Este documento describe los procedimientos para observar tejidos vegetales, células en división y gránulos de almidón al microscopio. Se explica cómo preparar muestras de tejidos como la cebolla y la espinaca para observar los tejidos fundamentales, protectores y conductores. También se detallan los pasos para teñir raíces de cebolla en división y anteras de flores para estudiar la mitosis y meiosis. Por último, se indica cómo preparar patatas y semillas para visualizar los gránulos de almid
1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO
FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS
BIOLOGÍA GENERAL
“OBSERVACIONES AL MICROSCOPIO”
Tejidos vegetales, células, división celular y gránulos de almidón.
1. INTRODUCCIÓN
Tejidos vegetales
En los vegetales superiores las células se agrupan para construir tejidos que desempeñan diversas funciones.
Clasificación:
1 Tejidos meristemáticos
2 Tejidos adultos o definitivos
2.1 Tejidos protectores
Epidermis
Exodermis
Súber o corcho
2.2 Tejidos absorbentes
Rizodermis
2.3 Tejidos mecánicos
Colénquima
Esclerénquima
2.4 Tejidos fundamentales
Parénquima
2.5 Tejidos conductores
Xilema
Floema
3 Tejidos glandulares
La célula - división celular
En los tejidos en los que las células se dividen activamente (tejidos embrionarios), se pueden teñir los cromosomas
y observar las fases de la Mitosis. Un ejemplo de estos tejidos es el meristemo que se encuentra en el ápice de una
raíz en crecimiento. El proceso de reproducción celular conocido con el nombre de mitosis, puede ser estudiado
eligiendo un material constituido por células que se hallen en continua división.
Por otra parte la división especial que se produce en las células que originarán los gametos, llamada División
Meiótica, es el eje del proceso de diferenciación celular que culmina en las células que podrán formar un nuevo
individuo de la especie, pues es durante esta doble división, con una sola duplicación del material genético, que se
produce la reducción del número cromosómico (de diploide a haploide), y el reordenamiento del material genético
procedente de cada uno de los progenitores.
Gránulos de almidón
El almidón es un polisacárido de reserva alimenticia predominante en las plantas, constituido por amilosa y
amilopectina. Proporciona el 70-80% de las calorías consumidas por los humanos de todo el mundo. Los tamaños
y las formas de los granos de almidón de las células del endospermo, varía de un cereal a otro; en el trigo, centeno,
cebada, maíz, sorgo y mijo, los granos son sencillos, mientras que los de arroz son compuestos. La avena tiene
granos sencillos y compuestos predominando estos últimos.
La mayor parte de los granos de almidón de las células del endospermo prismático y central del trigo tiene dos
tamaños: grande, 30-40 micras de diámetro, y pequeño, 1-5 micras, mientras que los de las células del endospermo
sub-aleurona, son principalmente de tamaño intermedio 6-15 micras de diámetro. En las células del endospermo
PROFESOR: Ing. Mg. María Teresa Pacheco SEMESTRE: 2º de Ingeniería en Alimentos
e Ingeniería Bioquímica.
AYUDANTE: Egda. Paulina Rodríguez PRÁCTICA: No. 1
2. sub-aleurona hay relativamente más proteína y los granos de almidón están menos apretados que en el resto del
endospermo.
2. OBJETIVO
Reafirmar el conocimiento general sobre la célula mediante la aplicación de técnicas de microscopía.
3. MATERIALES
a) Una cebolla larga, una hoja de acelga, hojas de rosa.
b) Prefloraciones (Curcurea colombiana), arvejas en germinación, una cebolla paiteña en crecimiento.
c) Una patata, 5 g de fréjol, 5 g de maíz, 5 g de trigo.
Microscopio
Porta objetos
Cubre objetos
Micrómetros: ocular y objetivo
Bisturí
Azul de metileno
Agua destilada
Aguja de disección
Papel de filtro
Solución colorante (aceto carmín y orceína acética)
Ácido clorhídrico
4. PROCEDIMIENTO
a) Tejidos vegetales
1. Hacer cortes de tejido parénquima de la cebolla y llevarlo al microscopio. Observar el tejido vivo y luego la
parte intercelular (oscura).
2. Hacer un blanching a 60ºC por 30 seg. a los tejidos de la cebolla y observar. Determinar los espacios
intercelulares.
3. Observar células de manzana. Distinguir varias células.
4. Identificar células de la corteza de los fréjoles aquí se observará el tejido protector.
5. Hacer cortes transversales de los tallos de espinaca y acelga. Observar al microscopio tejidos vasculares.
Luego cocinarlos y observarlos de nuevo.
6. Hacer cortes longitudinales de tallos jóvenes y de tallos viejos. Observar al microscopio. Cocinarlos y ver
nuevamente al microscopio.
7. Hacer un corte transversal de la hoja de acelga. Escaldarlos y observar al microscopio.
b) La Célula, división celular
Mitosis
1. En un vaso casi lleno de agua, mantener un bulbo de cebolla durante varios días con la parte de las raices en
contacto con el agua. Se puede mantener la cebolla erguida con ayuda de unos mondadientes. Se conseguirán
nuevas raicillas en crecimiento, en cuyo ápice las células estarán multiplicándose.
2. Cortar los últimos 2 mm de la parte del ápice e introducirlos en un vidrio de reloj, cubriéndolos con la solución
colorante.
3. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama de un mechero hasta la emisión de vapores, evitando la
ebullición. Mantener las raicillas cubiertas por el colorante durante unos minutos, añadiendo colorante si se
evapora del todo.
4. Tomar con unas pinzas las raicillas y depositarlas en un portaobjetos, cubriéndolas con más colorante y con unas
gotas de ácido clorhídrico. Dejar actuar el colorante y el reactivo al menos durante tres minutos.
5. Cubrir la muestra con un cubreobjetos y golpear suavemente con la contera de un lápiz o bolígrafo hasta aplastar
levemente la raicilla.
6. Colocar sobre el cubreobjetos un papel de filtro, doblado varias veces, y presionar con el pulgar suavemente
hasta el aplastamiento de la muestra. (El papel de filtro entre la preparación y el dedo debe colocarse para no
mancharse de colorante ya que es algo tóxico y conviene no tocarlo y no respirar sus vapores).
7. Retirar el papel de filtro y observar la muestra al microscopio.
3. Meiosis
1. Obtener las anteras más tiernas con la aguja de disección.
2. Colocar 4 o 6 anteras en el centro del vidrio reloj.
3. Fijar la muestra con ácido clorhídrico durante 3 min.
4. Colocar al muestra en el porta objetos y teñirla con carmín acético de 8 a 10 min.
5. Cubrir con el cubre objetos.
6. Aplastar con el papel absorbente o higiénico para diseminar el material.
7. Observar la preparación al microscopio e identificar las distintas fases.
c) Gránulos de almidón
1. Partir una patata y raspar con la punta del bisturí, depositando el producto obtenido en un porta objetos.
2. Dejar secar completamente y teñir con unas gotas de lugol o yodo. Dejar actuar dos minutos.
3. Poner el cubre-objeto y observar al microscopio.
4. Puede rasparse también distintas semillas (judía, guisante, habichuela, maíz, etc, realizando el proceso similar al
del raspado de la patata. Es conveniente para poder ver el aspecto distinto de amiloplastos en distintas plantas.
5. Con poco aumento buscar la zona de la preparación en la que los granos estén menos aglutinados, localizada
ésta, cambiar a aumentos mayores. Observar cerrando el diafragma lo máximo permitido por el foco luminoso.
6. Los granos de almidón se tiñen en color violeta intenso por el lugol o iodo. Los granos muestran por lo general,
capas concéntricas de crecimiento del grano, estas formas son muy variadas y por lo general específica de cada
planta, fruto o semilla. Los de patata presentan las capas de crecimiento en bandas excéntricas alrededor de un
punto central.
5. DATOS OBTENIDOS
Presentar los gráficos de todo lo observado, señalando partes o elementos.
6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:
7. CUESTIONARIO
7.1 En qué campos de la investigación puede servir la diferenciación de tejidos..?
7.2 A qué se debe la diferencia de rigidez entre una alga y una planta leñosa..?
7.3 Porqué es tan importante la naturaleza semipermeable de la célula…?
7.4 Averiguar cómo influyen el Na y el K sobre el funcionamiento de estomas y el NaCl sobre la célula.
7.5 Indicar la composición de los colorantes utilizados en la práctica.
7.6 Realice un cuadro comparativo con las semejanzas y diferencias entre el proceso de mitosis y el proceso de
meiosis.
7.7 ¿Qué es citocinesis?
7.8 Para qué puede servir la identificación microscópica de almidón..?
8. CONCLUSIONES
9. BIBLIOGRAFÍA