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EL LABORATORIO COMO 
HERRAMIENTA EN EL 
DIAGNÓSTICO DE 
ENFERMEDADES 
INFECCIOSAS 
Laura Vanessa Moreno 
Villamizar 
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Velandia 
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INFECCION VIRAL 
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mLualsti pinlifceacrcsieo nye psr ovidraulceirs ostorons d vifiírcuisle cso dmeo t realtlaors . 
porque los virus viven dentro de las células de 
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VIRUS 
RESPIRATORIOS
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primeros dias despues del 
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• Cultivo viral  Gold 
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o Efecto citopatico 
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 CoV 
 RV 
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Menos de 500 leucocitos/μl 
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Linfocito 
s 
LCR normal en 5% de los casos 
Acs neutralizantes 
Fijadores de complemento 
Normal o 
apenas alto 
Primera o 
segunda semana 
de la enfermedad
HEPATITI 
S B Detección del antígeno superficial del virus de la hepatitis 
B (HBsAg). 
La infección aguda se caracteriza por la presencia del 
HBsAg y de inmunoglobulina M (IgM) en el antígeno del 
núcleo HBcAg. 
En la fase inicial de la infección los pacientes también son 
seropositivos para el HBeAg. 
La infección crónica se caracteriza por la persistencia (más 
de seis meses) del HBsAg (con o sin concurrencia de 
HBeAg). 
La persistencia de HBsAg es el principal marcador del 
riesgo de ulterior desarrollo de hepatopatía crónica y
HEPATITIS 
C 
La detección de anticuerpos anti-VHC mediante un examen 
serológico revela que la persona está infectada con el virus. 
Si el examen es positivo se debe realizar una prueba de 
ARB del VHC para confirmar la infección crónica, dado que 
entre el 15 y el 45% de las personas infectadas con el VHC 
eliminan espontáneamente la infección mediante una 
respuesta inmunitaria fuerte, sin necesidad de tratamiento. 
Aunque ya no estén infectadas, los análisis serológicos de 
esas personas revelarán la presencia de anticuerpos anti- 
VHC.
Se analiza una muestra de 
sangre para determinar la 
secuencia genética del VHC. 
El análisis del genotipo del 
VHC sólo se hace una vez ya 
que el genotipo no cambia. 
Sin embargo, si alguien 
infectado con el VHC se 
vuelve a exponer al virus, se 
pueden infectar con un 
genotipo diferente.
VPH 
Examen microscópico: observación de células sospechosas con 
cambios coilocíticos en citologías de cuello uterino y vagina en 
mujeres, usando la tinción de Papanicolaou. 
Se pueden tomar biopsias de lesiones sospechosas, o incluso de 
vegetaciones o verrugas genitales, tanto de hombres como de 
mujeres, y enviar las muestras a una sección de anatomía 
patológica para su análisis. 
Detección directa del material genético del virus por técnicas de 
biología molecular, que amplifican el ADN del virus y permiten la 
identificación de los distintos serotipos.
http://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/irsv.pdf 
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/herpes.html 
https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicro 
biologia/seimc-procedimientomicrobiologia8a.pdf 
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AFÍA
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DIAGNOSTICO DE INFECCIONES VIRALES

  • 1. EL LABORATORIO COMO HERRAMIENTA EN EL DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS Laura Vanessa Moreno Villamizar Slenddy Dayhanna Padilla Velandia Laura Carolina Rodriguez Nuñez
  • 2. INFECCION VIRAL Los virus causan infecciones familiares como el resfrío común, la gripe y las verrugas. Son muy pequeños, mucho más pequeños que las bacterias Pueden causar enfermedades graves como el VIH / SIDA, la viruela y las fiebres hemorrágicas. Los virus son como secuestradores. Invaden las células vivas normales y las aprovechan para mLualsti pinlifceacrcsieo nye psr ovidraulceirs ostorons d vifiírcuisle cso dmeo t realtlaors . porque los virus viven dentro de las células de su cuerpo. Están "protegidos" contra los medicamentos, que suelen trasladarse a través del torrente sanguíneo
  • 3. MANEJO DE LA MUEMÉSTOTDORS A DIRECTOS Detección de virus Biopsia Descamación como Papanicolaou Frotis Lavado bronquioalveolar Secreción Exudados Líquido corporal Sangre INDIRECTOS Serología: IgM IgG Muestreo periódico: Dengue Hepatitis SIDA Enfermedades congénitas: Líquido amniótico Muestra de sangre al nacimiento Respuesta inmune del virus
  • 4. Cómo se evidencia la actividad viral en un cultivo celular? 1) Por efecto citopático (ECP) observables mediante el uso de microscopio invertido LISIS Picornavirus (virus de la Fiebre Aftosa, Herpesvirus bovino) Ejemplo REDONDEAMI ENTO ( Adenovirus) Este método no permite la identificación del agente causal, por lo que se requiere la confirmación mediante técnicas específicas. IF- Inmunhistoquímica (IHQ). DESPRENDIMI ENTO y LISIS (HVB-5) SINCICIOS = Paramyxovi us (Virus sincicial respiratorio) VACUOLIZACI ON = BVDV cepa citopática.
  • 5. 2) Por visualización de cuerpos de inclusión (CI): • Tipos Cowdry A y B, intranucleareas e intracitoplasmáticos. Su visualización en cultivos celulares se efectúa previa tinción con colorantes específicos. Ejemplos: • Virus de la rabia -Corpúsculos de Negri (intracitoplasmáticos en neuronas) –Coloración de Seller’s. • Los cuerpos de inclusión pueden visualizarse también en cortes histológicos ; por ejemplo: Herpesvirus equino- Cowdry A (intranucleares en hepatocitos y células bronquiales fetales)- coloración de hematoxilina-eosina. La detección de cuerpos de inclusión asociados, en algunos casos es orientativa y en otras confirmatoria de la presencia del agente.
  • 7. Principales virus • VRS  Lactantes • Rinovirus (50%) Todas edades • Adenovirus  Todas edades • Gripe  Especialmente < 5 años • Parainfluenza  < 5 años • Coronavirus  Muestras clínicas • Frotis nasal • Lavado nasal • Frotis faringeo • Aspirado nasofaringeo o Obtenerlas en los tres primeros dias despues del inicio de los sintomas
  • 8. Métodos de Dx directo • Cultivo viral  Gold estándar o Efecto citopatico o Dx lento  5-7 días o No todos son cultivables  HBoV  CoV  RV  PIV • Detección de Ag mediante Ac monoclonales o Inmunofluerescencia o Inmunocromatografía o Enzimoinmunoanálisis • Detección de ácidos nucleicos o PCR
  • 11. Virus herpes simplex Prueba de Tzank • Tinción de Wright o Giemsa • Observa sincitios e inclusiones nucleares de Cowdry Detección de Ac • Usa para primo infección y estudios epidemiológicos Transmisión: Saliva • VHS-1 Transmisión: Secreción vaginal • VHS-2
  • 12. Varicela zoster • Virus se aisla de las vesículas • Prueba de Tzanck • Técnicas de biología molecular Virus Epstein-Barr • Mononucleosis infecciosa • Deteccion en suero de: o Linfocitos atipicos o Anticuperpos heterofilicos  No están en reactivaciones o Anticuerpos anti-VEB
  • 13. CITOMEGALOVIRUS • Infecta al 50 – 80% de las personas en el transcurso de la vida VHH 6, 7 y 8 • VHH6  Roseola niños • VHH7  Roseola • VHH8 Sarcoma de Kaposi Ojo de lechuza Están en tejidos y en orina Papanicolau HE Eosina VHH7 VHH8 PCR VHH6 Inmunofluorescencia Enzimoinmunoanálisis VHH7 VHH6 Cultivo viral
  • 15. Indicación para la realización de coprológico y Ag virales en heces o Valorar si hay deshidratación, • Diarrea mucosanguinolenta • Inmunodeficiencias • Diarrea de evolución historia clínica y exploración física o Laboratorio  Se usan cuando hay deshidratación  Descartar otros dx prolongada  >15 días • Diarrea en niño llegado de países en vía de desarrollo Diagnóstico
  • 16. Rotavirus • ELISA • Microscopía electrónica • Ig especificas • Proteínas virales  ELISA – Aglutinación látex Adenovirus Calicivirus • RT-PCR • Microscopía electrónica • ELISA • Inmunoflorescencia • PCR • Cultivo Astrovirus
  • 18. DENGUE Leucopenia Incremento de transaminasas en dengue febril Trombocitopenia Aumento de fibrinólisis Hemoconcentración IgM – IgG (ELISA) después de la fase febril PCR Detección de proteína vírica específica NS1 por ELISA Inmunohistoquímica para DENGUE HEMORR ÁGICO
  • 19. Se transmite por: Cuando el mosquito Aedes Aegypti se alimenta con sangre de una persona enfermas con este virus y luego pica a personas sanas. La hembra deposita sus huevos en las paredes de recipientes con agua estancada, limpia y a la sombra. Al beber esta agua
  • 20. CHIKUN GUNYA Leucopenia Trombocitopenia RT-PCR Cultivo RARA VEZ Títulos altos de IgM Concentración cuatro veces mayor de la IgG convaleciente
  • 21. FIEBRE Leucopenia AMARILLA Proteinuria 5 a 6 g/L AST es el doble de, ALT Tiempo de protrombina IgM por ELISA en fase aguda y convaleciente PCR Inmunoanálisis de anticuerpos monoclonales contra Ags víricos circulantes. Albuminuria para Dx diferencial
  • 22. Se transmite por: •Cuando el mosquito Aedes Aegypti, Aedes Haemagogus y Aedes Sabethes se alimenta con sangre de una persona enfermas con este virus y luego pica a personas sanas.
  • 23. OTRAS
  • 24. RABI A Acs fluorescentes Biopsia de piel Sensibilidad de 60 a 80% PCR de transcriptasa inversa Amplificación de secuencias de ácidos nucleicos Aislamiento vírico de LCR o saliva Acs en suero y LCR CUERPOS DE NEGRI
  • 25. RUBÉ OLA Leucopenia en primeras etapas Aumento de células plasmáticas Acs IgM Títulos de Acs IgG Aislamiento del virus Falsos positivos de Acs IgM Acs en orina y saliva PCR Virus de Epstein- Barr CMV Parvovirus Factor reumatoide
  • 26. POLIOMI ELITIS Recuento periférico de leucocitos Presión de LCR y sus proteínas Glucosa no disminuye Menos de 500 leucocitos/μl 24h Linfocito s LCR normal en 5% de los casos Acs neutralizantes Fijadores de complemento Normal o apenas alto Primera o segunda semana de la enfermedad
  • 27. HEPATITI S B Detección del antígeno superficial del virus de la hepatitis B (HBsAg). La infección aguda se caracteriza por la presencia del HBsAg y de inmunoglobulina M (IgM) en el antígeno del núcleo HBcAg. En la fase inicial de la infección los pacientes también son seropositivos para el HBeAg. La infección crónica se caracteriza por la persistencia (más de seis meses) del HBsAg (con o sin concurrencia de HBeAg). La persistencia de HBsAg es el principal marcador del riesgo de ulterior desarrollo de hepatopatía crónica y
  • 28. HEPATITIS C La detección de anticuerpos anti-VHC mediante un examen serológico revela que la persona está infectada con el virus. Si el examen es positivo se debe realizar una prueba de ARB del VHC para confirmar la infección crónica, dado que entre el 15 y el 45% de las personas infectadas con el VHC eliminan espontáneamente la infección mediante una respuesta inmunitaria fuerte, sin necesidad de tratamiento. Aunque ya no estén infectadas, los análisis serológicos de esas personas revelarán la presencia de anticuerpos anti- VHC.
  • 29. Se analiza una muestra de sangre para determinar la secuencia genética del VHC. El análisis del genotipo del VHC sólo se hace una vez ya que el genotipo no cambia. Sin embargo, si alguien infectado con el VHC se vuelve a exponer al virus, se pueden infectar con un genotipo diferente.
  • 30. VPH Examen microscópico: observación de células sospechosas con cambios coilocíticos en citologías de cuello uterino y vagina en mujeres, usando la tinción de Papanicolaou. Se pueden tomar biopsias de lesiones sospechosas, o incluso de vegetaciones o verrugas genitales, tanto de hombres como de mujeres, y enviar las muestras a una sección de anatomía patológica para su análisis. Detección directa del material genético del virus por técnicas de biología molecular, que amplifican el ADN del virus y permiten la identificación de los distintos serotipos.
  • 31. http://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/irsv.pdf http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/herpes.html https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicro biologia/seimc-procedimientomicrobiologia8a.pdf https://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/gastroenteritis_aguda.pdf http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/inf-tracto-gastro. html BIBLIOGR AFÍA