3. Marcello Malpighi fue el fundador de la histología
y su nombre está ligado a varias estructuras
histológicas
En 1665 Hooke descubrió que el tejido vegetal
está compuesto por pequeñas cámaras o celdillas,
a las que denominó células (lat. Cella, pequeña
habitación, celda o cámara)
Schwann teoría: Se reconoce que la célula es el
elemento fundamental del organismo y que las
plantas y los animales son agrupaciones de estas
unidades vivas potencialmente independientes
4. Una importante generalización fue la concepción de que sólo existen 4 tejidos
animales fundamentales:
Tejido epitelial
Tejido conectivo
Tejido muscular
Tejido nervioso
Cada uno de los cuales
presenta gran cantidad de
subtipos derivados, por
ejemplo sangre y tejidos
linfoides
5.
6.
7.
8.
9.
10. Se forman tejidos cuando las células, por lo general de distinto tipo
(especialización), se agrupan para llevar a cabo determinadas funciones
Los órganos son unidades funcionales mayores compuestas por distintos tipos de
tejido Ej: Hígado y Bazo
Los sistemas orgánicos se definen como grupos celulares con funciones
relacionadas Ej: El sistema Respiratorio está compuesto por nariz, faringe, laringe,
tráquea, bronquios y pulmones
Los sistemas difusos se definen como grupos celulares con funciones
relacionadas pero de localización difusa en varios órganos distintos Ej. Sistema
Inmunitario
11.
12. Métodos histológicos
Análisis microscópico
Con el microscopio óptico común, las
células y los tejidos no teñidos se ven
como carentes de color y transparentes
porque no presentan suficiente contraste.
Con la ayuda de tinciones histológicas, se
logra una absorción diferencial de la .luz,
por lo que se visualizan las distintas
estructuras
14. Microscopio de interferencia
Se basa en las diferencias de fase producidas por el paso de la luz a través de distintas
estructuras del objeto
Microscopio de fluorescencia
■ Determinadas sustancias tienen capacidad de presentar fluorescencia, es decir, al ser
iluminadas con una longitud de onda irradian luz de otra longitud de onda (color)
15. Microscopio de barrido confocal
El preparado se ilumina mediante un
rayo láser que barre todos los puntos
del plano focal
16. Microscopio electrónico
Se reemplaza la luz visible por un haz de electrones de longitud de onda
Microscopio electrónico de barrido
■ En el microscopio de barrido, los electrones no atraviesan el objeto; la imagen se
forma indirectamente, por captación puntual de detalles en la superficie del
preparado
17.
18. Métodos de observación directa de células
y tejidos vivos
Cultivo de células y tejidos
El cultivo de tejido se clasifica en tres categorías:
1) el cultivo de células comprende el de células aisladas, no organizadas en un
tejido. Las células pueden transportarse a frascos nuevos con medio de cultivo a
medida que crece su número.
19. 2) Por lo general, el cultivo de tejido comprende la transferencia de un trozo de
tejido embrionario (gr. embryon, lo que crece, lo que aumenta de tamaño) o
explante a un medio de cultivo. Durante el cultivo crecen excrecencias celulares,
que suelen ser de tipo conectivo, mientras que las células especializadas del
órgano permanecen en el explante, donde mantienen algunas de sus funciones
características.
20. 3) El cultivo de órganos comprende el explante de órganos embrionarios o
maduros (totalmente desarrollados), ya sea como órganos completos o sus partes.
Se intenta mantener la estructura del órgano y sus funciones normales, además de
su posible evolución ulterior
21. Manipulación experimental de células vivas
Tinción vital y supravital
Algunos colorantes relativamente inocuos son captados en forma selectiva por
determinadas células vivas.
Para la tinción vital se inyecta el colorante en el animal vivo. Para la tinción
supravital se agrega el colorante a las células o el tejido vivo después de su
extracción
22. El azul tripán y el carmín litinado se
componen de partículas finas y han
tenido gran importancia para el
estudio de la fagocitosis, es decir, la
forma en que determinadas células
captan partículas del medio
Tinción supravital
de macrófagos de
tejido conectivo
laxo, por adición
de carmín litinado
a una muestra de
tejido vivo. Las
partículas rojas de
carmín litinado
han sido
fagocitadas por
los macrófagos.
23. El rojo neutro y el verde lana se utilizan para el estudio de los glóbulos blancos. El
verde Jano tiñe selectivamente las mitocondrias y el rojo neutro se usa para
identificar los distintos subtipos de leucocitos
24. Métodos de fraccionamiento celular
Mediante los métodos de fraccionamiento celular, es posible separar los distintos
componentes celulares y al mismo tiempo mantener sus funciones ; por lo tanto,
los métodos de fraccionamiento celular han jugado un importante papel en la
resolución de la organización funcional de la célula.
25.
26. Preparación e investigación de tejidos
muertos
Se lo realiza mediante cortes en secciones muy delgadas, denominados cortes
histológicos. Después de la tinción con distintos colorantes, se observan los cortes
con el microscopio óptico, dado que el contraste creado por la tinción permite
diferenciar los componentes.
Preparación de tejidos para microscopia óptica
Fijadores
Inclusión y corte
Deshidratar
Tinción
27. Preparación de tejidos para microscopia
electrónica
Fijación
Contrastado
Deshidrata
Tinción: Azul de Toluidina
Congelación y fractura (criofractura)
28. Métodos histoquímicos
Los métodos histoquímicos aprovechan las acciones físicas y químicas sobre los
preparados histológicos para determinar la localización de sustancias químicas en
las células y los tejidos.
29. Acidofilia y basofilia
Se denomina acidofilia (gr./ilein, amar) a la capacidad de tinción con los colorantes
ácidos y basofilia, a la capacidad de tinción con los colorantes básicos
En el lenguaje histoquímico, un colorante ácido (aniónico) tiene capacidad para
formar un enlace electrostático (iónico) con un grupo tisular con carga positiva.
En cambio, un colorante básico (catiónico) puede formar un enlace electrostático
con un grupo tisular con carga negativa
30. Metacromasia
Cuando se tiñen ciertos componentes tisulares, por ejemplo la matriz cartilaginosa,
con el colorante azul de toluidina, se modifica el color azul original a púrpura o
rojo violáceo por unión con el tejido. Esta variación cromática se denomina
metacromasia (gr. meta, variac ión; kroma , color) y los colorantes capaces de sufrir
esta transformación se denominan metacromáticos.
31. Determinación histoquímica de lípidos
Después de la fijación de los
lípidos con formol, se cortan
secciones congeladas para
evitar la extracción de los
lípidos mediante solventes
orgánicos.
Para la demostración
histoquímica, a menudo se
utilizan los colorantes
denominados Sudán.
Son casi insolubles en agua
pero solubles en lípidos, por
lo que se utilizan disueltos
en alcohol diluido, que no
disuelve las grasas.
Los colorantes Sudán tiñen
con intensidad los
triacilgliceroles, por ejemplo,
por tinción de los adipocitos
con rojo Sudán.
El negro Sudán se utiliza en
la tinción de las vainas de
mielina de las fibras
nerviosas, ricas en lípidos.
32. Determinación histoquímica de enzimas
Las enzimas son catalizadores biológicos que intervienen en casi todas las
reacciones químicas celulares
Las sustancias que son escindidas o afectadas de alguna manera por las enzimas se
denominan sustratos. Las enzimas se caracterizan por la especificidad de sustrato.
Así, en muchos casos una enzima actúa sólo sobre un único sustrato.
33. Métodos inmunohistoquímicos
El organismo está en condiciones de reaccionar ante sustancias extrañas, los
antígenos, y formar anticuerpos específicos que se unen con éstos.
Los anticuerpos son proteínas producidas por las denominadas células plasmáticas
y circulan por la linfa y la sangre.
Las células productoras de anticuerpos pertenecen al sistema inmunitario del
organismo, que protege al individuo contra las macromoléculas extrañas que
intentan ingresar, por ejemplo, como componentes de bacterias o virus.
Así, los anticuerpos son un eslabón importante en la defensa del organismo contra
las enfermedades infecciosas
34. Problemas en la interpretación de cortes
de tejido
Artefacto
1. Hecho
por la
mano del
hombre
2. Designa
estructuras del
preparado que
no existen en
el tejido vivo
3. Pero que
aparecen
artificialmente
durante el
procedimiento
de preparación.
35. Retracción
• Se presenta en los tejidos como hendiduras u orificios
vacíos y sin estructuras (no confundir con los espacios
vacíos naturales que presenta una cubierta endotelial hacia
la luz, p. ej., los vasos sanguíneos).
Precipitados
• Se detectan como cristales coloreados, a menudo ubicados
por encima del corte
Plegamientos
• Pueden formarse en el momento de la sección o durante el
posterior procesamiento de los delgados cortes
37. Funciones
Protege contra el daño
mecánico
Regula la temperatura
(sudoración),
Tiene importancia
sensitiva, puesto que
posee terminaciones
nerviosas del dolor.
En la mayoría de los casos
su función es de
absorción o de secreción,
pero en algunos sitios
sólo actúa como barrera.
38. Clasificación de los epitelios
Se clasifican en distintos tipos sobre la base de la cantidad de capas celulares y la forma de las
células de la capa más superficial.
39. Denominación por capas
Si sólo hay una capa de células
en el epitelio
Se denomina simple
Si hay dos capas o más Se denomina estratificado
De acuerdo con su altura
Cúbicas o cilíndricas
Planas
40. Como alternativa, a menudo se usan las denominaciones
Luminal (lat. fumen, luz; por lo que luminal significa
orientado hacia la luz o la cavidad de la estructura hueca)
Abluminal, respectivamente, cuando se habla del
revestimiento epitelial de un órgano hueco, por ejemplo,
la superficie interna del intestino o un vaso sanguíneo
En la descripción de las células se utilizan las designaciones
Pical: Superficies celulares orientadas hacia el espacio
libre
Basal: Superficies celulares orientadas hacia membrana
basal
Por lo general, las células epiteliales presentan una clara
polaridad
41. Epitelio simple plano
Está compuesto de células
planas achatadas
El núcleo es oval y aplanado
y se encuentra en el centro
de la célula, donde en
ocasiones forma una
protuberancia en la superficie
celular.
42. Epitelio simple cúbico
Las células son casi cuadradas
Los núcleos son esféricos y de
ubicación central
Tapiza superficies de
secreción (glándula tiroides),
de excreción (conductos de
algunas glándulas exocrinas),
de protección (superficie del
ovario y el epitelio
pigmentado de la retina)
De absorción/excreción
(túbulos renales y plexos
coroideos), y respiratorias
(bronquios pulmonares).
43. Epitelio simple cilíndrico
Aquí las células son
columnares, dado que su
altura varía desde algo
mayor que las cúbicas
hasta muy altas
Por lo general, los núcleos
son ovalados y se ubican
aproximadamente a la
misma altura, con
frecuencia más cerca de la
base de las células.
El epitelio simple cilíndrico
recubre la superficie
interna del tubo digestivo
desde el cardias hasta el
ano
44. Epitelio seudoestratificado cilíndrico
En este tipo de
epitelio, todas las
células están
apoyadas sobre la
membrana basal,
pero no todas
llegan hasta la
superficie libre
Las células que
alcanzan la
superficie son
cilíndricas pero
afinadas hacia la
membrana basal.
El núcleo se
encuentra en la
parte más ancha de
ambos tipos
celulares, por lo que
los núcleos se
observan en
distintos niveles
45. En consecuencia, el epitelio
parece estratificado sin serlo
y se denomina
seudoestratificado. El
nombre epitelio
seudoestratificado cilíndrico
se refiere a que las hileras de
núcleos se ubican en varios
niveles
46. Epitelio estratificado plano
El número de estratos celulares
es muy variado. pero por lo
general la capa de epitelio es
gruesa
La capa más cercana a la
membrana basal se compone
de una hilera de células cúbicas
altas a cilíndricas.
Después siguen varias capas de
células poliédricas irregulares. A
medida que las células se
acercan a la superficie libre, se
hacen más planas hasta ser
escamosas. Estas células planas
externas confieren el nombre al
epitelio estratificado plano.
Forma la epidermis y recubre
también la cavidad bucal y el
esófago
48. Epitelio estratificado cilíndrico
El epitelio estratificado cilíndrico es poco frecuente , pero se encuentra, por
ejemplo, en los conductos excretores de ciertas glándulas de gran tamaño.
49. Epitelio de transición (urotelio o
uroepitelio)
Recubre los órganos huecos que sufren grandes variaciones de
volumen.
En estado contraído se distinguen muchas capas celulares, de las
cuales las más basales tienen forma cúbica o cilíndrica. Después
siguen varias capas de células poliédricas, que terminan con una
capa superficial de células grandes de superficie libre convexa
característica.
En estado dilatado, es decir, cuando el órgano hueco está estirado,
se modifica la distribución de las células, que se adaptan a la
variación de la superficie; por lo general, sólo se distinguen una o
dos capas de células cúbicas recubiertas por una capa superficial de
células cúbicas bajas grandes o casi planas ("células en paraguas").
El epitelio de transición sólo se encuentra en las vías urinarias, por
ejemplo la vejiga, por lo que a menudo se denomina urotelio.
El epitelio de
transición evita el
paso de agua,
iones y moléculas
entre la orina y los
tejidos
Notas del editor
Tal como se mencionó antes, los tejidos no coloreados producen muy escaso contraste, dado que no absorben cantidades importantes de luz. Sin embargo, producen cierto retraso en las longitudes de onda, que depende de la "densidad óptica" variable de los tejidos, es decir, los distintos índices de refracción. Este retraso variable de la luz ocasiona cierto desfasaje entre los tejidos. Mediante el microscopio de contraste de fase, es posible transformar estas diferencias de fase, no visibles a simple vista, en diferencias de amplitud, es decir, que las diferencias de refracción entre los componentes del tejido se transforman en diferencias de intensidad, que pueden ser captadas por el ojo humano. De esta manera, es posible transformar en visibles los componentes de las células vivas que, de otro modo, sólo se observan en tejidos muertos y teñidos
En el microscopio de fl uorescencia se ilumina el preparado con luz de la longitud de onda capaz de activar el colorante flu orescente empleado.
De esta forma, las estructuras aparecen como f uentes luminosas, por lo que es posible visualizar estructuras de dimensiones mucho más pequeñas que el poder de resolución del microscopio.
Fig. 2-5. MES confocal de endocitosis mediada por receptor (megali na) de proteína fijadora de vitamina O (OBP) en el túbulo proximal renal. La megali na se demuestra con un anticuerpo flu orescente verde, OBP con un anticue rpo fluorescente azul, y el colágeno tipo IV de la lámi na basal con un anticuerpo flu orescente rojo. La coloración blanca granular marca la ubicación conj unta de megalina y OBP. Barra: 10 JJm. (Según M. Nielsen, E. 1. Christensen y C.D. Park).
Las células se separan mediante tratamiento cuidadoso con enzimas digestivas como tripsina y colagenasa (degradan el material extracelular que mantiene unidas las células).
En consecuencia, la localización del colorante puede utilizarse para detectar estas células o determinados orgánulos, a los que se une el colorante después de ser captado. Así también es posible identificar algunas sustancias intercelulares. Para la tinción vital se inyecta el colorante
). Se usa azul de toluidina por su capacidad para penetrar en los medios de inclusión de resinas epoxi, lo cual no ocurre con los colorantes histológicos comunes. Los cortes semifinos también pueden seccionarse después de ser incluidos en resinas acrílicas (en lugar de resinas epoxi), que dan resultados de calidad muy similar y permiten, por ejemplo, la tinción con hematoxilina y eosina (Fig. 2-18).
Así, las uniones entre colorantes ácidos (aniónicos) y hásicos (catiónicos) y Los grupos tisulares tienen, esencialmente, características electrostáticas. En un corte de tejido, el esqueleto proteico y muchas otras macromoléculas contienen grupos ionizables, capaces de formar enlaces electrostáticos con los colorantes. Las distinntas proteínas de un corte de tejido tienen diferentes puntos isoeléctricos dependientes de las composiciones de aminoácidos. Para las tinciones histológicas comunes, se utiliza un pH del que por experiencia se conoce su buen contraste de color. Con el pH elegido, al gunos componentes tisulares son acidófilos, mientras que otros serán basófilos (Fig. 2-15), pero siempre en relación con el pH. A pH neutro, el DNA y el RNA presentan fuerte basofilia debido a la disociación de los grupos fosfato de las moléculas (Fig. 2-20). Con ese mismo pH, la mayoría de las proteínas citoplasmáticas son acidófilas.
Órgano : glándula exocrina de la tráquea, conducto excretorEspecie : ratón (Mus musculus; mamíferos)Técnica : PAS-hematoxilina en cortes de 8 µm en parafina.
Las células superficiales son poliédricas cambiando su morfología en función de lo lleno que esté el conducto: planas cuando está lleno y redondeadas cuando está vacío. Son las principales responsables de la formación de la barrera a la difusión.