2. EL ARN :
CONSISTE EN UNA LARGA CADENA DE
UNIDADES DE NUCLEÓTIDOS.
CADA NUCLEÓTIDO ESTÁ FORMADO POR UNA
BASE NITROGENADA, UN AZÚCAR Y UN
FOSFATO.
LOS NUCLEÓTIDOS DEL ARN CONTIENEN RIBOSA
Y EN USSTITUCIÓN DE LA TIMINA TIENEN
URACILO.
TIPOS DE ARN:
IMPLICADOS EN SÍNTESIS:
• ARN MENSAJERO
• AN DE TRANSFERENCIA
• ARN RIBOSÓMICO
ARN REGULADORES:
• ARN DE INTERFERENCIA
• MICRO ARN
• ARN INTERFERENTE PEQUEÑO
• ARN ASOCIADOS A PIWI
• ARN ANTISENTIDO
• ARN LARGO NO CODIFICANTE
• RIBOSWITCH
3.
4. ARN POLIMERASA: CONJUNTO DE PROTEÍNAS CON CARÁCTERENZIMÁTICO CAPACES DE
FORMAR LOS RIBONUCLEÓTIDOS PARA SINTETIZAR ARN A PARTIR DE UNA SECUENCIA DE
ADNQUE SIRVE COMO PATRÓN O MOLDE.
TIPO I : SÍNTESIS, REPARACIÓN, REVISIÓN, SINTETIZA PRECURSORES DE ARN RIBOSÓMIC. SE
ENCARGA DE TRANSCRIBIR LOS GENES :”HOUSEKEEPING”
TIPO III: SINTETIZA ARN DE TRANSFERENCIA, ARN RIBOSÓMICO, ARN NUCLEARES.
5. *Tiene por precursores a los cuatro ribonucleósidos trifosfatados:
ATP, GTP, UTP, Y CTP.
• En la reacción de polimerización estos son añadidos de un
extremo al otro de la hebra por enzimas denominadas ARN
POLIMERASAS dependientes de ADN o ARN POLIMERASAS.
• La cadena de ARN crece en dirección 5'-3' mientras que se va
copiando la cadena de ADN en dirección 3'-5' por lo que la síntesis
es antiparalela y unidireccional.
• La reacción básica de polimerización consiste en la adición de un
ribonucleósido trifosfatado al extremo 3'-OH del nucleótido
precedente con la liberación de pirofosfato fosfodiester
• Proceso acoplado a la hidrólisis de pirofosfato.
• Ocurre el comienzo de la síntesis sin necesidad de un iniciador.
6. REQUERIMIENTOS:
• Es necesario que un exista un gen que
codifique al ARN, así como otras secuencias
reguladoras de su expresión.
• También debe existir una ARN polimerasa
encargada de la unión de los
ribonucleótidos mediante enlaces
polimerizantes 3-5 fosfodiester .
• Es imprescindible la presencia de factores
de transcripción (proteínas que facilitan el
ensamblaje del complejo de transcripción y
la acción de las ARN polimerasas).
• No podemos olvidar a los ribonucleótidos
que sirven de sustrato y las enzimas
especiales que se encargan de la
maduracion.
7. • Para transcribir un gen, la ARN polimerasa necesita
de factores proteícos llamados TIFs (transcription
initiation factors) o factor sigma que la ayudan a
ubicarse en la posición adecuada.
• los TIFs se unen al ADN y forman un complejo que
atrae la ARN pol.formando la maquinaria basal de
la transcripción.
8. PREINICIACIÓN:
• 1) LOCALIZACIÓN POR PARTE DE LA ARN POLIMERASA & SEPARACIÓN DE LAS DOS
CADENAS SECUENCIA DE BASES ACCESIBLE A LA ENZIMA
• 2) : 2 HEBRAS: 1 CODIFICADORA 1- MOLDE
• 3) ELEMENTO CENTAL: PROMOTOR SEGMENTO DE ADN QUE CONTIENE LAS
SEÑALES PARA LA UNIÓN ADECUADA DE LA HOLOENZIMA DE LA ARN POLIMERASA
Y SU POSTERIOR ACTIVACIÓN.
• PROMOTOR
• 5) El reconocimiento entre la ARN polimerasa y el promotor se debe a la presencia
de un grupo de donantes y aceptores de puentes de hidrógrno orientados
especificamente que interactuan determiando la especificidad del reconocimiento..
9. Se necesita que el factor o unido al núcleo central de la ARN poliemerasa. Existen
unas secuencias de ADN específicas y necesarias para que la holoenzima reconozca
el lugar de comienzo de la transcripción llamadas secuencias promotoras, su
actividad puede modifcarse por :
• Secuencias estimuladoras
• secuencias atenuadoras
10. ETAPA DE INICIACIÓN:
• UNIÓN AL COMPLEJO FORMADO POR LA POLIMERASA Y EL PROMOTR ABIERTO DEL
RIBONUCLEÓSIDO TRIFOSFATADO QUE FORMARÍA AL EXTREMO 5´-P DE LA CADENA
NACIENTE DE ARN.
• UNIÓN DE NUCLEÓTIDO Y LA FORMACIÓN DEL ENLACE FOSFODIESTER
FORMACIÓN DE UN COMPLEJO
TERNARIO ENTRE LA POLIMERASA,
EL ADN Y UN SGMENTO DE ARN
ARN POLIMERASA
AL ESTAR LOS DOS SITIOS OCUPADOS SE PRODUCE LA REACCIÓN
ENLACE FOSFODIESTER
11. EL FINAL DE LA INICIACIÓN ESTA DETERMINADO POR LA SEPARACIÓN DEL FACTOR “O”
Y LA FORMACIÓN DE N COMPLEJO TERNARIO ESTABLE.
ELONGACIÓN:
Después de ser liberado el factor σ, la polimerasa adquiere una nueva conformación y
se forma un complejo ternario (polimerasa-ADN-ARN naciente) que se caracteriza por
su alta estabilidad.
• Unión a la enzima del nucleósido trifosfatado sustrato de forma específica para la
ribosa y la base.
• Ataque nucleofílico del P(α) al 3'-OH con la consiguiente formación del enlace
fosfodiéster y la generación de pirofosfato.
• La polimerasa es traslocada a lo largo de la cadena de ADN produciéndose un des
enrollamiento por delante y un enrollamiento por detrás.
• La zona de elongación tiene una longitud constante de 17pb, se supone que esto se
deba a una propiedad de la enzima y no a la secuencia de bases en la cadena de
ADN. Un detalle importante es que el desplazamiento de la polimerasa no se
produce a una velocidad constante. La polimerasa en su movimiento va
desenrollando la doble hebra de ADN y esto es más difícil donde predominan los
pares CG.
12.
13.
14. Las ssecuencias promotoras son reconocidas por dos factores de transcripción:
* UFB
• SL1
• TBP + POLIMERASA I = FORMAN EL COMPLEJO DE INICIACIACIÓN
15.
16. TERMINACIÓN:
Se dan dos tipos:
• Directa
• Mediada por proteínas
La terminación directa hace referencia a determinadas secuencias palindrómicas.
Secuencias ricas en guanina, citosina y uraciolo, situadas en el extremo de los genes.
Se necesita de la proteína rho que
reconoce la señal de terminación
(secuencis ricas en G C y finalmente
una región de poliuracilos. RHO es un
hexámero formado por seis
subunidades idénticas que ultiliza la
energia del ATP para la finalizacion.