Fijación de tejidos

1. PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN
UNIDAD DIDÁCTICA 9
FIJACIÓN DE MUESTRAS.
1.- INTRODUCCIÓN.
2.- LA FIJACIÓN.
3.- FINALIDAD DE LA FIJACIÓN.
4.- REGLAS GENERALES DE LA FIJACIÓN.
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2. PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN
1.- INTRODUCCIÓN.
Un corte es una capa extraordinariamente delgada y transparente de una pequeña porción
de tejido corporal que, fijada y procesada adecuadamente, permite reconocer todos los
elementos que lo componen, sin alterar su morfología y manteniendo las relaciones que
normalmente tienen entre si en el organismo vivo.
Como la observación se realiza por medio del microscopio, en el que un haz de luz debe
atravesar la preparación para poder visualizarla, es necesario que el corte que se estudia
sea muy delgado, entre 5 y 10 micras, para que tenga transparencia; los cortes, por tanto,
son tan importantes en muchos aspectos que, todo aquel que vaya a trabajar sobre ello,
debe conocer como se preparan.
El primer paso es la selección macroscópica de las zonas del tejido que se quieran estudiar.
Para ello, del área elegida, se cortan pequeños fragmentos que son rápidamente sumergidos
en un liquido fijador (el más empleado es el formaldehido al 10%) que endurece el tejido al
coagular las proteínas y también sirve para. inactivar algunos enzimas celulares, que de lo
contrario, empezarían a digerir las células, causando la degeneración postmorten. Con el fin
de permitir una rápida penetración del líquido fijador, el fragmento obtenido no debe tener
un espesor mayor de 5 mm.
Además de coagular las proteínas, los fijadores, retienen diversos carbohidratos e incluso
materiales grasos que, sin ello escaparían.
2.- LA FIJACIÓN.
La fijación esta destinada pues a inmovilizar las estructuras celulares y titulares en un
estado lo más próximo posible al estado vivo. Este tiempo, simple en apariencia, ya que
consiste en sumergir la pieza en el líquido fijador escogido, es en realidad uno de los más
importantes, si no el más importante, de la técnica microscópica.
De su buena ejecución dependen no solamente el éxito futuro de las coloraciones, sino
incluso el valor de la interpretación histológica y citológica.
Un buen fijador debe tener una penetración rápida y homogénea no producir retracción de
los tejidos, revelar las organizaciones intracelulares y las estructuras ocultas, evitar la
desaparición de las formaciones solubles, tales como el glucógeno, cuidar la actividad de
ciertas encimas y permitir, en principio, encontrar los elementos visibles con los colorantes
vitales; en una palabra, no crear artefactos y asegurar a los tejidos y a las células una
conservación y una imagen fiel.
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3. PROCESO DE TEJIDOS Y CITOPREPARACIÓN
3.- FINALIDAD DE LA FIJACIÓN.
La fijación tiene por objeto asegurar una coagulación todo lo homogénea posible de los
geles proteicos constituyentes de las células y las estructuras extracelulares.
Esta coagulación inmoviliza las estructuras existentes mejorando los índices de refracción
y ocasiona un endurecimiento de los tejidos; efectos todos favorables a la microtomitación
y a la conservación microscópica.
4.- REGLAS GENERALES DE LA FIJACIÓN.
La fijación debe obedecer a un cierto número de reglas que es imprudente transgredir.
Será en efecto, inútil esperar coloraciones satisfactorias, y por tanto informes
histológicos precisos, si la fijación ha sido descuidada o mal dirigida.
1. La fijación debe ser lo más precoz posible.
2. La fijación debe ser lo más rápida posible.
3. El líquido fijador debe ser abundante (30 o 40 veces aproximadamente el volumen
de la pieza).
4. La duración de la fijación dependerá del grosor de la pieza y especialmente de la
naturaleza del fijador escogido.
5. El lavado de las piezas asegura la detención de la fijación.
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