inmunologia

1. FUNDACIÓN UNIVERSITARIA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Nicolás Salcedo Cuevas
ESTUDIANTE
Martha Patricia Isaza Cortez
DOCENTE
Catedra de Biología
CitoHistología
2016-1
Bogotá D.C

2. INTRODUCCIÓN
Concepto del suero policlonal y monoclonal. Cuando se inocula un antígeno (o se haya un
patógeno) se produce una respuesta inmunológica con anticuerpos determinantes del
antígeno, todos los anticuerpos de producen en forma simultanea pero solo con un
determinante en concreto, es lo que produce la respuesta inmune normal, y a esta mezcla de
anticuerpos se le denomina suero policlonal, por que procede de varios linfocitos B, que se
expandieron cada uno con un clon celular. Por otro lado si la inoculación o la inmunización
se llevara a cabo con un único antígeno que contuviese un único epitopo, solo se activaría un
clon celular y se produciría un único anticuerpo a esto se le denomina suero monoclonal.
Los clones de cada anticuerpo son una agrupación de células en las que todas las unidades
que la componen son idénticas en cuanto a su estructura, características metabólicas,
funciones. Provenientes de una célula parental a través de divisiones sucesivas, tanto de ellas
como de sus células hijas.
OBJETIVOS
1. Conocer para que sirven y como se hacen los anticuerpos mono y policlonales.
2. Certificar su creación inmune o inoculada.
3. Comprender las diferencias entre cada anticuerpo.

3. ANTICUERPOS MONOCLONALES AcMc
 ¿Qué es?
Son inmunoglobulinas homogéneas secretadas por un solo clon celular, (células b y
plasmáticas) en las que todas sus reacciones con un antígeno son siempre las mismas.
Esta puede ser promovida por la fusión de linfocitos B con cultivos de células
inmortales, para producir hibridomas, los hibridomas producen muchas copias del
anticuerpo exacto. Este fenómeno ha sido fundamental en el desarrollo de anticuerpos
con aplicaciones de diagnóstico debido a que los anticuerpos monoclonales
reaccionan con un epitope del antígeno, estos son más vulnerables a la pérdida del
epitope a través de tratamientos químicos del antígeno. (Orozco Oscar, M y Colb,
1988)
 ¿Cómo se obtienen los anticuerpos monoclonales?
En 1975 se demostró la fusión o hibridación de linfocitos inmunes de ratón con
células de mieloma que originaban células hibridas las cuales podrían secretar
inmunoglobulinas homogéneas de especificad predefinida. La producción de AcMc
en animales consta de varias etapas que van desde la selección del animal el cual
donara los linfocitos y su esquema inmune, hasta la adecuada conservación de los
híbridos seleccionados.

4. Generalmente la producción de AcMc se fundamenta en:
 Los linfocitos inmunizados sintetizan su DNA por dos vías: endógena y
exógena. Estas células procedentes del bazo mueren rápidamente en un medio
de cultivo.
 La línea de mieloma utilizada es hipoxantinguanldin-fosforribosil-tranferasa
negativas (HGPRT-) caracterizada por la cual no se sintetiza el ADN por via
exógena realizándose únicamente la síntesis por la via endógena. Estas células
en cultivo son viables y se reproducen rápidamente.
 La unión de estas dos líneas celulares se realiza mediante un agente
fusionante. Polietilenglicol (PEG) facilitándose de esta manera la formación
de células hibridas, la adición de aminopterina que es un bloqueante de la via
endógena. A esto se le da lugar en la obtención de células hibridas requeridas.
Estos heredan del linfocito la capacidad de producir anticuerpos mediante su
via exógena activa, y del mieloma heredan la capacidad de crecer viables en
un medio de cultivo. (Davalos, 1993)
Los sistemas de producción de AcMc se han catalogado de acuerdo a la cantidad
de anticuerpos que se obtienen en pequeña, mediana y gran cantidad; estos
sistemas son elaborados in vivo o in vitro respectivamente.
 In vivo se produce mediante la ascitis tumoral de ratones, del cual se
obtienen pequeñas cantidades aproximadamente 30mg por raton lo que es
muy poco.
 In vitro se utiliza como alternativa de cultivo celular donde estas se
mantiene inmóviles o suspendidas homogéneamente, requiriendo siempre
una contaste de perfusión, el cual permitirá la variabilidad de las células
por tiempos prolongados utilizando los siguientes métodos.
 Cultivo estacionario en botella roller.
 Encapsulación en alginato de sodio.
 Perfusión en fibras huecas.
 Birreactores a burbujeo.
 Birreactores de agitación constante.

5.  Aplicaciones de los AcMc
Se presentan aplicaciones muy útiles en la inmunología, bioquímica, histología y
biología celular.
 Definición del subpoblaciones celulares.
 Tipificación de antígenos de tejido y grupo sanguíneo.
 Demostración de daños tisulares.
 Diagnóstico y tratamiento de enfermedades infecciosas y parasitarias.
 Detección de los niveles hormonales y otros factores séricos.
 Detección de toxico multigenos y drogas.
 Purificación inmunoquimica de proteínas.
 Facilitación de trasplante de órganos y tejidos.
 Diagnóstico, seguimiento y tratamiento de tumores malignos.
 Fabricación de antivenenos.

6. ANTICUERPOS POLICLONALES AcPc
 ¿Qué es?
Son anticuerpos derivados de diferentes líneas de linfocitos B, encargadose ante la
respuesta a elementos ajenos o antígenos mediante anticuerpos. Estos son una mezcla
de inmunoglobulina secretados en contra de un antígeno especifico, cada una
reconociendo diferentes epitopos. Usualmente esto se obtiene de lo denominado un
antisuero, el cual es obtenido de la inyección reiterada de un antígeno en un animal,
con el fin de generar una respuesta inmune. En estos se puede reconocer una gran
variedad de epitopes sobre el antígeno, el cual puede ser una característica del uso
especial en algunos procedimientos experimentales. Debido a que esta mezcla de
anticuerpos policlonales reaccionan con múltiples epitopes sobre la superficie del
antígeno, estos pueden ser mas tolerantes a los cambios en la superficie del antígeno.
 ¿Cómo se hace?
Dependiendo el antígeno que se haya utilizado para crear el anticuerpo, se pueden
utilizar anticuerpos policlonales para identificar proteínas de alta homología, con la
proteína inmunogenica o para escoger la proteína blanco en muestras de tejido de
otras especies que el inmunogeno. A lo largo de la misma línea, esto es especialmente
importante cuando se trabaja con este tipo de anticuerpos, se incluye el inmunogeno
que ha sido utilizado para la producción del anticuerpo policlonal y el potencial para
potenciales reacciones cruzadas dentro de la muestra. Péptidos inmunogenicos son
frecuentemente utilizados para generar anticuerpos policlonales que centran un único
epitope, especialmente para familias de anta homología. (Pascacio, 2007)
Inicialmente se obtuvieron anticuerpos policlonales anti linfocitos, para lo cual se
inyectaban esplenocitos, timocitos o linfocitos periféricos a conejos, ratones o
caballos; estos animales desarrollaban una respuesta inmune de anticuerpos de se les
extraía suero del que se separa la fricción globulinica extrayendo los anticuerpos
frente a los elementos formes de la sangre de forma que el producto final lleva a los
antilinfocitos y antitimocitos. (Balderas, s.f.)
 Aplicaciones de los AcPc

7.  Reconocen múltiples epitopes haciéndolos mas tolerantes a pequeños cambios
en la naturaleza del antígeno. Son frecuentemente la opción preferida para la
detección de proteínas desnaturalizadas.
 Pueden ser generados en una variedad de especies, incluyendo conejos,
cabras, gallinas, ovejas, asnos y otros. Dándole al usuario muchas opciones
en el diseño experimental.
 Se une a múltiples epitopes y asi ellos generalmente proveen una detección
mas robusta.
 Son a veces estudiados cuando la naturaleza del antígeno en una especie no
se conoce.
DIFERENCIAS ENTRE ANTICUERPOS MONO Y POLICLONALES
AC. POLICLONALES AC. MONOCLONALES
Epitopes que
reconocen
Varios Único
Especificad Variable entre animales
y sangrías.
No varia, alta
especificad.
Afinidad Variable entre sangrias Fija
Rendimiento Concentración media
1mg/ml
Volumen variable según
la especie
Bajo en tejidos de
cultivo.
Alto hasta 20mg/ml en
liquido ascítico
Costo relativo Bajo Alto

8. BIBLIOGRAFÍA
Balderas, G. N. (s.f.). SlideShare. Obtenido de universidad autonoma metropolitana:
es.sluideshare.net/fotomascota/anticuerpos-policlonales
Davalos, E. G. (1993). Anticuerpos monoclonales. La paz: Laboratorios colón.
Orozco Oscar, M y Colb. (1988). Manual de laboratorio. aplicacion de anticuerpos
monoclonales . Bogotá: Universidad nacional de Colombia.
Pascacio, I. R. (2007). Biotecnologia. En R. p.. Cuernavacas: Universidad autonoma de
mexico.