJADORES FÍSICOS:
1. Desecación.
2. Calor seco.
3. Calor húmedo.
4. Frío.
5. Congelación y desecación.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 DESHIDRATACIÓN E INCLUSIÓN EN PARAFINA
 Deshidratación; Las piezas al ser retiradas del fijador, o después de haberlas
lavado, están hidratadas; impidiendo que sean penetradas por la parafina.
Por lo tanto, se debe deshidratar los tejidos sumergiéndolos en líquidos
anhidros, ávidos de agua. Para evitar alteraciones provocadas por una
deshidratación brusca, se aconseja proceder escalonadamente utilizando,
preferentemente, alcohol etílico de graduación creciente.
 Impregnación por un disolvente de la parafina (aclaración); Las piezas
perfectamente deshidratadas se sumergen en el disolvente, xilol o toluol . Al
agregar el xilol si se pone blanco-lechoso es que la deshidratación no ha
sido bien lograda y debemos repetir el baño de alcohol absoluto
cerciorándonos que realmente lo sea.
 Penetración de la parafina: Se sumergen las piezas en parafina (56-58º de
punto de fusión), mantenida líquida en la estufa a no más de 62ºC. por 1 a 2
horas.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 FORMACIÓN DE BLOQUES: En moldes de metal se vierte la
parafina fundida, se colocan las piezas orientándolas y luego se
pone el molde a enfriar. A los 15-30 minutos la parafina se habrá
solidificado completamente, para realizar los cortes con el
micrótomo.
 OBTENCIÓN DE CORTES: El objeto de la inclusión es hacer
posible la reducción del tejido a cortes lo suficientemente
delgados como para permitir el paso de la luz para examinarlo al
microscopio. Los micrótomos son instrumentos de gran
precisión que nos proporcionan cortes delgados parejos y de
espesor graduable. Los cortes más corrientes son los de 3-5
micras. Existen varios tipos de micrótomos: más usados son el
de congelación o crióstato y el de rotación.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 TINCIÓN O COLORACIÓN: Es el proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por una sustancia colorante, sin perder el
color cuando es lavado con el disolvente utilizado al preparar la solución colorante.
 Clasificación de los colorantes: Según su origen se clasifican en:
 COLORANTES NATURALES:
- Animales (carmín)
- Vegetales (hematoxilina, orceína, azafrán)
 COLORANTES ARTIFICIALES O SINTÉTICOS (COLORES DE ANILINA):
- Ácidos: sales cuya base es incolora y su ácido es coloreado (eosina o eosinato de sodio). Son colorantes citoplasmáticos.
- Básicos: sales cuya base es coloreada y el ácido es incoloro (azul de metileno o clorhidrato de azul de metileno). Son
colorantes nucleares.
- Neutros: sales en las que tanto el ácido como la base son coloreados. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro.
- Indiferentes: no forman sales. Tiñen aquellas sustancias que tienen un poder disolvente superior al del líquido que ha
servido para preparar la solución colorante (Sudán lll, rojo escarlata).
 Por otro lado, las coloraciones pueden ser:
- Ortocromáticas: los tejidos adquieren un color igual al de la solución colorante empleada.
- Metacromáticas: una sustancia o un componente celular se tiñe con un color diferente al del colorante empleado.
ANATOMÍA PATOLÓGICA
 HEMATOXILINA: Es un colorante vegetal.
- Para ser utilizada debe ser oxidada
previamente. Los agentes oxidantes pueden
ser: el aire u oxidantes artificiales
(óxido de mercurio, permanganato de
potasio, dicromato potásico, etc.). Es un
colorante directo.
 EOSINA: Es un colorante artificial (se
trata de derivados hidroxixanténicos
halogenados con tres grupos arilo).
Presenta autofluorescencia espontánea. Se
la emplea tanto en soluciones acuosas como
alcohólicas.
 Para colorear se emplea generalmente un
tren de tinción
ANATOMÍA PATOLÓGICA
• SOLICITUD.
• DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA.
• INCLUSIÓN DE LA PIEZA.
• PROCESO DE LA PIEZA.
• DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICO.
• DIAGNÓSTICO FINAL.
Muchas
Gracias!

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TECNICAS DE TINCION.........................................

  • 2. ANATOMÍA PATOLÓGICA Etimología: La palabra patología procede del griego, y es el estudio (logos) del sufrimiento o daño (pathos). Es uno de los pilares fundamentales de la medicina y una disciplina básica imprescindible para médicos. La interpretación de los síntomas de las distintas enfermedades o alteraciones que se encuentran en la exploración de los pacientes exige el conocimiento de todo el espectro de lesiones que se presentan en cada uno de los tejidos u órganos. Comprende todos los aspectos de la enfermedad, fundamentalmente a nivel morfológico. Estas alteraciones son estudiadas con diversos métodos, que abarcan desde la patología molecular hasta la patología macroscópica, pasando por todos los niveles y técnicas de observación y estudio, desde la histoquímica e inmunohistoquímica hasta la ultraestructura, la microscopía óptica o la simple visión ocular directa (macroscópica).
  • 3. ANATOMÍA PATOLÓGICA  La anatomía patológica general se ocupa del estudio de los fundamentos y del desarrollo de los procesos de respuestas patológicas básicas, que van desde la adaptación celular a las modificaciones del entorno, las lesiones y la muerte celular, sus causas y sus consecuencias, los trastornos del crecimiento de las células, de los tejidos y de los órganos, así como las respuestas del individuo a las diversas lesiones causadas por agentes externos e internos y de los mecanismos de reparación de esas lesiones. Según la patología existen tres causas básicas que originan las enfermedades que son:  Inflamación son las enfermedades que terminan en -itis, como apendicitis. Degenerativas son las enfermedades que acaban en -osis, como artrosis. Crecimiento celular descontrolado Son las enfermedades que acaban en - oma, como melanoma.  La anatomía patológica especial se encarga del estudio de las respuestas específicas de cada tejido u órgano.
  • 4. ANATOMÍA PATOLÓGICA  Los cuatro aspectos de una enfermedad, que forman el núcleo de la patología son:  Etiología: Son las causas de la enfermedad.  Patogenia: Son los mecanismos por los que se desarrolla la enfermedad.  Cambios morfológicos: Son las alteraciones estructurales que se producen en las células y órganos.  Clínica: Son las consecuencias funcionales de los cambios morfológicos.  Los patólogos o especialistas en anatomía patológica, se encargan sobre todo del estudio de los cambios morfológicos de las enfermedades.  Hay enfermedades sine materia en las que no se puede objetivar una clara alteración morfológica, como son la mayoría de las enfermedades psiquiátricas y muchos trastornos funcionales como el colon irritable.
  • 5. ANATOMÍA PATOLÓGICA EXAMEN ANATOMOPATOLÓGICO 1.- BIOPSIA. 2.- PIEZA QUIRÚRGICA. 3.- AUTOPSIA. 4.- CITOLÓGICO.
  • 6.
  • 7. ANATOMÍA PATOLÓGICA Muerte celular. es un proceso fisiológico-patológico que conduce a la eliminación celular y que tiene una función esencial en la homeostasis de los tejidos y en los estados patológicos. La muerte celular pode ocurrir por: Necrosis. Apoptosis. A) Necrosis: es un proceso pasivo que no requiere una activa participación de la célula y acontece cuando la célula se encuentra ante condiciones extremas no fisiológicas. El origen de todos los desórdenes necróticos es un desequilibrio osmótico. La permeabilidad de la membrana plasmática se altera, produciéndose entrada del agua, por lo que se produce un aumento de volumen. La cromatina nuclear forma pequeños agregados, el RE y las mitocondrias se dilatan por la entrada de agua. Los ribosomas se desorganizan y los lisosomas se rompen. Como etapa final, los orgánulos estallan, la membrana plasmática y la envoltura nuclear se segrega y el contenido intracelular se vierte al exterior promoviendo una respuesta inflamatoria. b) Apóptosis: el término apoptosis se utiliza cómo similar a la muerte celular programada, que sería un proceso de suicidio celular específico que implica un encogimiento y condensación de la célula. El cito-esqueleto se colapsa, la envoltura nuclear se rompe y el ADN nuclear se fragmenta. La superficie celular se altera, presentando propiedades que provocan que la célula moribunda sea fagocitada inmediatamente, de manera que no se produce ningún vertido del contenido celular
  • 8. ANATOMÍA PATOLÓGICA • Técnica histológica es conjunto de operaciones a que se somete una materia organizada, a fin de posibilitar su estudio al microscopio. • El examen al microscopio se hace generalmente por luz transmitida, lo que significa que la luz debe "atravesar" el objeto a examinar para llegar, después de haber pasado por las distintas lentes del microscopio. Por esa causa, debe ser reducido a láminas muy delgadas y transparentes.
  • 9. ANATOMÍA PATOLÓGICA • FIJACIÓN tiene por objeto matar las células y conservarlas, hasta donde sea posible, en el estado en que se encontraban durante la vida. Por lo tanto es un método histológico destinado a obtener preparados duraderos que conservan la estructura morfológica y química de las células y tejidos al estado vivo y que permite realizar, posteriormente, los procedimientos de coloración o de identificación que facilitan el completo conocimiento de su constitución íntima.
  • 10.
  • 11. ANATOMÍA PATOLÓGICA  Cualidades que debe tener un fijador: 1. Actuar con rapidez, matando y fijando a las células antes de que aparezcan los fenómenos agónicos o post-mortem (autólisis, desintegración, etc.). 2. Poseer alto poder de penetración para asegurar la fijación correcta hasta en las capas profundas de la pieza a fijar. 3. Conservar, en lo posible, los detalles estructurales que presentaban in vivo. 4. Permitir o favorecer el empleo de los procedimientos necesarios para su observación ulterior (ejecución de cortes, coloración, etc.). 5. Impedir la desaparición de los elementos solubles durante la fijación o después de ella. 6. No provocar o impedir la producción de estructuras artificiales. 7. No retraer excesivamente los tejidos ni volverlos friables o quebradizos.
  • 12. ANATOMÍA PATOLÓGICA  Manera de actuar de los fijadores: Varía con la composición o naturaleza de los mismos: coagulando las proteínas sin combinarse con ellas (alcohol, ácido pícrico, yodo, calor), formando combinaciones químicas con las sustancias orgánicas (ácido crómico y sus sales), o reduciéndose en contacto con las mismas y originando en su seno un precipitado sumamente fino (ácido ósmico, bicloruro de mercurio, cloruro de oro).  La mayor parte de los fijadores actúan como oxidantes, favoreciendo así la coloración posterior de los tejidos
  • 13. ANATOMÍA PATOLÓGICA  FIJADORES QUÍMICOS: Son los más utilizados; pueden ser fijadores simples, constituidos por una sola sustancia química, y fijadores compuestos o mezclas fijadoras cuando varias sustancias intervienen en su constitución.  FIJADORES SIMPLES: a) Formol al 10%, es el más usado. Su empleo es aconsejable en todos los casos en que no se disponga de un fijador especial, principalmente cuando se trata de fijar órganos o tejidos para estudios histológicos topográficos. b) Alcohol etílico absoluto o de 96%, se usa generalmente en microquímica. c) Alcohol metílico, se lo emplea con frecuencia para fijar frotis desecados (sangre, médula ósea, ganglio, bazo, líquidos de punción, etc.). d) Ácido ósmico al 1 ó 2%, es poco penetrante pero enérgico, conserva muy bien estructuras celulares. e) Bicromato de potasio al 3-5%.
  • 14. ANATOMÍA PATOLÓGICA  FIJADORES COMPUESTOS: En su composición intervienen un número variable de fijadores simples racionalmente elegidos con el fin de completar la acción de cada uno de ellos o atenuar sus defectos. a) Líquido de Fleming, mezcla cromo-osmio-acética. b) Líquido de Zenker, mezcla bicromato-sublimado-acética. c) Líquido de Helly, mezcla Zenker-formol. d) Líquido de Bouin, mezcla picro-formos-acética. e) Liquido de Duboscq-Brasil, o Bouin alcohólico.  FIJADORES FÍSICOS: 1. Desecación. 2. Calor seco. 3. Calor húmedo. 4. Frío. 5. Congelación y desecación.
  • 15. ANATOMÍA PATOLÓGICA  DESHIDRATACIÓN E INCLUSIÓN EN PARAFINA  Deshidratación; Las piezas al ser retiradas del fijador, o después de haberlas lavado, están hidratadas; impidiendo que sean penetradas por la parafina. Por lo tanto, se debe deshidratar los tejidos sumergiéndolos en líquidos anhidros, ávidos de agua. Para evitar alteraciones provocadas por una deshidratación brusca, se aconseja proceder escalonadamente utilizando, preferentemente, alcohol etílico de graduación creciente.  Impregnación por un disolvente de la parafina (aclaración); Las piezas perfectamente deshidratadas se sumergen en el disolvente, xilol o toluol . Al agregar el xilol si se pone blanco-lechoso es que la deshidratación no ha sido bien lograda y debemos repetir el baño de alcohol absoluto cerciorándonos que realmente lo sea.  Penetración de la parafina: Se sumergen las piezas en parafina (56-58º de punto de fusión), mantenida líquida en la estufa a no más de 62ºC. por 1 a 2 horas.
  • 16.
  • 17. ANATOMÍA PATOLÓGICA  FORMACIÓN DE BLOQUES: En moldes de metal se vierte la parafina fundida, se colocan las piezas orientándolas y luego se pone el molde a enfriar. A los 15-30 minutos la parafina se habrá solidificado completamente, para realizar los cortes con el micrótomo.  OBTENCIÓN DE CORTES: El objeto de la inclusión es hacer posible la reducción del tejido a cortes lo suficientemente delgados como para permitir el paso de la luz para examinarlo al microscopio. Los micrótomos son instrumentos de gran precisión que nos proporcionan cortes delgados parejos y de espesor graduable. Los cortes más corrientes son los de 3-5 micras. Existen varios tipos de micrótomos: más usados son el de congelación o crióstato y el de rotación.
  • 18.
  • 19.
  • 20. ANATOMÍA PATOLÓGICA  TINCIÓN O COLORACIÓN: Es el proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por una sustancia colorante, sin perder el color cuando es lavado con el disolvente utilizado al preparar la solución colorante.  Clasificación de los colorantes: Según su origen se clasifican en:  COLORANTES NATURALES: - Animales (carmín) - Vegetales (hematoxilina, orceína, azafrán)  COLORANTES ARTIFICIALES O SINTÉTICOS (COLORES DE ANILINA): - Ácidos: sales cuya base es incolora y su ácido es coloreado (eosina o eosinato de sodio). Son colorantes citoplasmáticos. - Básicos: sales cuya base es coloreada y el ácido es incoloro (azul de metileno o clorhidrato de azul de metileno). Son colorantes nucleares. - Neutros: sales en las que tanto el ácido como la base son coloreados. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. - Indiferentes: no forman sales. Tiñen aquellas sustancias que tienen un poder disolvente superior al del líquido que ha servido para preparar la solución colorante (Sudán lll, rojo escarlata).  Por otro lado, las coloraciones pueden ser: - Ortocromáticas: los tejidos adquieren un color igual al de la solución colorante empleada. - Metacromáticas: una sustancia o un componente celular se tiñe con un color diferente al del colorante empleado.
  • 21. ANATOMÍA PATOLÓGICA  HEMATOXILINA: Es un colorante vegetal. - Para ser utilizada debe ser oxidada previamente. Los agentes oxidantes pueden ser: el aire u oxidantes artificiales (óxido de mercurio, permanganato de potasio, dicromato potásico, etc.). Es un colorante directo.  EOSINA: Es un colorante artificial (se trata de derivados hidroxixanténicos halogenados con tres grupos arilo). Presenta autofluorescencia espontánea. Se la emplea tanto en soluciones acuosas como alcohólicas.  Para colorear se emplea generalmente un tren de tinción
  • 22.
  • 23. ANATOMÍA PATOLÓGICA • SOLICITUD. • DESCRIPCIÓN MACROSCÓPICA. • INCLUSIÓN DE LA PIEZA. • PROCESO DE LA PIEZA. • DESCRIPCIÓN MICROSCÓPICO. • DIAGNÓSTICO FINAL.