UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN BIOMEDICINA

1. UTILIZACIÓN DE
ANTICUERPOS EN
BIOMEDICINA
Métodos y Técnicas de Estudio en Biología
Celular
UTILIZACIÓN DE
ANTICUERPOS EN
BIOMEDICINA

2. UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS
EN BIOMEDICINA
Inmunoblotting (western blot), Dot/slot blot
Inmunocitoquímica
Inmunofluorescencia
Inmunoprecipitación
ELISA/EIA/RIA
Cromatografía de inmunoafinidad
Microscopia electrónica (morfología)
UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS
EN BIOMEDICINA

3. Estructura de los anticuerpos

4. Tipos de Anticuerpos

5. Selección clonal: Delección

6. Selección clonal: expansión

7. Conceptos
Inmunógeno, antígeno.
Carrier: BSA, KLH.
Unión covalente (cross-linking): MBS,
glutaraldehido, DSS.
Péptidos inmunogénicos
Proteínas nativas y desnaruralizadas.
Otras moléculas
Adjuvante de Freund: completo e incompleto.
Primera inmunización y recuerdos.
Conceptos

8. Anticuerpos policlonales
1. Inmunización del
conejo
2. Recuerdos
3. Extracción de sangre
4. Preparación del
suero
5. Purificación del
anticuerpo (métodos
opcionales)
6. Caracterización del
antisuero

9. Anticuerpos policlonales

10. Anticuerpos monoclonales
1. Inmunización del
ratón
2. Extracción del
bazo
3. Preparación de
hibridomas
(mieloma+B)
4. Selección de los
clones
5. Producción y uso
de anticuerpos

11. Elección del tipo de anticuerpo

12. Marcaje de Anticuerpos

13. Marcaje de Anticuerpos para uso
en Células

14. Immunoblotting (western blot)
Immunoblotting (western blot)

15. Inmunocitoquímica
Las flechas indican la
presencia de neuronas
con hormona liberadora
de la hormona del
crecimiento en el Núcleo
Arcuato (cerebro) de rata
de 4 meses.

16. Inmunocitoquímica
Localización de la
“calbinding”
(calbindina) en
cerebelo de rata

17. Microscopia (confocal e
inmunofluorescencia)

18. Inmunoprecipitación

19. Inmunoprecipitación

20. ELISA

21. ELISA

22. Cromatografía de inmunoafinidad

23. Oro Coloidal
Internalización de transferrina marcada con oro coloidal (6,6
nm) en células endoteliales. La barra corresponde a 0,25 mM.

24. Oro Coloidal
Internalización de transferrina marcada con oro coloidal (6,6 nm). G:
aparato de Golgi; Lu: lumen vascularLa barra corresponde a 0,25 mM