Este documento proporciona instrucciones para realizar una práctica de microscopía para diferenciar tipos de células sanguíneas. Explica cómo obtener una muestra de sangre, preparar un frotis sanguíneo, teñirlo y observarlo bajo el microscopio para identificar eritrocitos, leucocitos como linfocitos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos y monocitos, así como plaquetas. El objetivo es familiarizar a los estudiantes con el uso del microscopio y ayudar

1. Practica # 1:
MICROSCOPIA CON
DIFERENCIACION DE CELULAS
HEMATICAS.
Dra. Patricia Gómez Ruelas.

2. Familiarizar al estudiante con el uso del microscopio.
Fundamento:
El microscopio es el instrumento de trabajo mas empleado por
el microbiólogo, a través del cual se observan las estructuras
invisibles al ojo humano.
Se conocen diversos tipos de microscopios, con diferentes
aplicaciones, como el óptico, el de campo obscuro , el de
contraste de fase, el de la luz polarizada, el de fluorescencia y
el electrónico
Objetivo:

3. 1.- Limpiar las lentes con el papel esencial para dicho
objetivo.
2.- Colocar en posición el objetivo seco débil
(10x), que se conoce por el click que se escucha
cuando esto se ha logrado.
3.- Encender la fuente luminosa.
4.- Colocar la preparación en la platina.
5.- Por el medio del tornillo del enfoque grueso, bajar
el tubo de microscopia hasta el tope.
USO DEL MICROSCOPIO.

4. 6.- observando por los oculares, subir el tubo
nuevamente hasta ver enfocada la preparación.
7.- Si se va a usar el objetivo seco fuerte
(40x), después del paso 5, se cambia aquel sin
necesidad de subir el tubo, si el microscopio lo
permite.
Esta operación debe hacerse con cuidado, pues hay
modelos de aparato que no son parafocales.
Repetir el paso 6, ajustando la intensidad luminosa por
medio del condensador y el diafragma iris.

5. 8.- para observar con el objetivo 100x
(de inmersión) deberá colocarse una
pequeña gota de aceite de inmersión
sobre la preparación y se sigue el paso 6
para enfocar.
9.- al terminar de usarlos, limpiar los
lentes con papel especial, sobre todo el
objetivo de inmersión.

7. INMUNOLOGIA: estudio de los mecanismos fisiológicos
que el ser humano y otros animales utilizan para defender
su cuerpo contra la invasión por otros organismos.
Las enfermedades infecciosas son causadas por mos., que
tienen la ventaja de reproducirse y evolucionar más
rápido que los huéspedes humanos.
Durante una infección, el mo puede reproducirse. En
respuesta, el cuerpo humano reproduce cels dedicadas a
la defensa, conocido como sistema inmunitario

8. DIFERENCIACION DE CELULAS
HEMATICAS
Anemias - serie roja.
Leucemia e infecciones-
serie blanca.
Purpura- plaquetas
Ayuda al diagnostico en:
La observación microscópica de un
frotis sanguíneo nos indica:
Forma, tamaño y anormalidades de los
eritrocitos que conducen al
diagnostico de padecimientos
hematológicos.

12. El sitio anatómico de la
hematopoyesis cambia con la
edad. En las 1eras fases
embrionarias, las céls
sanguíneas se producen 1ero en
el saco vitelino y más tarde en el
hígado fetal. Del 3ero al 7mo
mes de vida fetal, el bazo es el
principal sitio de hematopoyesis.
Durante el desarrollo de los
huesos en los meses 4to y 5to
del crecimiento fetal, la
hematopoyesis comienza a
trasladarse a la médula ósea, y
hacia el momento del
nacimiento éste es el único sitio
en que ocurre.

13. En el adulto la hematopoyesis se realiza
principalmente en médula ósea de
cráneo, costillas, esternón, columna vertebral, pelvis y
fémures.
Estas células sanguíneas viven poco, deben renovarse
continuamente, y la hematopoyesis es activa por toda
la vida.

14. LINFOCITOS
Provienen de los linfoblastos
de la medula ósea y se
distribuyen en la sangre, donde
corresponden de 20 a 30% de
los leucocitos circulantes Se dividen en:
B y T

15. pequeños- miden entre 6 a 10 um de diámetro.
Grandes – miden entre 10 a 20 um de diámetro.
Se clasifican:
CARACTERISTICAS:
Núcleo voluminoso en comparación con el
citoplasma, redondo u ovalado y muy basófilo, se
colorea de color rojo violáceo obscuro y su cromatina es
densa.
Su citoplasma se tiñe de color azul celeste intenso.

16. Fiebre.
Hepatitis vírica.
Hipertiroidismo.
Leucemia linfocítica
Tuberculosis.
Mononucleosis infecciosa.
Paperas.
Rubeola.
Tosferina.
Los linfocitos se encuentran elevados
en:

17. NEUTROFILOS.
Leucocitos mas abundantes en la
sangre del humano
Representa del 50 al 60 % del total de
leucocitos
IMPORTANCIA EN:
- Componente celular de la inflamación infecciosa aguda.
- Inflamación mediada por bacterias patogénicas.
- Reacciones en las que intervienen complejos antígeno-
anticuerpo.

18. Marginan las cavidades de las
células endoteliales, se
adhieren a esta y cruzan los
sitios de lesión

19. Diámetro aproximado entre 11 a 14 um.
Citoplasma abundante, lleno de gránulos
pequeños que no se tiñen en forma intensa
con colorantes ácidos ni básicos.
El núcleo se tiñe de rojo violáceo constituido
por dos o mas segmentos unidos entre si por
filamentos de cromatina
Características

20. Eosinofilos.
En sangre se encuentran del 1- 5 %
Citoplasma incoloro, cubierto de granulaciones
refringentes ricos en arginina y tienen afinidad por
los colorantes ácidos como la eosina y se tiñe de un
color rojo anaranjado.
Núcleo excéntrico en el citoplasma y bilobulado y
elipsoide

21. SE ENCUENTRAN ELEVADOS EN:
• Alergia a fármacos.
• Anemia perniciosa.
• Picadura de araña viuda negra.
• Asma bronquial.
• Colitis ulcerativa.
• Enfermedad de Cronh.
• Dermatitis hipertiforme.
• Enfermedad por Echinococcus.
• Policitemia vera.
• Postradiccion.
• Triquinosis.

22. • Eritema multiforme.
• Fiebre de heno.
• Intoxicación por fosforo.
• Gastroenteritis eosinofilica.
• Enfermedad de Hodgkin
• Leucemia miolegena crónica.
• Pénfigo.
• Poliarteritis nudosa.
• Postesplenectomia.
• Sarcoidosis.
• urticaria

23. Basófilos.

24. ELEVADOS:
Anemia hemolítica crónica.
Embarazo.
Mixedema.
Nefrosis.
Enfermedad de Hodgkin. Fase de infección
aguda.
Leucemia miologena
crónica.
Metaplasia mieloide.
Policitemia vera
Sinusitis crónica.
varicela

25. DISMINUIDOS O NEGATIVOS EN :
Hipertiroidismo.
Postesplenectomia.
postradiacion

26. Monocitos.
Núcleo
voluminoso, puede
ser
ovalado, escotado o
en forma de riñón o
herradura.
Citoplasma
abundante .

27. ELEVADOS:
Enfermedad de
Hodkin
Intoxicación por
tetracloroetano.
Tuberculosis.
Artritis
reumatoide.
Brucelosis.
Colitis ulcerativa
crónica

28. Malaria.
Metaplasia mieloide.
Policitemia vera.
Fiebre macular de las
montañas rocosas.
Leucemia monocitica.
Lupus eritematoso
sistémico.
Enfermedad de Crohn
Endocarditis infecciosa
Enfermedad de Gaucher

29. Eritrocitos.
Forma bicóncava, sin
núcleo y de color
rojo-amarillento
Mide 7-7.5 um

30. Plaquetas.
Células
anucleadas, poseen
glucógeno, ADP, ATP, y
enzimas glucoliticas y
trombostenina

31. ELEVADAS:
Deficiencia de
hierro.
Leucemia.
Linfoma o cáncer.
Terapéutica
postadrenalina.
Enf. Intestinales
inflamatorias.
Postesplenectomi
a.
Postratamiento
con vit. B12

32. DISMINUIDAS.
•Anemia aplasica.
•Anemia perniciosa.
•Complicación del
embarazo.
•Deficiencia de
folato.
•Enfermedad de
tejido conectivo.
•Infección vírica.
•Administración
de heparina.
•Mielodisplasia.
•Postransfusion
sanguínea.
•Fármacos.

33. REALIZACION DE LA PRACTICA
La sangre se obtiene del
pulpejo del dedo medio o
anular, aunque también se
puede obtener del lóbulo de la
oreja, previa limpieza del sitio
elegido, se hace la punción con
una lanceta, se limpia la
primera gota de sangre, y
ejerciendo ligera presión, se
deposita la segunda gota en un
portaobjetos limpio y seco, se
produce la preparación del
frotis.

34. Una vez hecha la
preparación, se deja
secar, se fija con metanol y
se tiñe con el
hemocolorante rápido de
sigma; un minuto en
solución No 1, lavar con
agua del grifo y sumergir
otro minuto en la solución
No 2; lavar con agua y secar
al medio ambiente
observar al microscopio
con 100x