2. MÉTODOS DE LABORATORIO
Los métodos de laboratorio permiten realizar:
1. Examen citológico.
2. Microscopía electrónica.
3. Aislamiento y cultivo del virus.
4. Detección de proteínas víricas (antígenos y
enzimas)
5. Detección de material genético vírico.
5. Serología.
5. EXAMEN CITOLÓGICO
En las muestras tisulares o los cultivos celulares
figuran modificaciones de la morfología celular, lisis
celular, formación
de vacuolas, sincitios y cuerpos de inclusión.
a. Los sincitios son células gigantes multinucleadas
formadas como
consecuencia de la fusión vírica de células individuales.
Los paramixovirus y los virus VHS, VVZ y VIH estimulan
la formación de sincitios.
6. EXAMEN CITOLÓGICO
b. Los cuerpos de inclusión
constituyen cambios histológicos de
las células provocados por
componentes víricos o bien
alteraciones de las estructuras
celulares inducidas por los virus.
Las inclusiones de Cowdry de tipo
A en las células o en los grandes
sincitios (múltiples células fundidas)
son un hallazgo característico en las
células infectadas por VHS o VVZ .
7. EXAMEN CITOLÓGICO
La rabia se puede diagnosticar cuando se
encuentran cuerpos de Negri (inclusiones del virus
de la rabia) en los tejidos cerebrales .
Las muestras citológicas se analizan para
comprobar la presencia de antígenos víricos
mediante técnicas de inmunofluorescencia o bien
se detecta la presencia de genomas víricos por PCR
con el fin de llevar a cabo una identificación rápida
y definitiva. Estas pruebas son específicas para
cada virus y se deben seleccionar conforme al
diagnóstico diferencial.
8. MICROSCOPÍA
ELECTRÓNICA
La microscopía electrónica no es una
técnica de laboratorio estándar clínico.
Se utiliza para detectar e identificar
algunos virus cuando existe un número
suficiente de partículas víricas.
La adición de un anticuerpo específico del
virus a una muestra puede hacer que las
partículas víricas se agrupen, facilitando así
la detección e identificación simultáneas del
virus (inmunomicroscopia electrónica).
Este método es útil para la detección de los
virus entéricos, como los rotavirus, que se
producen en abundancia y que tienen una
morfología característica.
9. CULTIVO DEL VIRUS
Los virus pueden crecer en cultivos
tisulares, huevos embrionados o animales
de experimentación
Los cultivos de células primarias se
obtienen por tratamiento de algún órgano
animal específico con tripsina o colagenasa.
Las células obtenidas con este método se
cultivan en monocapa (fibroblastos o
células epiteliales) o en suspensión
(linfocitos) en medios artificiales
complementados con suero bovino u otra
fuente de factores de crecimiento.
Las células primarias de riñon de mono son
muy adecuadas para llevar a cabo el
aislamiento del virus de la gripe.
paramixovirus, muchos enterovirus y
algunos adenovirus.
10. CULTIVO DEL VIRUS
Las células primarias se pueden separar
con tripsina, se diluyen y crecen en nuevas
monocapas (subcultivos) para convertirse en
cultivos celulares secundarios.
Las células diploides fetales humanas, que
generalmente son fibroblastos, permiten el
crecimiento (p. ej., VHS, VVZ, CMV,
adenovirus, picornavirus). Las células HEp-2,
una línea continua de células epiteliales
derivada de un cáncer humano, son
excelentes para aislar el virus respiratorio
sincitial, los adenovirus y los VHS.
17. Vaccines have been the
greatest achievement of
biomedical sciences. Their
impact in public health is only
exceeded by the availability
of potable water