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Q.F.B. Telma Cerino Frias


Grado: 4to            Grupo: B             Turno: matutino
                            Integrantes:
              Juan Gerardo Bautista Martínez (SUKE)
                  Carolina Cruz Cárdenas (UKE)
                Karen Yoczely Cruz Cortes (SUKE)
                  Katherine Esqueda Ble (SEME)
                   Jaqueline Jesús León (UKE)
                 Karla Gpe Mijangos Arzat (SUKE)
                   Elisa Pérez de la Cruz (UKE)
                    Selena Pérez Pérez (SUKE)
                   Efrain Roman Ocaña (SEME)
La más importante, es la familia Enterobacteriaceae,
 formada por numerosas especies, muy grandes, gran
importancia clínica.
Hay 27 géneros y hasta 102 especies.
Bacilos Gram (−) anaerobios facultativos, de tamaño
moderado, extremos redondeados, móviles,
(flagelación
peritrica), no forman esporas y son catalasa (+) y
oxidasa (−), requerimientos nutricionales simples.
Los bacilos gram negativos que no forman esporas
 constituyen un gran grupo de bacterias que incluye:
Comensales intestinales: Escherichia y proteus.
Patógenos entéricos: salmonella, shigella y algunas
 cepas de Escherichia.
Patógenos de los tractos respiratorio y urinario:
 klebsiella
Basilo de la peste: yersinia
Y una gran variedad de saprofitos y patógenos
 vegetales
Los anaerobios facultativos constituyen el segmento
 mayor de estos bastones gram negativos.
Este grupo esta formado por dos familias:
 Enterobacteriaceae y vibrionaceae.
Las vibrionaceae son bacilos curvos rígidos, y
 normalmente son móviles porque tiene flagelos
 polares.

El objetivo son las Enterobacteriaceae o bacilos
 entéricos, que se distinguen por la presencia habitual
 de flagelos peritricos.
La mayor parte de estas bacterias se encuentran en el
 intestino del hombre y de otros animales, en el que se
 comportan como comensales de potencial patógeno
 limitado.
A veces provocan diarreas, o con mucha menos
 frecuencia, infecciones en los tejidos.
Algunas son saprofitas de vida libre en el suelo y en el
 agua, y otras son patógenas para las plantas.

Clasificación y nomenclatura
 de las Enterobacteriaceae.
. En general, se reconoce que la subdivisión de las
 Enterobacteriaceae en tribus, géneros y especies
 convencionales, debe basarse en la relación genética,
 especialmente en la integración interespecie de los
 genes cromosómicos: en la similitud de la ordenación
 de los genes en el cromosoma; en la química
 comparada del genoma; y en la homología estructural
 de proteínas específicas.
Las relaciones Taxonómicas de las Enterobacteriaceae
 se basan en diferentes reacciones bioquímicas, en la
 sensibilidad frente a bacteriófagos y en la hibridación
 de DNA.

En el presente, la denominación de las subdivisiones
 tribales no tiene una categoría formal, pero sirven para
 aclarar las relaciones entre los géneros.
Escherichia   E. collí
  Escherichiae
                 Shigella        S.Dysenteria
                                 e
                                 S.Flexneri
                                 S.Boydii
                                 S.sonnei




                 Edwardsiell          E.tarda
Edwardsielleae   a


                                     S.cholerasuis.
                                     S.Typhi
                                     S.Enteritidis
                  Salmonella

Salmonelleae      Arizona             A.hinshawii

                  Cirobacter        C.Freundii
                                    C.Diversus
                                    C.amalonoticus
K.Pneumoniae
               Klebsiella       K.Ozaenae
                                K.Chinoscleromatis
                                K.oxytoca

Klebsielleae   Enterobacter     E.aeroges
                                E.Cloacae
                                E.Agglomerans
                                E.Sakasakii
                                E.gergoviae


               Hafnia             H.alvein


               Serratia
                                  S.Marcescens
                                  S.Liquifaciens
                                  S.rubidea
                                Y.Pestis
                                Y.Pseudotuberculosis
Yersinieae           Yersinia
                                Y.Enterocolitica
                                Yintermedia
                                Yfrederiksenii
                                Y.ruckeri
Proteus       P.Miriabilis
                          P.vulgaris

Proteeae    Providentia   P.Rettgeri
                          P.Stuartii
                          P.alcaliquifacien
                          s


            Morganella     M. morganii




Erwinieae     Erwinia
 En este pequeño bloque examinaremos algunas de
  las propiedades que tiene en común los bacilos
  entérico, como lo son:
 Morfología
 Estructura Bioquímica
 Composición antigénica
 Las bacterias entéricas son:
 Bacilos aerobios, anaerobios facultativos.
 Gram(-).
 No esporulados.
 Algunas forman capsulas(klesiella).
 Algunas forman cepas de     Enterobacter y Serratia.
 La mayoría son móviles por flagelos peritricos.
 Shigella, Klebsiella y Yersinia no son móviles.
Productoras de Fimbrias(Escherichia,
 Klebsiella, Proteus, Salmonella y Shigella)
Su tamaño característico oscila de
  1.0a1.5 x 2.0a6.0um.
 Al igual que sus formas estas varían,
 Proteus : evidencia de filamentos,
 Esferoplastos y otras formas aberrantes.
Yersinia : forma cocoide u oval siendo la mas
  pequeña del grupo.
 La Morfología de las Colonias de todas las Bacterias
  entéricas son muy similares.
 En medios bacteriológicos ordinarios, las colonias
  suelen ser:
 Lisas, húmedas y Brillantes
 Color Gris
 En ocasiones observaremos colonias rugosas,
  secas, friables y no se emulsionan fácilmente en
  solución salina
 La presencia de capsulas o de mucilago flacilago se
  refleja en general en colonias con formas de cúpula
  de consistencia mocoide y viscosa
 Algunas Cepas son hemoliticas en agar sangre
   (Escherichia y proteus)
 Produccion de Pigmentos, rojos en condiciones de
  crecimiento (Serratina).
 Produccion de Pigmentos, desde cremoso a
  amarillento en condiciones de crecimiento
  (Erwinia).
Entre las Enterobacteriaceae la designación de género
 y, en muchos casos, de las especies se basa sobre todo
 en parámetros bioquímicos.
La diferenciación más precisa, en categorías
 específicas en algunos casos y en serogrupos,
 serotipos, y variedades, depende de reacciones
 serológicas que detectan antígenos de superficie.
Estos antígenos pertenecen a tres clases principales:
Antígenos O somáticos.
Antígenos H flagelares.
Antígenos K de la envuelta o capsulares.
Los antígenos O somáticos son lipopolisacaricos
 termoestables comunes en todas las bacterias lisas
 gramnegativas. Están presentes en la membrana
 externa y son responsables de la actividad endotoxina
 relacionada con las bacterias gramnegativas.
La reacciones de los antígenos O se superficie con
 anticuerpos homólogos tienen como resultado la
 aglutinación de las células bacterianas, produciendo
 agregados celulares muy adherentes, que aparecen
 macroscópicamente como gránulos finos, los cuales se
 depositan rápidamente en la suspensión.
La variación de la forma colonial desde lisa a rugosa
 (variación S-R) está acompañada por una perdida
 progresiva de antígeno O liso y por ultimo, se
 produce una cepa bacteriana rugosa (R) cuyo
 lipopolisacarido carece de las cadenas laterales O-
 especificas y solo retienen la estructura basal del
 núcleo. Por lo tanto las cepas rugosas no reaccionen
 con anticuerpos O-específicos.
Los flagelos de las bacterias móviles poseen proteínas
 especificas serológicamente (flagelinas) las cuales, a
 diferencia de los antígenos O, son termolábiles y se
 destruyen con etanol. Cuando estas bacterias móviles
 se hacen reaccionar con anticuerpos antiflagelares
 específicos, la observación microscópica revela la
 existencia de una asociación débil de muchas células
 con enmarañamiento y entrelazamiento de sus
 flagelos.
La terminología de los antígenos H y O surgen del
 hecho de que las bacterias móviles crecen con
 frecuencia como una película delgada en medios
 húmedos. Los investigadores alemanes llamaron
 Hauch a esta película (puff o film); las cepas móviles y
 sus antígenos flagelares se denominaron H. Las cepas
 que crecen como colonias discretas en medios
 húmedos (Ohne Hauch, sin nube o película) no son
 móviles y se denominan O.
Las bacterias móviles pueden perder su capacidad
 para producir flagelos, aunque aún retienen su
 especificidad para el antígeno O. Esto se conoce como
 variación OH-O.
Los antígenos K aparecen en las Enterobacteriaceae
 como capsulas, o como antígenos de la envuelta,
 que cubren los antígenos O de superficie. Debido a
 esto, los antígenos K bloquean la aglutinación
 producida por los anticuerpos O-específicos.
 Generalmente los antígenos de esta clase son
 polisacáridos y su capacidad de reacción suele ser
 alterada por el calor, de modo que un tratamiento de
 este tipo producen cepas aglutinables con antisueros
 O.
La terminología de antígeno K, varia un poco en los
 distintos géneros.. En las pocas Salmonella que poseen
 antígeno K, se denomina antígeno Vi. Por lo general,
 los antígenos K de Escherichia son polisacáridos, pero
 en algunos casos, están compuestos por proteínas y
 aparecen como fimbrias en la superficie celular.
Es una sustancia hapténica También denominada
               antígeno de Kunin.
Están localizados en la
    membrana externa de la envoltura celular
bacteriana y juegan un papel muy importante en
  la patogénesis de las infecciones bacterianas,
   así como en la interacción con el hospedero




                                                   Figura 1.
                                                   unión del
                                                   hepteno
Es inmunogenico; sin embargo en la mayoría de las
  bacterias entéricas se encuentran de forma libre.




        Figura 2. Anticuerpos
Antigeno vs
Anticuerpo
anticuerpo
antígeno




                        Los anticuerpos contra ECA
                        Pueden detectarse en el suero
                                  humano
Junto con otras bacterias Gram-
negativas, las enterobacteriaceae
contienen varias proteínas importantes
en la membrana externa. Estas proteínas
son antigénicas y contribuyen al mosaico
antigénico de las enterobacterias.
 Un antígeno es una sustancia que desencadena la
 formación de anticuerpos y puede causar una
 respuesta inmunitaria. Los antígenos son usualmente
 proteínas o polisacáridos. Esto incluye partes de
 bacterias (cápsula, pared celular, flagelos, fimbrias, y
 toxinas), de virus y otros microorganismos. Los lípidos y
 ácidos nucleicos son antigénicos únicamente cuando se
 combinan con proteínas y polisacáridos
 . Los antígenos no-microbianos exógenos (ajenos al
 individuo) pueden incluir polen, clara de huevo, y
 proteínas de tejidos y órganos trasplantados, o proteínas
 en la superficie de glóbulos rojos transfundidos.
 Hay una considerable capacidad de reacción serológicas
 cruzadas entre las proteínas principales de las
 membranas externas que pertenecen a cepas
 relacionadas.




              Scherichia Coli.
 Además de las proteínas principales de la membrana
 externa, las enterobacteriaceae parecen poseer un
 antígeno lipoproteico común. Esta lipoproteína se
 encuentra en la cara interna de la membrana externa, y
 esta unida al peptidoglucano de la pared celular y
 probablemente tiene algún papel en la estructura y
 organización de la pared celular.
Los anticuerpos contra esta lipoproteina se producen
 en un numero importante de los individuos que
 padecen infecciones sistemáticas por enterobacterias.

 Una toxina es una sustancia venenosa producida por
 células vivas u organismos, como animales, plantas,
 bacterias y otros organismos biológicos; Para destacar
 su origen orgánico, se habla a veces también de
 biotoxina. Sustancias artificiales, creadas por procesos
 artificiales.
Las bacterias poseen un genotipo que
transmiten por herencia y un fenotipo
que depende de las circunstancias que les
rodean. Las bacterias sufren variaciones
en sus caracteres y son de dos
tipos; fenotípicas o
adaptaciones y genotípicas
VARIACIONES FENOTÍPICAS O
       ADAPTACIONES

•Se producen por la presión ambiental
sobre las bacterias, pero no afecta al
genoma.
•Son de alta frecuencia. Afectan a toda
la población bacteriana sometida a la
modificación ambiental.
•Son reversibles ; cuando cesa la
causa, retornan al estado primitivo.
•No son hereditarias, porque no se
modifica el ADN.
• Morfológicas; Bacilos cortos y móviles se
  convierten en bacilos largos e inmóviles
  debido al agotamiento de nutrientes).
• Cromógenas.
• Enzimáticas; algunas bacterias producen
  enzimas en presencia de determinados
  sustratos, por ejemplo, penicinilasa en
  presencia de penicilina.
•Patogénicas; Bacterias que producen
toxinas según el ambiente en el que
crecen. así Corynebacterium sólo lo hace
si dispone de hierro en el medio.
•Sensibilidad a antibióticos; hay bacterias
que son sensibles en determinadas
condiciones pero no lo serán en otras.
La variabilidad genética es
interesante desde el punto de
vista de que muchas de estos
cambios genéticos aportan
resistencia a estas bacterias a
ciertos medios, antibióticos.
Mutación; cambio transmisible en el
genoma bacteriano, que es transmisible.
Estas mutaciones pueden ser puntuales y
suficientes para dar lugar, por ejemplo, a
una resistencia por el cambio en la
transducción de un proteína.
Pueden ser mutaciones de segmentos
del DNA, sustituciones de
nucleótidos, y microinserciones, o
por el contrario provocar alteraciones
en regiones más grandes (inserciones
y selecciones).
•Las bacterias se transmiten material
genético a través de DNA libre en el medio,
elementos episomiales.
•La bacteria receptora tiene mecanismos
para captar el DNA a través de sus envolturas
externas e introducirlo en su cromosoma.
•Los genes intracrosomales se recombinan
dando lugar a genes mosaico.
•Se produce cuando dos bacterias tienen
contacto entre ellas para intercambiar
material genético.
Así se transmiten plásmidos, y otros
elementos.
•Durante la conjugación las bacterias
donadoras poseen una estructura, conocida
como '' pili'' en gram negativos, lo cual hace
contacto con la célula receptora.
•Pasa una cadena de los plásmidos a la
bacteria receptora quedando una en la
bacteria donadora.
•Los plásmidos pueden
adquirir genes de resistencia
por conjugación (transposones
e integrones).
•Transferencia de información genética de
una célula a otra a través de un virus.
•Estos virus se denominan bacteriófagos o
fagos.
•Penetran las membranas y la pared celular
de la bacteria para inyectarle su material
genético.
Durante la replicación del fago, éste puede
llevarse material genético de la bacteria
huésped, tanto plásmidos como material
cromosómico. Luego salen de la bacteria, e
infectan a otras, a las cuales les transmite e
integran el DNA que llevan.
Es un proceso relativamente complejo, y se realiza de un
modo as adecuado en los laboratorios clínicos que poseen
            personal cualificado y experto.
Recogida de muestras


Se pueden encontrar bacilos entericos e heces, orina,
 abscesos,sangre heridas, esputos, y fluidos corporales

Deberan recogerse con cuidado para evitar la
 contaminacion exogena

Trasportarse rapidamente y ser cultivadas


Se pueden refrigerar durante cortos periodos de
 tiempo
Aislamiento
La selección de un medio de aislamiento apropiado
 depende del numero y la clase de bacilos entericos

El grado y tipo de contaminacion


Contienen un gran numero de microorganismos
 contaminantes
Medios de aislamiento             Medios de enriquesimiento

No selectivos
Nutrientes o infusion de agar     Caldo GNC(gramnegativas)
Agar sangre                       Caldo de tetrationato
No selectivo diferencial          Caldo de tetrationato-verde
Agar lactosa con indicador
                                  brillante
Poco selectivos, diferenciales
Agar eosina-azul de metileno
                                  Caldo de seleita F
Agar macConckey
Agar desoxicolato
Moderadamente selectivos dife
Renciales
Agar salmonella-shigella
Agar desoxicolato-citrato
Agar hektoen-enterico
Agar xilosa-lisina desoxicolato
Muy selectivos
Agar sulfito de bismuto
Agar verde brillante
Las enterobacterias son Gram negativas y contienen más
  de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener
   morfología de bacilos o cocos. Los miembros de esta
    familia forman parte de la microbiota del intestino
(llamados coliformes) y de otros órganos del ser humano
  y de otras especies animales. Algunas especies pueden
     vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos.
                                .
Para cultivarlas se hace sembrado en forma de estría,
 se cultiva a 37º C de 18-24hrs, para posteriormente
 refrigerar.
Para obtener un cultivo axénico:
(a)esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama
  de un mechero,
(b) (b) introducirla en la suspensión bacteriana para
  recoger una muestra,
(c)(c) sembrar haciendo estrías sobre la superficie de un
  medio sólido en una placa Petri, y
(d) volver a esterilizar el asa, tocar en la zona de la placa
    ya sembrada y hacer un segundo grupo de estrías en
    una región nueva de la placa. Repetir el proceso una
    tercera y una cuarta vez, hasta conseguir que los
    grupos de células se diluyan y se separen células
    aisladas.
(e) Después de la incubación, se desarrollan colonias
    aisladas. Para estar seguro de que el cultivo es puro,
    repetir el proceso entero; para ello tomar una
    colonia aislada y sembrar por estrías una segunda
    placa.
 Prueba de la Oxidasa
 El objetivo de la prueba “Oxidasa” es buscar la presencia de
  la enzima Citocromo C oxidasa.

 Procedimiento:
 Con un pequeño papel de filtro añadimos reactivo de
  Kovacs, lo impregnamos y a partir del tubo con la bacteria
  problema tomamos un poco con el asa de platino y
  ponemos en el papel. Tras unos 30 segundos, observamos
  si ha ocurrido algún cambio.
Las bacterias que dan positivo a esta prueba tienen
 generalmente un ciclo respiratorio oxidativo.
Se considera positva esta prueba cuando toma un
 color púrpura la muestra
(+) Pseudomonas aeruginosa
( - ) Escherichia coli
 El Objetivo es buscar la presencia de la enzima catalasa


 Prodecimiento:


  Agregamos aproximadamente 5 ml. de peróxido de
  hidrógeno al 3% a un tubo de ensayo previamente
  esterilizado a continuacion tomamos una muestra de la
  cepa del microorganismo a estudiar y la introducimos por
  el tubo de ensayo, la muestra solamente debe acercrse a la
  muestra de la solucion liíquida de peróxido de hidrogeno y
  debemos observar la reacción de esta.
La prueba se considera como positiva si observamos
 burbujas de oxígeno
Resultados:
(+) Staphylococcus aureus
( - ) Streptococcus spp.
La coagulasa es un enzima capaz de desnaturalizar la
 bibrina del plasma. El objetivo es buscar en factor de
 aglutinación de los microorganismos cuando estos se
 mezclan con el plasma. Esta prueba se utiliza para
 diferenciar microorganismos del
 generoStaphylococcus.
Preparamos una mezcla de 0,1 ml. de CCC (caldo
 cerebro corazon) y 0,3 ml. de plasma de conejo en un
 tubo de ensayo previamente esterilizado. La muestra
 ya contiene cepas de St. Aureus. Tapamos el tubo de
 ensayo con algodón hidrofílico y lo llevamos a baño
 María a 37° C durante una hora, observando la
 muestra cada 15 minutos. Al completar la hora,
 sacamos las muestras y observamos sus resultados.
Estratificaremos los resultados en 4 distintos niveles:
1: pequeños coágulos no organizados
2: pequeños coágulos organizados
3: gran coágulo organizado
4: todo el contenido aparece coagulado y se mantiene
 cuando invierte el tubo.
Se consideran positivos los niveles 3 y 4.
(+) Staphylococcus aureus
( - ) Staphylococcus epidermis.
Clasificación y propiedades de las Enterobacteriaceae

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Clasificación y propiedades de las Enterobacteriaceae

  • 1. Q.F.B. Telma Cerino Frias Grado: 4to Grupo: B Turno: matutino Integrantes: Juan Gerardo Bautista Martínez (SUKE) Carolina Cruz Cárdenas (UKE) Karen Yoczely Cruz Cortes (SUKE) Katherine Esqueda Ble (SEME) Jaqueline Jesús León (UKE) Karla Gpe Mijangos Arzat (SUKE) Elisa Pérez de la Cruz (UKE) Selena Pérez Pérez (SUKE) Efrain Roman Ocaña (SEME)
  • 2.
  • 3. La más importante, es la familia Enterobacteriaceae, formada por numerosas especies, muy grandes, gran importancia clínica. Hay 27 géneros y hasta 102 especies.
  • 4. Bacilos Gram (−) anaerobios facultativos, de tamaño moderado, extremos redondeados, móviles, (flagelación peritrica), no forman esporas y son catalasa (+) y oxidasa (−), requerimientos nutricionales simples.
  • 5. Los bacilos gram negativos que no forman esporas constituyen un gran grupo de bacterias que incluye: Comensales intestinales: Escherichia y proteus. Patógenos entéricos: salmonella, shigella y algunas cepas de Escherichia.
  • 6. Patógenos de los tractos respiratorio y urinario: klebsiella Basilo de la peste: yersinia Y una gran variedad de saprofitos y patógenos vegetales
  • 7. Los anaerobios facultativos constituyen el segmento mayor de estos bastones gram negativos. Este grupo esta formado por dos familias: Enterobacteriaceae y vibrionaceae.
  • 8. Las vibrionaceae son bacilos curvos rígidos, y normalmente son móviles porque tiene flagelos polares. El objetivo son las Enterobacteriaceae o bacilos entéricos, que se distinguen por la presencia habitual de flagelos peritricos.
  • 9. La mayor parte de estas bacterias se encuentran en el intestino del hombre y de otros animales, en el que se comportan como comensales de potencial patógeno limitado. A veces provocan diarreas, o con mucha menos frecuencia, infecciones en los tejidos.
  • 10. Algunas son saprofitas de vida libre en el suelo y en el agua, y otras son patógenas para las plantas.
  • 11.  Clasificación y nomenclatura de las Enterobacteriaceae.
  • 12. . En general, se reconoce que la subdivisión de las Enterobacteriaceae en tribus, géneros y especies convencionales, debe basarse en la relación genética, especialmente en la integración interespecie de los genes cromosómicos: en la similitud de la ordenación de los genes en el cromosoma; en la química comparada del genoma; y en la homología estructural de proteínas específicas.
  • 13. Las relaciones Taxonómicas de las Enterobacteriaceae se basan en diferentes reacciones bioquímicas, en la sensibilidad frente a bacteriófagos y en la hibridación de DNA. En el presente, la denominación de las subdivisiones tribales no tiene una categoría formal, pero sirven para aclarar las relaciones entre los géneros.
  • 14. Escherichia E. collí Escherichiae Shigella S.Dysenteria e S.Flexneri S.Boydii S.sonnei Edwardsiell E.tarda Edwardsielleae a S.cholerasuis. S.Typhi S.Enteritidis Salmonella Salmonelleae Arizona A.hinshawii Cirobacter C.Freundii C.Diversus C.amalonoticus
  • 15. K.Pneumoniae Klebsiella K.Ozaenae K.Chinoscleromatis K.oxytoca Klebsielleae Enterobacter E.aeroges E.Cloacae E.Agglomerans E.Sakasakii E.gergoviae Hafnia H.alvein Serratia S.Marcescens S.Liquifaciens S.rubidea Y.Pestis Y.Pseudotuberculosis Yersinieae Yersinia Y.Enterocolitica Yintermedia Yfrederiksenii Y.ruckeri
  • 16. Proteus P.Miriabilis P.vulgaris Proteeae Providentia P.Rettgeri P.Stuartii P.alcaliquifacien s Morganella M. morganii Erwinieae Erwinia
  • 17.
  • 18.  En este pequeño bloque examinaremos algunas de las propiedades que tiene en común los bacilos entérico, como lo son:  Morfología  Estructura Bioquímica  Composición antigénica
  • 19.  Las bacterias entéricas son:  Bacilos aerobios, anaerobios facultativos.  Gram(-).  No esporulados.  Algunas forman capsulas(klesiella).  Algunas forman cepas de Enterobacter y Serratia.  La mayoría son móviles por flagelos peritricos.  Shigella, Klebsiella y Yersinia no son móviles.
  • 20. Productoras de Fimbrias(Escherichia, Klebsiella, Proteus, Salmonella y Shigella) Su tamaño característico oscila de 1.0a1.5 x 2.0a6.0um.  Al igual que sus formas estas varían,  Proteus : evidencia de filamentos, Esferoplastos y otras formas aberrantes. Yersinia : forma cocoide u oval siendo la mas pequeña del grupo.
  • 21.  La Morfología de las Colonias de todas las Bacterias entéricas son muy similares.  En medios bacteriológicos ordinarios, las colonias suelen ser:  Lisas, húmedas y Brillantes  Color Gris  En ocasiones observaremos colonias rugosas, secas, friables y no se emulsionan fácilmente en solución salina
  • 22.  La presencia de capsulas o de mucilago flacilago se refleja en general en colonias con formas de cúpula de consistencia mocoide y viscosa  Algunas Cepas son hemoliticas en agar sangre (Escherichia y proteus)  Produccion de Pigmentos, rojos en condiciones de crecimiento (Serratina).  Produccion de Pigmentos, desde cremoso a amarillento en condiciones de crecimiento (Erwinia).
  • 23.
  • 24. Entre las Enterobacteriaceae la designación de género y, en muchos casos, de las especies se basa sobre todo en parámetros bioquímicos. La diferenciación más precisa, en categorías específicas en algunos casos y en serogrupos, serotipos, y variedades, depende de reacciones serológicas que detectan antígenos de superficie.
  • 25. Estos antígenos pertenecen a tres clases principales: Antígenos O somáticos. Antígenos H flagelares. Antígenos K de la envuelta o capsulares.
  • 26.
  • 27. Los antígenos O somáticos son lipopolisacaricos termoestables comunes en todas las bacterias lisas gramnegativas. Están presentes en la membrana externa y son responsables de la actividad endotoxina relacionada con las bacterias gramnegativas.
  • 28. La reacciones de los antígenos O se superficie con anticuerpos homólogos tienen como resultado la aglutinación de las células bacterianas, produciendo agregados celulares muy adherentes, que aparecen macroscópicamente como gránulos finos, los cuales se depositan rápidamente en la suspensión.
  • 29. La variación de la forma colonial desde lisa a rugosa (variación S-R) está acompañada por una perdida progresiva de antígeno O liso y por ultimo, se produce una cepa bacteriana rugosa (R) cuyo lipopolisacarido carece de las cadenas laterales O- especificas y solo retienen la estructura basal del núcleo. Por lo tanto las cepas rugosas no reaccionen con anticuerpos O-específicos.
  • 30.
  • 31. Los flagelos de las bacterias móviles poseen proteínas especificas serológicamente (flagelinas) las cuales, a diferencia de los antígenos O, son termolábiles y se destruyen con etanol. Cuando estas bacterias móviles se hacen reaccionar con anticuerpos antiflagelares específicos, la observación microscópica revela la existencia de una asociación débil de muchas células con enmarañamiento y entrelazamiento de sus flagelos.
  • 32. La terminología de los antígenos H y O surgen del hecho de que las bacterias móviles crecen con frecuencia como una película delgada en medios húmedos. Los investigadores alemanes llamaron Hauch a esta película (puff o film); las cepas móviles y sus antígenos flagelares se denominaron H. Las cepas que crecen como colonias discretas en medios húmedos (Ohne Hauch, sin nube o película) no son móviles y se denominan O.
  • 33. Las bacterias móviles pueden perder su capacidad para producir flagelos, aunque aún retienen su especificidad para el antígeno O. Esto se conoce como variación OH-O.
  • 34.
  • 35. Los antígenos K aparecen en las Enterobacteriaceae como capsulas, o como antígenos de la envuelta, que cubren los antígenos O de superficie. Debido a esto, los antígenos K bloquean la aglutinación producida por los anticuerpos O-específicos. Generalmente los antígenos de esta clase son polisacáridos y su capacidad de reacción suele ser alterada por el calor, de modo que un tratamiento de este tipo producen cepas aglutinables con antisueros O.
  • 36. La terminología de antígeno K, varia un poco en los distintos géneros.. En las pocas Salmonella que poseen antígeno K, se denomina antígeno Vi. Por lo general, los antígenos K de Escherichia son polisacáridos, pero en algunos casos, están compuestos por proteínas y aparecen como fimbrias en la superficie celular.
  • 37. Es una sustancia hapténica También denominada antígeno de Kunin.
  • 38. Están localizados en la membrana externa de la envoltura celular bacteriana y juegan un papel muy importante en la patogénesis de las infecciones bacterianas, así como en la interacción con el hospedero Figura 1. unión del hepteno
  • 39. Es inmunogenico; sin embargo en la mayoría de las bacterias entéricas se encuentran de forma libre. Figura 2. Anticuerpos
  • 41. anticuerpo antígeno Los anticuerpos contra ECA Pueden detectarse en el suero humano
  • 42.
  • 43. Junto con otras bacterias Gram- negativas, las enterobacteriaceae contienen varias proteínas importantes en la membrana externa. Estas proteínas son antigénicas y contribuyen al mosaico antigénico de las enterobacterias.
  • 44.  Un antígeno es una sustancia que desencadena la formación de anticuerpos y puede causar una respuesta inmunitaria. Los antígenos son usualmente proteínas o polisacáridos. Esto incluye partes de bacterias (cápsula, pared celular, flagelos, fimbrias, y toxinas), de virus y otros microorganismos. Los lípidos y ácidos nucleicos son antigénicos únicamente cuando se combinan con proteínas y polisacáridos
  • 45.  . Los antígenos no-microbianos exógenos (ajenos al individuo) pueden incluir polen, clara de huevo, y proteínas de tejidos y órganos trasplantados, o proteínas en la superficie de glóbulos rojos transfundidos.
  • 46.  Hay una considerable capacidad de reacción serológicas cruzadas entre las proteínas principales de las membranas externas que pertenecen a cepas relacionadas. Scherichia Coli.
  • 47.  Además de las proteínas principales de la membrana externa, las enterobacteriaceae parecen poseer un antígeno lipoproteico común. Esta lipoproteína se encuentra en la cara interna de la membrana externa, y esta unida al peptidoglucano de la pared celular y probablemente tiene algún papel en la estructura y organización de la pared celular.
  • 48. Los anticuerpos contra esta lipoproteina se producen en un numero importante de los individuos que padecen infecciones sistemáticas por enterobacterias. 
  • 49.  Una toxina es una sustancia venenosa producida por células vivas u organismos, como animales, plantas, bacterias y otros organismos biológicos; Para destacar su origen orgánico, se habla a veces también de biotoxina. Sustancias artificiales, creadas por procesos artificiales.
  • 50.
  • 51. Las bacterias poseen un genotipo que transmiten por herencia y un fenotipo que depende de las circunstancias que les rodean. Las bacterias sufren variaciones en sus caracteres y son de dos tipos; fenotípicas o adaptaciones y genotípicas
  • 52. VARIACIONES FENOTÍPICAS O ADAPTACIONES •Se producen por la presión ambiental sobre las bacterias, pero no afecta al genoma. •Son de alta frecuencia. Afectan a toda la población bacteriana sometida a la modificación ambiental.
  • 53. •Son reversibles ; cuando cesa la causa, retornan al estado primitivo. •No son hereditarias, porque no se modifica el ADN.
  • 54. • Morfológicas; Bacilos cortos y móviles se convierten en bacilos largos e inmóviles debido al agotamiento de nutrientes). • Cromógenas. • Enzimáticas; algunas bacterias producen enzimas en presencia de determinados sustratos, por ejemplo, penicinilasa en presencia de penicilina.
  • 55. •Patogénicas; Bacterias que producen toxinas según el ambiente en el que crecen. así Corynebacterium sólo lo hace si dispone de hierro en el medio. •Sensibilidad a antibióticos; hay bacterias que son sensibles en determinadas condiciones pero no lo serán en otras.
  • 56. La variabilidad genética es interesante desde el punto de vista de que muchas de estos cambios genéticos aportan resistencia a estas bacterias a ciertos medios, antibióticos.
  • 57. Mutación; cambio transmisible en el genoma bacteriano, que es transmisible. Estas mutaciones pueden ser puntuales y suficientes para dar lugar, por ejemplo, a una resistencia por el cambio en la transducción de un proteína.
  • 58. Pueden ser mutaciones de segmentos del DNA, sustituciones de nucleótidos, y microinserciones, o por el contrario provocar alteraciones en regiones más grandes (inserciones y selecciones).
  • 59.
  • 60. •Las bacterias se transmiten material genético a través de DNA libre en el medio, elementos episomiales. •La bacteria receptora tiene mecanismos para captar el DNA a través de sus envolturas externas e introducirlo en su cromosoma. •Los genes intracrosomales se recombinan dando lugar a genes mosaico.
  • 61. •Se produce cuando dos bacterias tienen contacto entre ellas para intercambiar material genético. Así se transmiten plásmidos, y otros elementos.
  • 62. •Durante la conjugación las bacterias donadoras poseen una estructura, conocida como '' pili'' en gram negativos, lo cual hace contacto con la célula receptora. •Pasa una cadena de los plásmidos a la bacteria receptora quedando una en la bacteria donadora.
  • 63. •Los plásmidos pueden adquirir genes de resistencia por conjugación (transposones e integrones).
  • 64.
  • 65. •Transferencia de información genética de una célula a otra a través de un virus. •Estos virus se denominan bacteriófagos o fagos. •Penetran las membranas y la pared celular de la bacteria para inyectarle su material genético.
  • 66. Durante la replicación del fago, éste puede llevarse material genético de la bacteria huésped, tanto plásmidos como material cromosómico. Luego salen de la bacteria, e infectan a otras, a las cuales les transmite e integran el DNA que llevan.
  • 67.
  • 68. Es un proceso relativamente complejo, y se realiza de un modo as adecuado en los laboratorios clínicos que poseen personal cualificado y experto.
  • 69. Recogida de muestras Se pueden encontrar bacilos entericos e heces, orina, abscesos,sangre heridas, esputos, y fluidos corporales  Deberan recogerse con cuidado para evitar la contaminacion exogena Trasportarse rapidamente y ser cultivadas Se pueden refrigerar durante cortos periodos de tiempo
  • 70. Aislamiento La selección de un medio de aislamiento apropiado depende del numero y la clase de bacilos entericos El grado y tipo de contaminacion Contienen un gran numero de microorganismos contaminantes
  • 71. Medios de aislamiento Medios de enriquesimiento No selectivos Nutrientes o infusion de agar Caldo GNC(gramnegativas) Agar sangre Caldo de tetrationato No selectivo diferencial Caldo de tetrationato-verde Agar lactosa con indicador brillante Poco selectivos, diferenciales Agar eosina-azul de metileno Caldo de seleita F Agar macConckey Agar desoxicolato Moderadamente selectivos dife Renciales Agar salmonella-shigella Agar desoxicolato-citrato Agar hektoen-enterico Agar xilosa-lisina desoxicolato Muy selectivos Agar sulfito de bismuto Agar verde brillante
  • 72. Las enterobacterias son Gram negativas y contienen más de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener morfología de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros órganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos. .
  • 73. Para cultivarlas se hace sembrado en forma de estría, se cultiva a 37º C de 18-24hrs, para posteriormente refrigerar.
  • 74. Para obtener un cultivo axénico: (a)esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama de un mechero, (b) (b) introducirla en la suspensión bacteriana para recoger una muestra, (c)(c) sembrar haciendo estrías sobre la superficie de un medio sólido en una placa Petri, y
  • 75. (d) volver a esterilizar el asa, tocar en la zona de la placa ya sembrada y hacer un segundo grupo de estrías en una región nueva de la placa. Repetir el proceso una tercera y una cuarta vez, hasta conseguir que los grupos de células se diluyan y se separen células aisladas. (e) Después de la incubación, se desarrollan colonias aisladas. Para estar seguro de que el cultivo es puro, repetir el proceso entero; para ello tomar una colonia aislada y sembrar por estrías una segunda placa.
  • 76.
  • 77.  Prueba de la Oxidasa  El objetivo de la prueba “Oxidasa” es buscar la presencia de la enzima Citocromo C oxidasa.  Procedimiento:  Con un pequeño papel de filtro añadimos reactivo de Kovacs, lo impregnamos y a partir del tubo con la bacteria problema tomamos un poco con el asa de platino y ponemos en el papel. Tras unos 30 segundos, observamos si ha ocurrido algún cambio.
  • 78. Las bacterias que dan positivo a esta prueba tienen generalmente un ciclo respiratorio oxidativo. Se considera positva esta prueba cuando toma un color púrpura la muestra
  • 79. (+) Pseudomonas aeruginosa ( - ) Escherichia coli
  • 80.  El Objetivo es buscar la presencia de la enzima catalasa  Prodecimiento: Agregamos aproximadamente 5 ml. de peróxido de hidrógeno al 3% a un tubo de ensayo previamente esterilizado a continuacion tomamos una muestra de la cepa del microorganismo a estudiar y la introducimos por el tubo de ensayo, la muestra solamente debe acercrse a la muestra de la solucion liíquida de peróxido de hidrogeno y debemos observar la reacción de esta.
  • 81. La prueba se considera como positiva si observamos burbujas de oxígeno Resultados: (+) Staphylococcus aureus ( - ) Streptococcus spp.
  • 82. La coagulasa es un enzima capaz de desnaturalizar la bibrina del plasma. El objetivo es buscar en factor de aglutinación de los microorganismos cuando estos se mezclan con el plasma. Esta prueba se utiliza para diferenciar microorganismos del generoStaphylococcus.
  • 83. Preparamos una mezcla de 0,1 ml. de CCC (caldo cerebro corazon) y 0,3 ml. de plasma de conejo en un tubo de ensayo previamente esterilizado. La muestra ya contiene cepas de St. Aureus. Tapamos el tubo de ensayo con algodón hidrofílico y lo llevamos a baño María a 37° C durante una hora, observando la muestra cada 15 minutos. Al completar la hora, sacamos las muestras y observamos sus resultados.
  • 84. Estratificaremos los resultados en 4 distintos niveles: 1: pequeños coágulos no organizados 2: pequeños coágulos organizados 3: gran coágulo organizado 4: todo el contenido aparece coagulado y se mantiene cuando invierte el tubo. Se consideran positivos los niveles 3 y 4. (+) Staphylococcus aureus ( - ) Staphylococcus epidermis.